ЭТИЛОВЫЙ ЭФИР ЦИС-4-N-(N', N'- ДИМЕТИЛАМИДО-N''- ЭТИЛЕНИМИДОФОСФОРИЛ)- АМИНОЦИКЛОГЕКСАНКАРБОНОВОЙ КИСЛОТЫ, ОБЛАДАЮЩИЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТЬЮ Советский патент 1994 года по МПК C07F9/22 A61K31/675 

Изобретение относится к химии фосфорорганических соединений, а именно к этиловому эфиру цис-4-N(N'N'-диметиламидо-N'-этиленимидофосфорил)-аминоциклогексанкарбоново кислоты формулы I -NHCOOC₂H₅ который обладает противоопухолевой активностью и может найти применение в экспериментальной биологии и медицине.

Соединение формулы I и его свойства в литературе не описаны.

Целью изобретения является расширение спектра действия противоопухолевых препаратов и повышение противоопухолевой активности.

Изобретение иллюстрируется следующим примером.

П р и м е р. Получение этилового эфира цис-4-N-(N''N''-диметиламидо-N''-этиленимидофосфоpил)-аминоциклогексанкарбо овойкислоты
К охлажденному до (-5) - 0^оС раствору 4,05 г (0,025 моль) дихлорангидрида N', N'-диметиламидофосфорной кислоты (полученного из хлорокиси фосфора и хлоргидрата диметиламина) в 200 мл абсолютного эфира при перемешивании медленно прикапывают раствор 8,56 г (0,05 моль) этилового эфира цис-4-аминоциклогексанкарбоновой кислоты в 100 мл абсолютного эфира. Реакционную смесь перемешивают при той же температуре 2 ч и оставляют на ночь в холодильнике. Выпавший хлоргидрат этилового эфира цис-4-аминоциклогексанкарбоновой кислоты (98% от теоретического количества) отфильтровывают и промывают 50 мл абсолютного эфира.

Полученный эфирный раствор этилового эфира цис-4-N-(хлоро-N', N'-диметиламидофосфорил)-аминоциклогексанкарбоновой кислоты охлаждают до (-5)-0^оС и к нему при перемешивании прибавляют смесь 1,08 г (0,025 моль) этиленимина и 2,53 г (0,025 г моль) триэтиламина в 100 мл абсолютного эфира. Реакционную смесь перемешивают еще 2 ч при 0^оС и оставляют в холодильнике на 35 ч. Образовавшийся хлоргидрат триэтиламина (92% от теоретического количества) отфильтровывают, фильтрат упаривают в вакууме. Получают 5,7 г (75% ) неочищенного соединения I, которое очищают посредством препаративной тонкослойной хроматографии на окиси алюминия II степени активности (раствор вещества в 5 мл хлороформа, элюент - бензол-эфир-метанол, 4: 2: 1). Собирают слой окиси алюминия в области R_f 0,7-0,9, экстрагируют 200 мл хлороформа, раствор упаривают в вакууме при температуре, не превышающей 30^оС. Получают 2,73 г (36% , считая на исходный дихлорангидрид) этилового эфира цис-4-N-(N'', N''-диметиламидо- N''-этиленимидофосфорил)-аминоциклогексанкарбоновой кислоты в виде светло-желтого, некристаллизующегося хроматографически чистого масла.

Найдено, % : С 51,24; Н 8,43; N 13,60; Р 9,56.

C₁₃H₂₆N₃O₃P.

Вычислено, % : С 51,47; Н 8,64; N 13,85; Р 10,21.

ПМР-спектр снят на приборе "Hitachi" R-22 (90 МГц, 7% -ный раствор соединения I в CDCl₃, внутренний стандарт - ГМДС, δ , м. д. ): 1,02 т. (3Н, OCH₂CH₃), 1,47 м (10Н, C₆H₁₀), 1,96 д. [4H, N(CH₂)₂] , 2,65 д. [6H, N(CH₃)₂] , 3,13 ш. с. (1Н, NH), 4,02 к. (2Н, OCH₂^-).

Продукт хорошо растворим в метаноле, этаноле, хлороформе, бензоле, частично в эфире, плохо растворим в воде.

Противоопухолевую и противолейкозную активность соединения I определяли на крысах с привитой карциносаркомой Уокера (КСУ), саркомой М-1 (SM-1), опухолью яичника (ОЯ), лимфосаркомой Плисса (LS Плисса) и на мышах линий С₅₇ ВР и DBA/2 с карциномой легких Льюиса (LL), саркомой 180 (S 180) и лимфоидной лейкемией L 1210. В опытах использованы 383 крысы и мыши. Эффективность противоопухолевого действия определяли по массе опухоли или увеличению продолжительности жизни (УПЖ) экспериментальных животных).

Результаты биологических исследований соединения I приведены в табл. 1.

Токсичность соединения I определяли по величине дозы, вызывающей 50% -ную гибель животных (крысы-самцы с массой тела 100-120 г) - ЛД₅₀, а также по изменению массы тела и селезенки. Препарат вводили суспендированным в крахмальном клейстере. Результаты испытаний приведены в табл. 1 и 2.

В табл. 2 представлены сравнительные данные противоопухолевой и противолейкозной активности соединения I и его ближайших структурных аналогов, а также известных противоопухолевых препаратов, применяемых в клинике - 6-меркаптопурина, эмбихина, тэфа, тиотэфа и гексафосфамида. Использовали различные терапевтические дозы, так как их увеличение в случае эмбихина, тэфа и тиотэфа приводит к гибели животных.

Из табл. 1 и 2 видно, что соединение I обладает сравнительно невысокой токсичностью: ЛД₅₀ равна 307 мг/кг. Оно значительно менее токсично, чем известные препараты. Оптимальные дозы препарата I незначительно изменяют массу тела животных (табл. 1). Кроме того, для предлагаемого соединения I определен индекс кумуляции, составляющий 37,5% , для тэфа он равен 58,3% , для тиотэфа -- 68,0% .

Противоопухолевая активность предлагаемого соединения проявляется в том, что в различных и невысоких дозах оно активно подавляет рост карциносаркомы Уокера (Т 93-98% ), саркомы М-1 (Т 98,3% ), увеличивает продолжительность жизни (632 и 574,5% ) крыс с внутричерепно привитой КСУ при лечении, начатом через 1 сут после прививки опухоли (извлечение 100 и 75% соответственно). При лечении, начатом через 3 сут, УПЖ составляет 433% с извлечением 44,4% .

Последние данные свидетельствуют о способности соединения I проникать через гематоэнцефалический барьер и возможности применения его для лечения опухолей головного мозга. Для тиотэфа, гексафосфамида и аналогов II, III это не отмечено.

Кроме того, соединение I умеренно тормозит рост лимфосаркомы Плисса (37,9% ), саркомы 180 (51,3% ), на 48% увеличивает УПЖ мышей с лимфоидной лейкемией L 1210.

Таким образом, соединение формулы I обладает широким спектром действия, высокой противоопухолевой активностью по отношению к различным видам опухолей при небольших терапевтических дозах, невысокой токсичностью, слабой кумуляцией, способностью проникать через гематоэнцефалический барьер. (56) Машковский М. Д. Лекарственные средства. М. : Медицина, 1985, т. 2, с. 426, 437, 444, 453.

Лаукайтис В. А. и др. Сравнительное изучение противоопухолевой эффективности N-замещенных диэтиленимидо(тио)фосфорамидов и тетраалкилдиамидо(тио)фосфорамидов ароматического и циклогексанового ряда. Сб. Метаболизм и его регуляция биологически активными веществами. Ин-т биохимии АН ЛитССР, Вильнюс, 1979, с. 5-20.

Изобретение относится к химии фосфорорганических соединений, в частности к этиловому эфиру цис-4-N- ( N', N' -диметиламидо- N'' -этиленимидофосфорил)-аминоциклогексанкарбоновой кислоты (1), обладающему противоопухолевой активностью, который может найти применение в биологии и медицине. Для выявления соединений, обеспечивающих расширение спектра действия препаратов и повышение указанной активности, получено новое 1. Синтез 1 ведут из дихлорангидрида N', N' -диметиламидофосфорной кислоты и этилового эфира цис-4-аминоциклогексанкарбоновой кислоты в среде абсолютного эфира с последующим отделением осадка и добавлением к фильтрату смеси этиленимина и триэтиламина и выдерживанием реакционной смеси при 0С 35 ч. Затем отделяют осадок и фильтрат упаривают в вакууме и 1 хроматографируют. Выход 36% . Соединение 1 обладает широким спектром действия, высокой противоопухолевой активностью по отношению к различным видам опухолей при небольших терапевтических дозах, невысокой токсичностью ( (ЛД₅₀ 307 мг/кг) ), слабой кумуляцией, способностью проникать через гематоэнцефалический барьер. 2 табл.

Этиловый эфир цис-4-N- (N', N'-диметиламидо-N'' -этиленимидофосфорил) -аминоциклогексанкарбоновой кислоты формулы
-NHCOOC₂H₅
обладающий противоопухолевой активностью.