Способ получения производных простагландина Советский патент 1986 года по МПК C07C405/00 A61K31/5575 

см Р зобретение относится к способу получения новых производр{ых класса простациклина, именно к производным простагландина RlOOC где RJ - фармакологически приемлемый катион, обладаюпщх рядом ценных фармакологических свойств, Цель изобретения - получение новых производных класса простациклина обладающих преимуществами в фармакологическом отношении перед природными простагландинами. II р и, м е р 1 . Перемешанный раствор PGF о сложнбго метилового эфира (50 мг) в простом эфире (1 мл) обрабатывают 115,0 мг (10 мл. экв.) бикарбоната -натрия и 1 мл воды, затем по каплям в течение 2 ч вводят в вод ный раствор трехйодистого калия (0,7 молярный, 0,261 мл). После перемешив ния в течение 8 ч реакционную смесь встряхивают с простым эфиром и водным раствором тиосульфата натрия; эфирную фазу отделяют, промывают водоЙ8 сушат над сульфатом магния и упаривают с получением желтого остат ка метилового сложного эфира 5 -йод -9-деокси-6, 9 о(-эпоксипростагланди на F, . Раствор .метилового сложного эфира 5 -йод-9-деокси-6f, 9«-эпоксипростагландина F (100 мг) в метанольном метилате натрия, приготовленном из 46 мг натрия и 0,70 мл сухого метилового спирта, оставляют в атмосфе ре сухого азота на 5 ч и затем вы- , деляют из растворителя в высоком вакууме. Полученное аморфное твердое вещес во промывают в бензоле,выдерживают на воздухе 8 ч.и перемешивают с нормальным водным раствором гидроокиси натрия (0,5 мл) с получением суспензии бесцвет ных мелких кристаллов игольчатой формы Кристаллы собирают , промывают несколькими каплями нормальной водной гидроокиси натрия, сушат на воздухе с получением натриевой соли 9-деокиси-6,,9 ci -эпокси- Л5-простагландина F, « Были сопоставлены подавление 21 агрегации тромбоцитов человека, обусловленной арахидоновой кислотой, при концентрации 0,2 нг/мл этой соли и ее нестабильность в воде в кислой среде, а также другие данные с соответствующими свойствами натриевой соли (5г)-5,6-дидегидро-9-деокси-6,91А-эпоксипростагландина F . 13с ЯМР спектр с высоким разрешением раствора кристаллов в диметилсульфоксиде-ёр показал наличие ожидаемых 20 резонансньгх полос, причем эти химические полосы полностью согласуются с химической структурой, установленной для простациклина.Никаких примесей не обнаружено. И р и м е р 2, Метиловьш сложный эфир 5 -йод-9-деокси-6, 9 о(-эпоксипростагландин F (500 мг) перемешивают с метилатом натрия, полученным из 0,23 г (10 мол.экв.) натрия и 3,5 мл метилового спирта,,в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 8 ч. К желтому реакционному раствору добавляют однонормальный раствор гидроокиси натрия (2,5 мл), тем сам1з1М вызывая гидролиз, эфирной части, и спустя 2 ч в вакууме испаряют при комнатной температуре метиловый спирт. Из оставшегося водного раствора спонтанно вьщеляется масса бесцветных тонких игольчатых кристаллов требуемой соли натрия (формулы 1 : R На). Ее охлаждают, собирают, про1 штают умеренно однонормальной водной гидроокисью натрия, сушат на воздухе и хранят в пробирке, закрытой пробкой. Полученная соль (.38: мг) имеет i)f(KBr диск) 1692 см () и двадцать 13с Р зонансных полос наблюдают (при 182,7 (С-1), 158,2 (С-6), 140,0 и 134,3 (С-13), 14, 100,7 С-5, 87,5 (С-15) 80,6 и 75,5 (С-9), 11 8,0 (С-12), 49,0, 45,8, 42,4, 41,9, 37,5, 35,8 (С-18), -31,6, 29,9, 29,3, 26,7 (С-19) и 18,4 (С-20) частей на миллион из TMS в димeтшIcyльфlOкcидe-dg. Продукт натрий (52)-5,6-дидегидро-9-деокси-6,9сА -эпоксипростагландин F (синтетический натрийпростациклин) полностью подавляет агрегацию тромбоцитов, вызываемую арахидоновой кислотой (в человеческой плазме, обогащенной тромбоцитами) при 1 нг/мл, и его профиль биологической активности на аорте кролика, брюшной аорте кролика, полоске желудка крысы и толстой кишке крысы совпадает с тем, который отвечает натрийпростациклину, полученному биосинтезом. После сушки на воздухе получают соль, покрытую карбонатом натрия (примерно 3,5 вес.%) который защищает винилэфирную часть от гидролиза, катализируемого углекислым газом. ПримерЗ. В течение нескольких часов при комнатной температуре метиловый сложный эфир 5Г-йод-9-деокси-6, 9с -эпоксипростагландина F. обрабатывают 1,5-диазабицикло-5-ноне ном (ДБН). ДБН и йодистый водород удаляют адсорбцией на колонке SiO, приготовленной из суспензии SiOj в Et OAc/EtjN 50:1, и виниловый простой эфир элюируют такой же растворякицей системой. ИК спектроскопией на тонкой пленке установлено: тах 1738 () и 1696 см(). Н ЯМРв Cgflg-EtjN 19:1;4,22 триплет триплетов 12, g 6,9 и 1, G Гц (С-5 виниловый протон) и С ЯМРв Cgflg-EtjN 19:1 характерньм признаком является резонанс при 159,8 С-1, 155,8 (С-6), 137,2 и 130,6 (C-13,i4), 95,3 (С-5, 84,1 (С-15), 77,3 и 72,2 (С-9, 11) и 51,1 (метиловый сложный эфир) частей на миллион из ТМС. Метиловый сложный эфир винилового простого эфира (5Z)-5,6-дидeгидро-9-дёокси-6, 9с1-эпоксипростагландина гидролизуют водным раствором гидроокиси натрия с получением натрийпростациклина (формулы I с R-натрием) . Было установлено, что микросомы, получаемые из различных тканей млекопитающих, катализируют ферментативное превращение простагландинэндо перекисей в производное простагланди на (в дальнейшем именуемое простацик лином), которое не вызьшает сжатия аорты кролика, вызывает расслабление полосок брюшной, брыжечной и коронар ной артерий, обладает сильным протиВоагрегирукщим действием в отношении .тромбоцитов, является сильным сосудо расширяющим препаратом в отношении всех животных. Микросомы, приготовленные из кровеносных сосудов кролика или свиньи (вен и артерий) и из дна желудочкакрысы, вызьшают примерно 80-90%-ное превращение простагландинэндоперекисей. Ми {росомы, приготовленные из легочной ткани кролика и пиролисной ткани крысы, вызывают 25%-ное превращение простагландинэндоперекнсеи. в то время как микросомы, полученные из почкц, мозга, селезенки, печени, сердца, и семенных пузырьков крысы, вызывают 5%-ное превращение или даже более низкую степень превращенияпростагландинэндоперекисей. Простациклин в водной среде при комнатной температуре нестабилен, имеет период полупревращения,равный примерно lO мин.. Однако противоагрегирующая активность простациклина может сохраняться в течение нескольких дней при его. растворении в водно щелочи или сухом ацетоне и хранении раствора при -20°С. Антиагрегирующая активность простациклина в 10-40 раз выше, чем активность PGE , и в 5- 20 раз вьше, чем у PGDj, который сам по себе является сильным ингибитором агрегации тромбоцитов. Простациклин может быть получен биосинтетически инкубированием PGGj или PGHj с микросомами аорТы в под.ходящем буферном растворе, например, трис-буффере, примерно в течение 2 мин при температуре примерно 22°С. Превращение простагландинэндоперёксией составляет 85%. Экстракция простациклина достигается добавлением к инкубированной смеси холодного () сухого серного эфира. При добавлении холодного эфира ферментативная реакция прекращается и Простациклин переходит в эфирную . фазу. Последняя может быть отделена от водной фазы. Выпариванием простого эфира, осуществляемым стандартными методами, например, пробулькиванием азота через раствор, может быть получен Простациклин в виде остатка, который в дальнейшем может быть суспендирован в водном растворе для дополнительной проверки или растворен в безводном ацетоне и сохранен при -20°С для последующего использования. Микросомы аорты, применяемые в смеси, которая подвергается инкубированию, может быть экстрагированы из аорты свиньи или кролика. Аорты могут быть заморожены в жидком азоте и затем .измельчены до порошкообразного состояния. Полученный порошок суспендируют в подходящем буферном растворе и затем гомогенизируют. Гомогенат затем подвергают центрифугированию с целью выделения микросомной фракции, которую могут суспендировать в деионезированной воде и лиофилизовать. Путем регулирования агрегации тромбоцитов человеческой ( крови в агрегометре Борна (см. чертеж) . бьшо показано, что инкубированйая смесь оказывает прямое противоагрегирующее действие.

Простациклин может быть получен существенно аналогичным способом при использовании других тканей, идентичных указанным вьше. По-видимому,полу чаемый в такой инкубационной смеси Простациклин отличается от -других -. продуктов простаглаИдинэндоперекисей описанных ранее. По своему биологическому эффекту, оказываемом: на вы деленные ткани, нестабильности и по сильной противоагрегирующей активнос ти Простациклин отличается от PGE или PGFj, . Описано присутствие в гомогенатах некоторых тканей простагландин-Dj-иэомеразы. Поскольку простациклин является нестабильным соединением и обладает более сильной противоагрегирующей -активностью, чем это Соединение не может быть PGDj. Более того, простагланднн-Ва-изомераза нуждается в глютационе как в совместно действующем факторе, и инкубирование проводят в отсутстви совместно действующих факторов, PGEj PGF2o и FGDj не являются субстрата ми микросом аорты и,, следовательно, 15-кето-простагландины и другие продукты простагландинового катаболизма не могут рассматриваться как простациклин. Простациклин и его соли также ока зывают сосудорасширяющее ; действие на кровеносные сосуды и, следователь но, могут использоваться в качестве противогипертонических препаратов для млекопитающих, в том числе и человека. Тромбоциты могут быть ассимилированы сосудистым эндотелием или внедрены в эндотелиальные клетки. Биохимическое взаимодействие тромбоцитов и сосудистого эндотелия при синтезе простациклина способствует восстановлению сосудистого эндотелия, следовательно, Простациклин и его соли могут также использоваться в качестве препаратов, ускоряющих за живление ран у млекопитающих, в част ности у человека. Простациклин и его соли могут применяться всякий раз, когда необхо димо подавить агрегацию тромбоцитов, снизить адгезионный характер тромбоцитов, а также для лечения и для предотвращения .образования тромбов у млекопитающих, в том числе у людей. Например, они могут применяться при лечении и профилактике инфарктов миокарда, при лечении заболевания периферических сосудов, для лечения и профилактики послеоперационных тромбозов, для стимулирования раскрытого остояния сосудистых трансплантатов хирургии и для лечения осложнений артериосклероза и состояний, таких как атеросклероз, нарушений кровесвертьшания, вызванньк липемией, и ДРУг клинических состояний, в которых основная этиология ассоциируется с липидным разбалансом или гиперлипидемией. Эти соединения также могут применяться в качестве добавок к крови, к продуктам крови, кровезаменителям и другим жидкостям,которые используются при искусственной циркуляции вне организма и кровеснабжении изолированных частей тела, например, конечностей и органов, независимо от того, соединены ли они с донорньи организмом, отделены и хранятся, приготовлены для трансплантации или прикреплены к реципиенту. При указанных циркуляциях и кровеснабжении агрегатированные тромбоциты стремятся закупорить кровеносные сосуды и части циркуляционной аппаратуры. Такой закупорки можно избежать в присутствии простациклина. Для указанных целей Простациклин или его соли могут добавляться постепенно или однократно или несколькими отдельными порциями в циркулирующую кровь, в кровь донорного животного, в отделенную часть тела, связанную или несвязанную с реципиентом, или во все перечисленные органы при суммарной постоянной дозе 0,001-10 мг на литр циркулирукщей жидкости. Особенно целесообразно применять Простациклин в лабораторной практике на кошках, собаках, обезьянах, кроликах и крысах при отработке новьв: методов и техники трансплантации органов и конечностей. Для достижения терапевтического эффекта применяемые количества простациклина или его солей (в дальнейшем именуемых активными компонентами) меняются в зависимости от схемы лечения. Обычно для млекопитающих приемлемые дозы лежат в пределах 0,01-200 мг на 1 кг веса, желательно в пределах 0,01-10 мг/кг. Хотя активный компонент может вводиться неочищенным, желательно использовать его в виде фармацевтических составов. Предпочтение отдается неводным и негидроксильным составам, но возможно применение щелочных водных растворов. Разовая доза состава содержит от 0,5 мг до 1,5 г активного компонента. Формула изобретения Способ получения производных простагландина общей формулы I iH где Rj - фармакологически приемлемый катион. от един где Кз-С 20 где кил ;вани вых личающийся тем, что соение общей формулы II н он X - йод; У - группа OR.J , где -Сц- алкил или фармакологически приемлемый катион, подвергают дегидродегалоидированию основанием, к полученное соединение, У - группа OR , где ,,-anгидролизуют в присутствии осноя с последующим выделением целепродуктов.

Изобретение касается . гландинрв, в частности производных простациклина общей формулы I СН2 СНг Сн/ cfii бн ж-СН. ,S%$H2CH2 ™« ™ где R - фармакологически приемлемый катион, которые как обладающие антиагрегирующим действием на тромбоциты могут быть использованы в медицине. Для выявления фармакологической активности у соединений указанноСО го класса получены новые соединения I. Процесс ведут путем дегидродегалоидирования соответствующего производного 5 -йод-9-деокси-6, 9о1-эпоксипростагландина F. основанием, с последующим при необходимости гидрого лизом сложноэфирного производного в присутствии основания.Соединения I i4 обладают сильным противоагрегирукпцим действием в отношении тромбоцитов, а Oi ю также являются сосудорасширяющим веществом.