Способ подготовки бактериальных культур сальмонелл для выявления энтеротоксина Советский патент 1986 года по МПК G01N33/53 G01N33/68 

1

Изобретение относится к медицине в частности к инфекционной патологии, а именно к биохическому способу подготовки бактериальных культур с целью их быстрого лизирования для выделения энтеротоксинов и других внутриклеточных субстанций.

Цель изобретения - ускорение способа при одновременном повьш ении чувствительности анализа. К осадку сальмонелл добавляют дистиллированную воду, полимиксин В в конечной концентрации 2 ,0-2,5 мг/мл, инкубируют смеси при физиологических услови- /IX в течение 1 ,0-1 ,5 ч и добавляют тритон Х-405 в конечной концентрации 0,UO,01%.

Пример 1. Бактериальные; культуры, сальмонелл (штамм S.typhi- murium 415), выращивают в любой жидкой питательной среде в объеме 10 мл в пробирках емкостью 40-50 мл в течение 24-30 ч при постоянном встряхивании из шуттель-аппэрата при 210 об/мин и . Далее полученные суспензии сальмонелл центрифугируют при 8000 об/мин в течение 15-20 мин. Супернатант сливают, а к осадку бактериальной культурь добавляют 0,5 мл дистиллированной воды, осадок ресуспендируют и переносят в конические агглютинационные пробирки. К осадку добавляют.полимиксин в концентрации 2,0 мг/мл. . Затем ставят инкубировать смесь на 1,0-1,5 ч в термостат при 37°С и после инкубации добавляют к пробам тритон Х-405 в конечной концентрации

Редактор Н, Рогулич Заказ 4816/44

Составитель И. Хрусталева

Техред Л,Сердюкова Корректор И. Муска

Тираж 778

Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-ЗЗ, Раушская наб,, д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная. 4

55935 2

0,1.1%. Пробы вновь инкубируют при 37°С 15-20 мин, полученные лизаты центрифугируют, Супернатант осторожно отсасывают и исследуют на наличие энтеро- 5 токсина в различных разведениях. Для испытуемого штамма энтеротоксин при указанных параметрах режимов выявлялся в разведении 1:4 и по степени реакции оценивался на 1 крест. Пример 2. Исследуют культуру сальмонелл того же штамма описанным способом, но концентрация добавляемого полимиксина В составляет 2,5 , а тритона Х-405 0,09%. При данных параметрах режимов энтеротоксин выявлялся в разведении 1:Д. Степень реакции оценивают на 2 креста.

Формула изобретения

Способ подготовки бактериальных культур сальмонелл для выявления энтеротоксина путем выращивания их в жидких средах, центрифугирования

и воздействия на полученный осадок повреждающим агентом, отличающийся тем, что, с целью уско- рения способа при одновременном повышении чувствительности анализа, к

осадку добавляют дистиллированную воду, затем полимиксин В в конечной концентрации 2,0-2,5 мг/мл, далее пробы инкубируют при физиологических условиях в течение 1,0-1,5 ч, добавляют тритон Х-405 в конечной концентрации 0,1±0,01%, вновь инкубируют,

Центрифугируют, а энтеротоксин выявляют в сулернатанте.

Подписное

Изобретение относится к биохимии. Цель изобретения - ускорение способа при одновременном повышении чувствительности анализа. Бактериальные культуры сальмонелл вьфащивают в любой идкой питательной среде. Полученные суспензии сальмонелл центрифугируют, супернатант сливают. К L осадку бактериальной культуры добавляют 0,5 мл дистиллированной воды. Осадок ресуспендируют и переносят в пробирки, к осадку добавляют полимик- син. Затем смесь инкубируют и к ней прибавляют тритон. Пробы вновь инкубируют, а полученные лизаты центрифугируют, В супернатанте определяют наличие энтеротоксина в различных разведениях. i СЛ