Способ определения концентрации акрилонитрила Советский патент 1986 года по МПК G01N21/76 C12Q1/66 

ND ч1

О О СЛ

00

11

Изобретение относится к медшц-ше, а именно к профпатологип.

Цель изобретения - повьпяение чувствительности и точности способа,

Способ осуществляют следующим образом.

Готовят раствор, содержащий препарат люциферазы (содержание люциферазы 1,55-4,5 мкг/мп) , альдегид и кислород. ,0пред ел я ем-1й ингибитор, растворенный в этаноле, вносят в реакционную смесь (конечная концентрация этанола в реакдаонной смеси 0,58-0,65%). При добавлении к этому раствору восстановленного флавинмононуклеотида СФМНН) регистрируют вспышку света и измеряют максималь гую интенсивность свечения 3„ ,

Измеряя максималы{ую интенсивность свечения D для заведомо известных концентраций определяемого вещества, строят калибровочную кривую, по оси абцисс которой откладывают концентрацию акрилонитрила, а по оси ординат .,.

Далее, измеряя 3 и сравнивая ее

с калибровочной кривой, определяют концентрацию акрилонитрила в воздухе

Пример, Для определени;я концентрадаи акрилонитрила строят калибровочную кривую. Для этого готовят, раствор, содержащий 50 мкд 0,0005%-ного мирисТинового альдегида, 20 мкл препарата люциферазы (1,4 мкг) , 5 мкл этанола и 200 мкл 0,1 М фосфатного буфера, рН 7,0,Свечение начинается при добавлении к этому раствору 500 мкл ФМНП (6 х X м.

ЗмВ реакционной смеси без вещества 100 отн.ед. Ошибка измерения ±2-3%, Растворенный в этаноле ак рилонитрил вносят в реакн онн по смес перед добавлением ФМННд, ,

При внесении в реакционную смесь 10;20;30;50;80 и 100 мг/л акрилонитрила Т) равно 84,4; 64,9; 55 ,,8; 4l,5 22,1; 13 отн.ед, соответственно. По этим данным строят калибровоч1-гую кривую. При анализе неизвестных количеств акрилонитрила вещество концентрируьэт из воздуха путем его барботирования черкез 5 мл этанола со скоростью 35 . В течение 5, 15, 45 мин, Df, при добавлении 5 ккл этих растворов акрилонитрила 66,4; 34,2; 24,7 отн,ед. При сравнении измеренных величин с капибровочной кривой

581

получают соответственно 19;60; 78 мг/л, что соответствует 17,6; 3,07, 0,74 мг/м акрилонитрила,

В табл, 1 приведены примеры peaлизации способа при разном содержании люциферазы в реакционной смеси. Из табл, 1 видно, что при уменьшении содержания люциферазы, увеличивается чувствительность способа.Однако, при уменьшении количества лю1 ;иферазы ниже 1 ,2 мкг, уменьшается точность анализа, поэтому оптимальным для способа является интервал 1,2-3,5 мкг люциферазы (1,55 4,5 мкг/мл) .

В табл,2 приведены гфимеры реализации способа при разном содержании этанола в реак1у1онной смеси. Чувствительность способа практически не изменяется при варьировании количества этанола в реакционной смеси от 4,5 до 5 мкл. Однако, при добавле1ши этанола меньше 4,5 мкл, увеличивается ошибка измерения, К тому же этанол в

количестве больше 5 мкл изменяет величину максимальной интенсивности свечения, при этом уменьшается чувствительность анализа. Поэтому оптимальными для способа являются 4,5 5 мкл этанола 0,58-0,65% .

Высокая точность определения акрилонитрила обеспечивается его растворением в этаноле,

Точность измерения в предлагаемом

способе 2-3%, а в известном способе ±26,2%, т.е. точность измерений увеличивается почти в 10 раз.

Формула изобретения

Способ определения концентрации акрилонитрила путем добавления пробы с акрилонитрилом в реакционную смесьs

5 содержащую альдегид, восстановленШ)1й ф.лавинмононуклеотид и люциферазу, с последующим измерением максимальной интенсивности свечения, величина которой обратно-пропорциональна конQ центрации акрилонитрила, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности и Totjuocти способа, содержание люциферазы составляет 1,55-4,5 мкг/мл, олреде11яемое вещество концентрируют барботированием через этанол, а в реакционную смесь дополнительно вводят в конечной концентрации 0,58-0,65%,

31270658 -4

Чувствительность и точность анатнза акрилоюттрила в зависимости от концентрации лютдиферазы, Концентршу я этанола фиксирована Таблица0,65%.

Изобретение относится к медицине, а именно к профпатологии. Цель изобретения - повышение чувствительности и точности способа за счет концентрирования акрилонитрила из воздуха путем барботирования через этаШСРСОЮЯГТДЯ 3 13 ;:jr ( kRbj;f;(«T 1ЛАЯ нол. Готовят раствор с препаратами люциферазы, альдегида, кислорода, зтанола. Добавляют к этому раствору восстановленный флавинмононуклеатид (ФМНН), регистрируют вспышку света и измеряют максимальную интенсивность свечения /3„. Определяемый ингибитор растворяют в этаноле, вносят в реакционную смесь с этанолом в конечной концентрации 0,58-0,65%, люциферазой 1,55-4,5 мкг/мп перед добавлением ФМНН вместо этанола. Измеряют н известных концентраций определяемого вещества. Строят калибровочную кривую, по оси абцисс ее откладывают § концентрацию акрилонитрила, а по оси ординат .. Измеряют OM, сравнивая ее с калибровочной кривой, определяют концентрацию акрилонитрила в воздухе. 2 табл.

Чувствительность и точность анализа акрилонитрила в зависимости от количества этанола. Концентрация люциферазы 1,8 мкг/мл..

Т -а б л и ц а 2