Изобретение относится к способу получения новых производных триази- на общей форьгулы
з
Р
-N-R,
т /
где R, - С,-С -алкил, незамещенный
или замещенный фенилом, независимо две или три
галоидгруппы, или любой из означает С -С4-алкил или С,-С -алкоксигруппу, и в любом случае остальное Rj -Rg-водород,
или его кислотно-аддитивных солей, обладающих антиаритмической активностью.
Цель изобретения - получение новь производных 1,2,4-триазина, обладающих иным спектром биологических свойств по сравнению с известными.
Приведенные примеры иллюстрируют получение предлагаемых соединений и их применение для лечения заболеваний сердца.
Пример 1. Получение 3)-ами но-6-(2,3-дихлорфенил)-2,3(2,j-ди- гидро-3(5)-имино-2-метил-1,2,4-триазина.
2,3-Дихлорбензойная кислота. Раствор, содержащий 37,3 г (0,1Д М) 2,3- -дихлорйодобензола в 300 мл простого эфира, осушенного натрием,добавляют по каплям к магниевой стружке в количестве 3,65 г, а также добавляют кристаллы йода при нагревании, в результате чего получают реактив Гриньяра. Полученную таким образом смесь перемешивают и нагревают при дефлегмировании в течение 2 ч, затем охлаждают, переносят по каплям в атмосфере азота и вводят в перемешанную смесь,состоящую из осушенного натрием простого эфира (250 мл), содержащую примерно 100 г твердой двуокиси углерода. Полученную таким образом смесь перемешивают в течение 2 ч, затем выдерживают 12 ч, при этом происходит нагревание этой смеси до комнатной температуры Далее полученную смесь обрабатывают льдом (примерно 150 г), а затем двухнормальным водным раствором хлористоводородной кислоты (75 мл). Полченный таким оВразом продукт экстра
Ь
гируют простым эфиром порциями при 200, 100 и 50 мл. Смешанные эфирные экстракты промывают водой два раза по 40 мл, а затем повторно экстраги0
1Г
0
25
30
руют двухнормальным водным раствором гидроокиси натрия порциями по 100, 50 и 50 мл. Полученные основные растворы объединяют, перемешивают с активированным углем (3 г) в течение 10 минJ фильтруют и охлажденный фильтрат окисляют с помощью концентрированной хлористоводородной кислоты (25мл) при 10°С. Полученный в результате твердый продукт отфильтровывают, промывают водой два раза по 20 мл.и сушат в вакууме. Выход 20,76 г (77,6% от теоретического), т.пл. 167-169 С (нескорректированная).
2,3-Дихлорбензоилхлорид. Смесь, состоящую из 39,4 г (0,2 М) 2,3-ди- хлорбензойной кислоты и 100 мл тионил- чорида кипятят с обратным холодильником в течение 2,5 ч. Полученный охлажденный раствор выпаривают в вакууме, а затем перегоняют в атмосфере азота. Выход 35,5 г (85% от теоретического), т.кип. 146-148°С при давлении, 31 мм рт.ст.
2,3-Дихлорбензоилцианид. Смесь, состоящую из 36,9 г (0,41 моль) цианида одновалентной меди, 68,5 г (0,41 моль) йодида калия и 400 мл ксилола, кипятят с обратным холодильником в атмосфере азота с использованием ловушки Дина-Старка в течение 24 ч для удаления из смеси всех следов воды. Раствор 2,3-дихлорбензоил- хлорида (35,5 г 0,17 М) в ксилоле, осушенном натрием (130 мл), добавляют по каплям к указанной смеси, состоящей из безводного цианида, одновалентной меди и ксилола. Полученную таким образом смесь перемешивают и кипятят с обратным холодильником в течение последующих 72 ч. Далее смесь охлаждают, охлажденную смесь фильтруют. Полученный твердый осадок тщательно промывают кси0 лолом (200 мл), осушенным натрием, фильтрат и раствор, полученный после промывания, объединяют и выпаривают Б вакууме с получением в результате масла. Выход 32 г (94% от теоретичес55 кого) .
3,5-Диамино-6-(2,3-дихлорфенил)- -1 , 2, 4--триазин. Раствор, содержащий 32 г (0,16 М) 2,3-дихлорбензоилциа- нида в 80 мл диметилсульфоксида, до36
40
45
1
бавляют по каплям к перемешанной суспензии бикарбоната аминогуаниди- на (81,67 г 0,6 М), которая до этого была обработана 8 н. водным раство- ром азотной кислоты (400 мл) и при примерно 25 С. Полученную таким образом смесь перемешивают в течение 3 ч, а затем выдерживают при комнатной температуре в течение 7 сут. Охлажденную смесь перемешивают и подщелачивают добавлением 0,880 н, вод- нсго аммиака (400 мл) при , а затем перемешивают в течение 30 мин при охлаждении льдом. Полученный в результате твердый продукт отделяют фильтрацией, тщательно промываю водой и сушат в вакууме. Далее твердый продукт добавляют в 10%-ный (объемных) раствор, содержащий грану лы гидроокиси калия в метаноле, в количестве 400 мл и полученный раствор кипятят с обратным холодильником в течение 1,5 ч. После охлаждения полученный раствор выпаривают в вакуу- ме, затем обрабатьшают ледяной водой (800 мл), перемешивают в течение 30 мин и фильтруют. Полученный остаток сушат, а затем перекристаллизо- вывают из изопропанола с получением в результате 3,5-диамино-(2,3-дихлор- фенил)1,2,4-триазина. Выход 6,8 г (15,6% от теоретического), т.пл.21б- 218 С.
5(3)-Амино-6-(2,3-дихлорфенил)- -2,3-(2,5)-дигидро-3-(5)-имино-2- -метнл-1,2,4-триазин.
Смесь, состоящую из 2,56 г (10 мМ) 3,5-диамино-6-(2,3-дихлорфенил)- -1,2,4-триазина и 1,6 г (11 мМ) метил иодида в 200 мл ацетона, перемепшва- ют в течение 3 сут при 21°С, а затем выпаривают в вакууме при 40°С до получения сухого продукта. Полученный остаток обрабатывают льдом (примерно 50 г), а затем 0,880 н. водным раствором аммиака (100 мл). Полученный продукт перемешивают в течение 30 мин Твердый продукт отделяют фильтра- цией, сушат в вакууме, а затем подвергают рекристаллизации из метанола с получением в результате 5(3)-амино- -6-(2,3-дихлорфенил)-2,3(2,5)-дигид- ро-3(5)-имина-2-метил-1,2,4-триази- на. Выход 1,56 г (58% от теоретического), т.пл. 228-230 с.
Данные анализа спектра ЯМР ( -dfi) 7,70 - 7,37 (ЗН, м. АгН)С 6,22
500
(ЗН, ш.с. Ш) и 3,47 (ЗН, с. NMe) ; Н, связанный С.
ЯМР ( - d), 154,2 млн д. (с.), 153,7 млн д. (кв.), масс-спектр M/Z 269 (М), 199 ( С и 9Й
Me
(
Вычислено, %: С 44,46, Н 3,36, N 25,93.
C,,H,,
Найдено, %: С 44,61, Н 3,25, N 25,63.
Пример 2. Получение 5(3)-ами но-6-(2,5-дихлорфенил)-2,3(2,5)-ди- гидро-3(5)-имино-2-метил-1,2,4-триа- зина.
Соль гидроиоднпа соединения, указанного в заголовке, получают из 3,5-диамино-6-(2,6-дихлорфенил)-1,2, -триазина в соответствии с методикой аналогичной примеру 1, а затем производят отделение основания, как указано в примере 1. Это основание превращают в соль мезилата путем обрабоки метансульфокислотой (1,2 мл) в метаноле (100 мл). Полученный в результате раствор выпаривают в вакууме до получения сухого продукта, остаток перекристаллизовывают из метанола с получением в результате соединения 5(3)-амино-6-(2,5-дихлорфенил)- -2,3(2,5)-дигидро-3(5)-имино-2-метил -1,2,4-тр азина. Выход 0,93 г (35% от теоретического), т.пл. 306-308 С.
Пример 3. Получение 5(3)-ами- но-6-(2-норм.пентилоксифенил)-2,3- -(2,5-дигидро-3(5)-имино-2-метнп- -1,2,4-триазина.
Полугидрат соли мезилата получают по примеру 1. Выход 1,76 г (46% от теоретического), т.пл. 192-195 С.
П р и м е р 4. Получ бние 5(3)-ами- но-6-(2,3-дихлорфенил)-2,3(2,5)-ди- гидро-3(5)-имино-2-изопропил-1,2,4- -триазина.
Суспензию, состоящую из 3,5-диа- мино-6-(2,3-дихлорфенил)-1,2,4-триазина (2,56 г, 10 мМ) и изопропилиоди- да (2 мл, 20 мМ) в ацетоне (200 мМ), перемешивают и кипятят с обратным холодильником в течение 7 сут. Полученную таким образом суспензию охлаждают, и образовавшийся твердый осадок отделяют фильтрацией. В результате обработки осадка 0,880 н. водным
раствором аммиака получают основание, которое превращают в моногидрат соли меэилата в соответствии с методом, описанным в примере 2. Полученный продукт перекристаллизовывают из 95%-ного этанола. Выход 500 мг (12% от теоретического), т,пл,251- 252 С.
Используя методики, аналогичные указанным в примерах 1-4, получены следующие соединения.
П р и м е р 5. 5(3-Амино-6-(2- -хлор-6-фторфенил)-2,3(2,5)-дигидро- -3-(5)-имино-2-метил-1,2,4-триазин получают в виде соли гидрохлорида (0,3 ), т.пл. 296-298°С.
П р и м е р 6. 5(3)-Амино-6-(2- -метоксифенил)-2,3(2,5)-дигидро- -3(5)-имино-2-метил-1,2,4-триазин получают в виде моногидрата соли ме- зилата, 213-216°С.
Пример. 5(3) -Амино-6-(2,3 -дихлорфенил)-2,3(2,5)-дигидро- -3(5)-имино-2-норм.пропил-1,2,А-три- аз ин получают в виде соли мезилата, т.т.пл. 265-266°С.
П р и м е р 8. 5(3)-Амино-6-(2,4- -дихлорфенил)-2,3(2,5)-дигидро-3(5)- -имино-2-метил-1,2,4-триазин получают в виде соли мезилата, т.ш . 290- 292°С.
П р и м е р 9. 5(3)-Амино-6-(2,3- -дихлорфенил)-2,3(2,5)-дигидро-3(5)- -имино-2-бензил-1,2,4-триазин получают в виде соли мезилата, т.пл.269- 271 C.
Пример 10. 5(З)-Амино-б- -(2,3,5-трихлорфенил)-2,3(2,5)-дигид ро-3(5)-имино-2-метил-1,2,4-триазин получают в виде соли мезилата, т.пл. 302-304 С.
Пример 11. 5(3)-Амино-6-(4- -норм.пентилоксифенил)2,3(2,5)-ди- гидро-3(5)-имино-2-метил-1,2,4-триазин получают в виде соли мезилата, т.пл. 195-200°С.
Пример 12. 5(3)-Амино-6-(2- -норм.пропилфенил)-2,3(2,5)-дигид- ро-3(5)-имино-2-метил-1,2,4-триазин получают в виде соли мезилата,т.пл. 238-240 С.
Пример 13. 5(3)-Амино-6-(2- -норм.пропилоксифеНИЛ)-2,3(2,5)-ди- гидро-3(5)-имино-2-метил-1,2,4-триазин получают в виде гидрохлорида, т.пл. 278-279°С.
Пример 14. 5(3)-Амино-6-(2- -норм.гептилокйифенил)-2,3(2,5)-ди715006
гидро-3(5)-имино-2-метил-1,2,4-триазин получают в виде гидрохлорида, т.т.пл. 247-249 0.
5 Пример 15. 5(3)-Амино-6-(2,3- -дихлорфенил)-2,3(2,5)-дигидро-3(5)- -имино-2-норм.пентил-1,2,4-триазин получают в виде соли мезилата (0,66 ), т.пл. 203-205 0. Поскольку ос10 нование, как бьшо установлено, -йвля- ется неустойчивым, то мезилат получают непосредственно из гидроиодида в ионообменной колонке.
Р1сследование биологической актив15 ности.
А. Подготовка анестезированной крысы.
Для проведения опытов применяли самдов крыс породы Вистар (Wistar)
20 весом 200-300 г. Анестезию крыс вызывали с помощью Галотана и воздушной смеси и поддерживали путем внутривенного ввода смеси, состоящей из хлор- азола и пентобарбитона натрия (3 мг/мл
25 пентобарбитона натрия и 9,5 мг/мл
хлоразола), после ввода каннулы в бедренную вену. Вводили трахейную кан- нулу и дыхание животного обеспечивали с помощью небольшого респираторного
30 насоса Палмера для животных
(72 хода/мин, объем подаваемого воздуха примерно 1 мл/100 г). Во время всего эксперимента поддерживали термостатически температуру 37 С. Каннулы
-jij были установлены в яремной вене для ввода аконитина и в сонной артерии для непрерывного измерения кровяного давления. Субдермальные игольчатые электроды были установлены на теле для ре40 гистрации электрокардиограммы в течение всего эксперимента.
После того, как кровяное давление животного было стабилизировано на 10-15 мин, аконитин, растворенный
45 в дистиллированной воде + НС1 и разбавленный в 5% декстрозы, вливали через яремную вену через каннулу со скоростью 1 мг/мин (0,03 мл/мин).Общая доза аконитина, необходимая для
50 того, чтобы вызвать вентрикулярную тахикардию или вентрикулярную фиб- риляцию (VT/VF) в течение хотя бы 1с, служила конечной точкой отсчета при проведении данного экст
gg перимента.
Противоаритмическую активность оценивали с помощью предварительно обработанных животных, которым случайным образом вводили либо нрепаpar, либо только носитель за 15 мин о ввода аконитина, и производили сравнение дозы аконитина, необходимой для того, чтобы вызвать вентри- кулярную аритмию у обработанной группы животных, с контрольной группой животных. Предлагаемые соединения вводили в виде мезилата или соли гидрохлорида, приготовленной непосредственно перед применением, в виде 5%-ного раствора декстрозы. Все препараты вводили через каннулу, установленную на бедренной вене, причем объем дозы составлял 0,5 мл.
Внутривенный ввод аконитина анестезированным крысам быстро вызывал вентрикулярные экстрасистолы как монофокального, так и мультифокального происхождения. Все животные умирали от быстрой вентрикулярной тахикардии или вентрикулярной фибриляции. Доза, необходимая для того, чтобы вызвать быструю вентрикулярную тахикардию Д 10 последовательных ударов) или вентрикулярную фибриляцию у контрольных животных,была равна 19,95j-0,6 () . Предварительная обработка анестезированных крыс такими препаратами, как прокаинамид, хинидин, фенитоин, пропанолол, лидо- каин или верапамил увеличивала колиество аконитина, необходимого для того, чтобы вызвать точно такую же вентрикулярную аритмию, как у контрольных животных (см.таблицу). Предварительная обработка этими стандартными антиаритмическими агентами также риводила к значительным уменьшениям в остаточном диастолическом кровяном авлении (см.таблицу).
Предварительная обработка анестези-- ованных крысе помощью любого предлааемого соединения приводила к увеличеию в зависимости от величины дозы соединения количества аконитина,необходимого для того, чтобы вызвать вентрикуярную аритмию.
В таблице показано влияние некоторых стандартных противоаритмических агентов и некоторых соединений, полученных в соответствии с изобретением, на увеличение дозы аконитина, необхоимого для того, чтобы вызвать вентрикулярную аритмию у анестезированных крыс.
Б.Подготовка правой вентрикулярной мышцы морских свинок.
5
0
5
Полоски правой вентрикулярной мыш- цЬ1, вырезанные у самцов морских свинок, подвергали стимулированию электрическим током с частотой 1 Гц с помощью биполярных электродов из серебряной проволоки, заливали модифицированным раствором Tykodes, содержащим соединения, указанные в примерах 1, 3 или 4, в количестве 0-Зх10 М. Наблюдалось влияние соединений на максимальную скорость изменения потенциала мембраны в течение фазы О активного потенциала () .
Соединения в количестве - 3x10 М вызывали связанное с количеством дозы соединения уменьшение скорости подъема фазы О потенциала работы сердца.
Ниже приведены ЕС величины (50%-ное уменьшение в V) для соединений, указанных в примерах 1, 3 и 4.
ЕС,
0
5
0
5
0
5
уо
М
-4
1,3x10 5,9x10 2,2x10
Соединение
по примеру 1 3 4
В. Токсичность.
При проведении опытов на собаках породы Гончая не было обнаружено сколько-нибудь значительной токсичности в тех случаях, когда количество препарата, превышающее 2-3 кратную эффективную дозу соединения, указанного в примере 4, вводили ежедневно в течение 14 дней. Для крыс острая летальная доза , для соединения, указанного в примере 4, составляла 8,34 нг/кг живого веса при внутривенном вводе и 25,5 мг/кг живого не- са при подкожном вводе.
Фармацевтические препараты.
Таблетка содержит, мг:
5(3) -Амино-6- (2 ,.3-дихлорфенил)-2,3(2,5)-дигидро-3(5)-амино-2-изопропил-1,2,4-триазин
Лактоза
35,0 200
Маисовый крахмал 50 Поливиннппирролидин 4 Стеарат магния3
Этот препарат подвергали смешению с лактозой и крахмалом и гранулировали с раствором поливинилпирро- лидина в воде. Полученные гранулы подвергали сушке, смешивали со сте- аратом магния и таблетировали с по91
лучением в результате таблеток, имеющих средний вес 293 мг.
2.Таблетка содержит, мг: Соединение, характеризуемое формулой 1 35,0 Лактоза 110,0 Пшеничный крахмал, подвергнутый предварительному гелеобразованию 2,5 Картофельный крахмал 12,0 Стеарат магния 0,5 Активное соединение подвергалось
тщательному размельчению, а затем тщательно перемешивалось с порошкообразными наполнителями - лактозой, пшеничным крахмалом и стеаратом магния. Из полученной смеси путем таб- летирования получали таблетки весом 160 мг каждая.
3.Инъекции содержат: Соединение, характеризуемое формулой 35,0 мг. Вода для инъекций, до требуемого количества 1,0 мл Мелкоразмельченное активное соединение подвергали растворению в воде, применяемой для инъекций. Полученный раствор фильтровали и подвергали стерилизации в автоклаве.
4.Свеча содержит: Соединение, характеризуемое формулой I 35,0 мг Масло какао2,0 г
или Wecobee -основа для необходимого количества, Wecobee - торгово название гидрогенированной карбоново кислоты жирного ряда.
Мелкодисперсное активное соединение подвергали перемешиванию с расплавленной основой для свечей (либо масло какао, либо основа для свечей Wecobee®,эта смесь разливалась по формам и подвергалась охлаждению с получением в результате требуемых суппозиториев (свечей).
5.Сироп содержит, мг на 5 мл: Соединение, характеризуемое формулой I35,0 Этанол 0,3 Сахароза2,0 Метйлпарабен 0,5 Бензоат натрия0,5 Вишневый сироп До необходимог
количества Краситель До необходимог
количества Вода в необходимом количестве До 5,0 мл
500
10
Этанол, сахароза, бензоат натрия, метилпарабен и ароматизирующее вещество (вишневый сироп) перемеимвали в 70% от общего количества необходимой воды. Краситель и активное соединение подвергали растворению в оставшейся воде, затем эти два раствора перемешивали и осветляли путем фильтрации.
6. Капсула содержит, мг: Соединение, характеризуемое формулой I 35,0 Лактоза440,0
Стеарат магния 5,0
Мелкоразмельченное активное соединение подвергали перемешиванию с порошкообразными наполнителями - лактозой, пшеничным крахмалом и стеара- том магния, полученную смесь расфасовывали по желатиновым капсулам. Формула изобретения
1. Способ получения производных триазина общей формулы
где R,
N -N-R,
г
- С,-С -алкил, незамещенный или замещенный фенилом,
R 2 - Rg- независимо две или три галоидгруппы, или любой из R,R4 означает .- -алкил или С , сигруппу, и в любом случае остальные RI-RJ-BO- дород,
или его кислотно-аддитивных солей, отличающийся тем, что соединение общей формулы
тл R
RS N-H
Д;-Ми H2N N
где R Re имеют указанные значения, подвергают взаимодействию с соединением общей формулы
1 - Q /
где R, имеет указанные значения,
О - галоид,
с последующим выделением целевого продукта в свободном состоянии или в виде кислотно-аддитивной соли.
Изобретение касается производных триазина, в частности получения соединений общей ф-лы, tR,CR,-CR,CR,-CR4 C-C N-NR7 :(-NH) , где R,-C(-С -алкил или С -С -алкил- фенил, RJ-RJ- независимо две или три галоидгруппы или R и R -алкил, С,-С -алкоксигруппа и остальные R,R5,Rfc-вoдopoд, или их кислотно-аддитивных солей, которые обладают антиаритмической активностью. Цель изобретения - создание новых веществ указанного класса с другим спектром активностей. Их синтез ведут реакцией соответствующего замещенного триазина (с R,-H) и (Q-галоид) с последующим выделением целевого продукта в свободном виде или в виде его соли. Антиаритмическая доза составляет 1-5 мг/кг, токсичность 8,34-25,5 мг/кг. 1 табл. i СО 00 ел
