Гидрохлориды производных 1-алкил(арил)-2-диметиламинометил-3-карбэтокси-5-ацетокси(окси)индола, обладающие противовирусной активностью Советский патент 1992 года по МПК C07D209/16 A61K31/405 A61P31/14 C07D209/22 

бэтоксм-5-ацетоксииндола в 150 мл хлороформа прикапывают 8.8 г ,2 мл, 0,065 моль) хлористого сульфурила с такой скоростью, чтобы температура в реакционном растворе не превышала 0°С. По окончании прибавления всего количества хлористого сульфурила реакционный раствор оставляют без охлаждения, пока температура в нем не поднимется до 15°С. Реакционный раствор про- мывают водой до отсутствия кислой р еакции по Конго, хлороформный раствор сушат над MgS04. После фильтрации от MgS04 хлороформ отгоняют. Остаток пере- кристаллизовывают из четыреххлористого углерода. Выход 15,6 г (75,7%), т. пл, 136- 137°С.

Найдено, %: С 57,90; Н 5.25; С1 11,38; N 4,35.

CisHieCINO

.

Вычислено. %:СВ8,16;Н5,21;С1 11,45; . N4,52.

Спектр ПМР (CDCI3, внутр. ст, ТМС): 1,38 (тр., СН2СНз), 2,29 (с., ОСОСНз), 3,85 (с., N-СНз), 4,34 (кв., СН2СНз) 5,38 (с., 2-СЫ2). 7,70 (q, J4.6 2,0 Гц, 4-Н), 7,60 (Q, Лб, Гц, 7-Н), 7,00 (кв., J4,,0 Гц, J6. Гц, 6-Н).

б) Получение целевого продукта - гидрохлорида 1 -метил-2-диметиламмно-метил- 3-карбэтокси-5-ацетоксииндола (Iа).

К раствору 7 г (0,02 моль) 1-метил-2- хлорметил-З-карбэтокси-5-ацетоксииндола в 15 мл абсолютного диоксана прибавляют 4,08 г (0,04 моль) бис(диметиламино)метана и реакционный раствор кипятят с обратным холодильником 1 ч. Затем реакционный раствор выливаютвЗОмл воды. Выпавшее основание 1-мет11л-2-диметиламинометил-3-карбэток- си-5-ацетоксииндола отфильтровывают, сушат, перекристаллизовывают из метанола. Выход 6,4 г (88,9%), т.пл. 107-108°С.

Найдено, %; С 64,29; Н 6,89; N 8,73.

C17H22N204.

.

Вычислено, %: С 64,14; Н 6,96; N 8,80.

Спектр ПМР (CDCb, внутр. ст. ТМС): 1,44 (тр., СНгСНз) 2,28 с.. Ы-(СНз) 2,32 (с., ОСОСНз), 3,82 (с., N-СНз), 4,00 (с., 2-СН2), 4,37 (кв., СНаСНз), 7,81 (д, J4,,0 Гц, 4-Н), 7,30 (д, J6, Гц, 7-Н), 7,00 (кв., J4,,0 Гц, J 6, Гц, 6-Н).

Масс-спектр, т/е: 318 (М, 303 ( CHз) 289 (М -СаНб), 274 М -М(СНз)2Г. 273 (М -С2Н50), 272 (M -CaHgOH), 246 (М СООС2Н4) .

6,4 г 1-метил-2-диметиламинометил-3- карбэтокси-5-ацетоксииндола растворяют в абсолютном эфире и подкисляют эфирным раствором хлористого водорода до кислой реакции по Конго.

Выход 1а 6,9 г (96,9%), т.пл. 198-200°С (из 95%-ного водного ацетона). Найдено, %; С1 9,89.

C)7H23CIN204 .

Вычислено, %: С1 10,00. Аналогично получают соединения 1 г, е, ж (см. табл. 1).

Пример 2. Получение гидрохлорида 0 1-метил-2-диметиламинометил-3-карбэток си-5-оксииндола (16).

0,84 г (0,015 моль) гидрата окиси калия растворяют в 30 мл метанола при нагревании, добавляют 4,7 г (0,015 моль) 1-метил-2- 5 диметиламинометил-З-карбэтокси-5-ацеток сминдола и кипятят 1,5 ч. Затем реакционный раствор выливают в 100 мл воды, охлаждают.

Получают основание 1-метил-2-димети- 0 ламинометил-З-карбэтокси-5-оксииндола, его отфильтровывают, сушат и перекристаллизовывают из смеси петролейного эфира и бензола (1:0,5). Выход 2,5 г (62,5%), т. пл. 162-163°С. 5Найдено, %: С 65,02; Н 7,08: N 10,05,

С15Н20М203.

,

Вычислено, %: С 65,20; Н 7,29; N 10,14,

Спектр И К ( V- макс), , 1700 (); 0 3300 (ОН),

Гидрохлорид 1-метил-2-диметиламино- метил-З-карбэтокси-5-оксииндола (16) получают аналогично соединению 1а.

Выход 95% (из смеси ацетон - метанол), 5 т. пл. 247-248°С.

Найдено, %: С1 11,21.

C15H21CIN203.

.

Вычислено, %: С1 11,12.

0 Аналогично получают соединения 1в, д (см. табл, 1),

Исследование противовирусной активности соединений 1а-ж проводилось а лаборатории химиотерапии инфекционных 5 заболеваний ВНИХФИ.

Для изучения противовирусной активности соединений использована максимально объективная и количественна.ч методика - метод редукции бляшек под ага- 0 ровым покрытием с применением агардиф- фузионного теста.

Первично трипсинизированиую культуру клеток фибропластов эмбриона курицы (ФЭК) получали путем трипсинизации 9- 5 дневных куриных эмбрионов, В качестве тест-вирусов использовали вирус гриппа A/FPV (HON I) и вирус герпеса простого 1 типа (штамм Л2).

Монослой культуры клеток инфицировали разведениями вируса, содержащими

100-150 бляшкообразующих единиц на монослой. После адсорбции и удаления неадсорбировавшегося вируса культуры клеток покрывали агаровым покрытием,

Испытуемые соединения в концентрациях, составляющих от 1/2 до 1/16 максимально переносимой для культуры клеток концентрации, в объеме 0,05 мл наносили на диск фильтровальной бумаги диаметром 6 мм, который помещали на агаровое покрытие. Учет результатов проводили через 48 ч по проценту ингибирования бляшкообразо- вания в опыте по сравнению с количеством бляшек в контроле, принятым за 100%.

Изучение противовирусной активности соединений I а-ж проведено на 1152 про- бирках с монослоем клеточной культуры ФЭК, результаты обработаны статистически.

Токсичность соединений I а-ж изучали в опытах на культуре клеток ФЭК и на белых беспородных мышах (250 мышей и 130 пробирок с монослоем клеток).

На монослой 48-часовой культуры клеок- ФЭК наносили питательную среду № 199, содержащую испытуемое соединение в различной концентрации, и втечение5дней проводили микроскопию клеточных культур ля выявления цитотоксического действия оединений и определения максимально переносимой клетками концентрации МП К).

Мышам массой 18-20 г испытуемые содинения вводили внутрь в виде взвеси в 1 %-ном крахмальном клейстере в объеме ,5 мл 1 раз в день в течение 5 дней. Наблюдение за выживаемостью животных проводил в течение 14 дней и определяли максимально переносимую дозу (МПД) соединения.

5Сравнение проводилось с известным

соединением - гидрохлоридом 1-метил-2- фенилтиометил-З-карбэтокси-4-диметила- миномэтил-5-окси-6-броминдола (соединение А), обладающим противовирусной эк0 тивностью.

Результаты изучения противовирусной активности предлагаемых соединений I а-ж приведены в табл. 2.

Результаты и зучения соединений I а-ж

5 свидетельствуют о том, что эти соединения обладают высокой активностью в отношении вируса гриппа - от 75% до 90% подавления бляшкообразования по сравнению с контролем и превосходят по этому показа0 телю соединение А. Кроме того, соединение 1г оказывает также выраженное действие в отношении вируса герпеса простого, в то время как соединение А таким действием не обладает,

5 Обладая более выраженным действием, чем соединение А, соединения 1а-ж не ока- зыыают цитотоксического действия на клетки ФЭК в сопоставимых с соединением А концентрациях ( мкг/мл), но лучше

0 переносятся животными (МПД 350-1000 мг/кг по сравнению с 250 мг/кг для соединения А).

Таким образом, соединения I а-ж обладают более выраженным противовирусным

5 действием и меньшей токсичностью по сравнению с соединением А.

Физико-химические константы производных 2-дииетилэнииоиетип-3 кар6этокси(окси)индола

1 -Метил-2-яинет1-;ламлио-- 1-,стил-3 | 13рбэ гокси- 5

аийтокси-б-Ороммндол

1-Нетил-2-д и.утилами1Ю- квтмл°3-| 5рСэтокси-5

О1сси-6-0роиимр.6л

ГИлЛРОХЛОрИД J НОТИЛ- З

Г4иметиламиио лсть1л-3 KnpGS TOKCM-S-oKCH-b

5 -Феиил-2--динетиламииамотил-3 карбзтокси-5

сиятокси 6-Ч)ромипдол

Гк-Трохгю мд I - .te 1 ил-2- ;-:имй7 ила.чииоиетил-3 карС)этокси-5 Уцетокси- б-йромиядопо

( ()-2--ДМЗТИЛ1 мииоб оти;1-3 кар6: токси

5-йцогокс11();ромиидол

1 -(г1 Толил) -.л .илотил- нппомйТмл-З -KripOoToKcnГ1 ОКСИ 6--ирО -Ч-1Н/.1ОЛ

Г|--;;ро;о 1ори;-, 1 -{п-то лил) - . дii i;irм;ul..,1no..::тил 3 .-.vpO: Tei;cH-5-oKCM--U . ::o;t

168-1 70 (fietanon) I8U-189 (метанол)

2 5-2V& (этанол) 12Ы22 (иотанол)

222-223 (изопро- пиловый спирт)

(метанол) (метанол)

250-259(ацетомМ-2ГЙМОЛ;

51,2U S.27 19/93 /t tl C iHi BrNjO i51,ЗЭ 5,33 20,П 7,05 ИЗ,6

5,Ь7 - 22,ttti 7,95 CyjU BTN Og 50,70 5,39 - 22,9 7.89 5,

У 1

- :C,jKi5ClDrN,,03- - Э.З - - 38,7

I

57,76 5,03 - 17,08 fiJSCisHisBrNjO i57,52 5,06 - 17,3S 6.10 67,1

7,05 CjjHj,ClBrHj,0

7,15 98,2

su.a t.

50,33

5,30 5, t6

16, 17 S.liO Сд, Hjj DrNjOj 58,36 5,32 - 6,88 5,92 33,5 lU,5:2- 6,11 CjfHgsBrKjjOj 5a,J(8 5;37 - 18,526,50 95,0

7,60 Cjj HSI, ClBrNjOj 7,58 98,1

Т а О Л И Ц Q 1

CjjHj,ClBrHj,0

7,15 98,2

16, 17 S.liO Сд, Hjj DrNjOj 58,36 5,32 - 6,88 5,92 33,5 lU,5:2- 6,11 CjfHgsBrKjjOj 5a,J(8 5;37 - 18,526,50 95,0

Cjj HSI, ClBrNjOj 7,58 98,1

135-136 (метанол) 56,95 5,17 -16,04 5,52 C,,, lysrHjOj56,(5 5,15 -16,335,72 96,В

Г .г/1ро;- лсрид ) -(п-г.отил- :;;сс фсии;1) .м чил ЛХ5- ОМе ГН,М-3 оР ЭТоиСИ;з -л цу rcKcvi-6 -(ро: .индола

- (n-X opuoHtifi) . -.м номстил 3 нарЕЗ:VI - U-5-OLlaTOKCM-6: ;з«1г ДОЛ

27.6-227 (этанол)

6, Ш CjjKj.ClBrHjO - 6,56 9 ,3

139-UiO (этанол) 53,2( I), 5 7,1 16,1 S,/Cj H jClBrN Oj 53,1)0 i,68 7,16 16,155,66 87,2

229-230 (изопроги ЛОБЫЙ спирт)

6,53 Сгшктй ПКР (CDcy , внутр.ст. ТМС): соединения I г l.dli (Tp-CHjCllj), 2,09 tc. 2,39 (c.OCOCHj), 3,77 (с.2-СН,(),

i, iZ (itB. aijCHj), 7,25 7,ЭЬ (C..II-H ., 7-H), 7,3-7,5 (н.прот.аромат.ядра); соединения 1я 1,51 (тр.), ЗДЗ c.HCOlj),,

З, (с.рСОСИ), 1|,а (с.,), 5,2 (Ka.,CHj QI .), 7,(5 tc, N- n-CHjCgH) , 7,5В и 8,30 (с.-Н и 7-Н).

Спрктри ИС еоапинений t а,д имеют полосы поглоцения в области 1700-1770 2)30-2660 ем- и 3300 см- j уквзыозоииз из иалячиг слоиио фирной J и пшроксильнон группы

CjjKj.ClBrHjO - 6,56 9 ,3

Cj,,Hj,,Clj BrHjO

6,67 81,3

Редактор Т.Смирнова

Составитель Б.Горин Техред М.Моргентал

Заказ 551ТиражПодписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва. Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат Патент, г. Ужгород, ул.Гагарина. 101

1258046

10 Таблица 2

Корректор Э.Лончакова

Гидрохлориды производных 1-ал- кил(арил)-2-диметиламинометил-3-карбэто кси-5-ацетокси(окси)индола общей формулы I BgO «3 COOC2HS Sj СН2К(СНз) НС1 I. X где а) Ri-СНз, Р2-СНзСО, Рз-Н; б) Ri-СНз, R2-R3-H; B)Ri-CH3, R2-H, Ra-Br; г)Ri-CeHs. Ra-CHsCO, Rs-Br: д)Ri n-CHsCeH/i, R2-H, R3-Br; е)Ri-n-OCH3C6H4, R2-CH3CO, R3-Br; ж)Ri-n-CIC6H4, R2-CH3CO, R3-Br, обладающие противовирусной активностью. (Л с Изобретение касается новых химических соединений ряда 5-оксииндола, а именно гидрохлоридов производных 1-ал- кил(арил)-2-диметиламинометил-3-карбэто кси-5-ацетокси(окси)индола общей формулы I COoCaHs СН2М(СНз -НС где а) Ri-СНз, R2-CH3CO, R3-H: б)Ri-СНз. R2-R3-H; в)Ri-СНз. R2-H. R3-Br; г) R1-C6H5, R2-CH3CO, R3-Br: Ri-n-CH3C6H4, R2-H- R3-Br; е)Ri-n-OCH3C6H4, Ra-CHaCO, R3-Br: ж)Ri-n-CIC6H4, R2-CH3CO, R3-Br, обладающих противовирусной активностью, Целью изобретения является создание новых соединений ряда 5-оксииндола, обладающих выраженной противовирусной активностью и низкой токсичностью, П р и м е р 1. Получение гидрохлорида 1-метил-2-диметиламиноматил-3-карбоэто- кси-5-ацетоксииндола (1а), а) Получение исходного соединения - 1 метил-2-хлорметил-3-карбэтокси-5-ацет- оксииндола, К охлажденному раствору до 0-(-5)°С 17,7 г(0,06 моль) 1,2-диметил-З-карпш ю СП СХ) о сь