МОНОЭФИР САХАРОЗЫ И О-ХЛОРБЕНЗОЙНОЙ КИСЛОТЫ, ОБЛАДАЮЩИЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТЬЮ Советский патент 1995 года по МПК C07H13/08 A61K31/70 

Изобретение относится к химии производных сахаров, а именно к новому моноэфиру сахарозы и о-хлорбензойной кислоты (I) формулы
обладающему противоопухолевой активностью, который может найти применение в медицине.

Известны моноэфиры сахарозы и жирных кислот рыбьего жира, которые обладают значительной противоопухолевой активностью на саркоме 37 (до 90%), карциносаркоме Уокера (85-96% ), менее активны по отношению к лимфосаркоме Плисса (62% ), но не активны в отношении карциномы Герена, саркомы 45, саркомы И-1 и лимфосаркомы Плисса, устойчивой к проспидину.

Известен также моноэфир сахарозы и коричной кислоты, который обладает противоопухолевой активностью на карциноме легких Льюиса (76-83%), саркоме 180 (64% ), лимфосаркоме Плисса (66-68%), аденокарциноме молочной железы (47-65% ), но мало активен по отношению к карциносаркоме Уокера (49%), не активен на карциноме Герена, саркоме 45, саркоме 37, саркоме М-1, а также на лимфосаркоме Плисса, устойчивой к проспидину и на саркоме 45, устойчивой к сарколизину.

По назначению из используемых в медицине веществ наиболее близким к предлагаемому является колхамин, который в условиях эксперимента в максимально переносимой дозе (2 мг/кг) слабо ингибирует рост опухолей лимфосаркомы Плисса (50,4%), карциносаркомы Уокера (30,4%), саркомы 37 (24,5%), саркомы М-11 (16-1% ), саркомы 45 (12,6%). Однако колхамин отрицательно влияет на кроветворение, токсичен, спектр его действия невелик.

Цель изобретения создание нового производного сахарозы, обладающего более широким спектром противоопухолевой активности. Поставленная цель достигается новым соединением моноэфиром сахарозы и о-хлорбензойной кислоты указанной формулы. Индивидуальность соединения подтверждается данными элементарного анализа ИК-, УФ- ПМР-спектрами, которые прилагаются. Соединение I представляет собой бесцветное кристаллическое вещество, хорошо растворимое в воде, этиловом спирте, диметилсульфоксиде (ДМСО), диметилформамиде (ДМФА), плохо растворимое в органических растворителях (хлороформе, бензоле, гексане), т.пл. 69-70^оС.

П р и м е р 1. Синтез моноэфира сахарозы и о-хлорбензойной кислоты.

102,7 г (0,3 моль) сахарозы растворяют при перемешивании в 360 мл диметилформамида (ДМФА) при 95-100^оС. Затем добавляют 17,1 г (0,1 моль) метилового эфира о-хлорбензойной кислоты и 1,38- г (0,01 моль) углекислого калия (К₂СО₃) в качестве катализатора. Реакцию проводят при 95-100^оС и остаточном давлении 130-150 мм рт.ст. в атмосфере инертного газа (азота) в течение 18 ч с отгонкой образующегося метанола. После окончания реакции диметилформамид отгоняют в вакууме, непрореагировавшую сахарозу отделяют обработкой реакционной смеси этиловым спиртом. Спирт отгоняют и продукт (44,7 г) сушат в вакуум-сушильном шкафу при 60-70^оС и остаточном давлении 10-15 мм рт.ст. Моноэфир сахарозы выделяют колоночной хроматографией на силикагеле L (0,04-0,1 мм), элюируя смесью растворителей хлороформ-метанол, взятых в соотношении 4: 1. Получают бесцветное кристаллическое вещество, выход 40% (19,2 г), т.пл. 69-70^оС.

Найдено, C 47,34; H 5,35; Cl 7,27.

C₁₉H₂₅O₁₂Cl (М 480,5).

Вычислено, C 47,50; H 5,21; Cl 7,39.

УФ-спектр (в С₂Н₅СО), λ_макс, нм: 230 (lg ε 3,80), 282 (lg ε 3,00).

ИК-спектр, γ см^-1: 1590 (С=С, аром.), 1720 (С=О), 750 (Cl) 3000-3600 (ОН).

ПМР-спектр (в C₅D₅N), σ, м.д. 3,9-5,0 (13 Н сах), 5,75 (7Н, ОН), 6,12 (1Н), 7,2-8,0 (4 Н аром.).

ТСХ: R_f 0,22 в системе хлороформ-метанол 4:1 (Silufol).

П р и м е р 2. Токсичность соединения I.

А. Острую токсичность соединения I изучают в водном растворе на интактных белых беспородных мышах (массой 20-22 г) и крысах (массой 120-140 г), обоего поля при однократном внутрибрюшинном введении, LD₅₀ для крыс составляет 620-670 мг/кг, для мышей 510-560 мг/кг.

Б. Хроническую токсичность изучают в опытах на крысах и мышах с перевиваемыми опухолями. Максимально переносимая (МПД) соединения I в водном растворе при ежедневном внутрибрюшинном введении в течение 5 дней составляет 100 мг/кг для мышей и 120 мг/кг для крыс. В этих дозах не наблюдается выраженного токсического действия вещества на животных и их гибели. Пpи вскрытии забитых в конце опыта животных видимых изменений со стороны внутренних органов не выявлено.

П р и м е р 3. Противоопухолевую активность вещества изучают на белых беспородных мышах и крысах при ежедневном внутрибрюшинном введении в водном растворе в течение 5 дней, в максимально переносимых дозах. Контрольные и опытные группы содержат по 10-12 животных. Животных начинают лечить после перевивки опухолей с момента появления измеримых опухолевых узлов. Для оценки противоопухолевой активности используют процент торможения роста опухолей, определяемый непосредственно после окончания лечения. Соединение I в максимально переносимой дозе (100%120 мг/кг) вызывает значительное торможение роста лимфосаркомы Плисса (81,0% Р < 0,001), карциномы Герена (78,1% Р < 0,05), саркомы 37 ( 71,2% Р < 0,01), саркомы 45 (68,1% Р < 0,05), карциносаркомы Уокера (66,0% Р < 0,05), саркомы М-1 (64,4% Р < 0,05). На рост слизистого рака печени (РС-1) и саркомы 180 вещество оказывает слабое росттормозящее действие (32,1-43,1%). Изучаемое вещество в МПД вызывает также выраженный противоопухолевый эффект в отношении лимфосаркомы Плисса, устойчивой к проспидину (60,5% Р < 0,01) и саркомы 45, устойчивой к сарколизину (70,4% Р < 0,01). Моноэфир сахарозы и о-хлорбензойной кислоты имеет иной и более широкий спектр противоопухолевого действия по сравнению со структурными аналогами. Заявляемое соединение, также как и структурные аналоги, относится к малотоксичным соединениям.

В настоящее время широко применимый в медицинской практике колхамин в максимально переносимой дозе (2 мг/кг) обладает слабым ингибирующим действием на штаммы лимфосаркомы Плисса (50,4%), карциномы Уокера (30,4%), саркомы 45 (12,6%) саркомы 37 (24,5%), саркомы М-1 (16,1%). В сравнении с колхамином предлагаемое вещество малотоксично: максимально переносимая доза в хронических опытах при внутрибрюшинном введении составляет 100-120 мг/кг против 2,0 мг/кг для колхамина. В отличие от колхамина к данному веществу высокочувствительны лимфосаркома Плисса, карциносаркома Уокера, саркома 45, саркома М-1, саркома 37 (66,0-81,0% торможения), а также лимфосаркома Плисса, устойчивая к проспидину (60,5% ) и саркома 45, устойчивая к сарколизину (70,4%).

Таким образом, предлагаемый моноэфир сахарозы, обладающий выраженной противоопухолевой активностью, малотоксичен, не вызывает побочного действия.

Использование: в качестве соединения, обладающего противоопухолевой активностью. Сущность изобретения: продукт 6-моноэфир сахарозы и о-хлорбензойной кислоты, БФ C₁₉H₂₅O₁₂Cl выход 40% т. пл. 69 70°С LD₅₀ для крыс 620 670 мг/кг, для мышей 510 560 мг/кг. торможения лимфосаркомы Плисса, карциносаркомы Уокера, саркомы 37 66 81% Реагент 1: сахароза. Реагент 2: метиловый эфир о-хлорбензойной кислоты. Условия реакции: в присутствии K₂CO₃ в среде диметилформамида при 95 100°С в атмосфере инертного газа с выделением хроматографией на колонке.

Моноэфир сахарозы и о-хлорбензойной кислоты формулы

обладающий противоопухолевой активностью.