Способ прогнозирования послеоперационных гнойно-воспалительных осложнений у больных туберкулезом органов дыхания Советский патент 1987 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине и может,быть использовано для прогнозирования развития гнойно-воспалительных послеоперационных осложнений у больных с хирургическими формами туберкулеза органов дыхания при отсутствии клинических предпосылок возникновения осложнений.

Целью изобретения является повышение точности и упрощение способа за счет определения до операции в крови больного уровня Т-лимфоцитов и реакции бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ) с фитогемагглютинином (ФГА). .

Способ осуптствляется следующим образом.

У больного берут из вены натощак 10-15 мл крови стерильно в пробирку с гепарином из расчета 25 ед, на мл, добавляют 10% желатина (0,1 мл на 1 МП крови), Хорошо перемешивают и помещают в термостат при 37 С (на 40 мин для оседания эритроцитов). Определение Е-РОК (Т-лимфоцитов); 1 мл гепаринизированной плазмы с лейкоцитами помеи;ают в иентрифужную пробирку, центрифугируют 10 мин при 1000 об/мин, плазму удаляют, к осадку добавляют 2 мл среды 199, взбал- тывают и вновь центрифугируют при тех же условиях. Недостаточную жидкость отсасывают. Осадок взвешивают в 1 мл среды 199, подсчитывают лейкоциты и разводят средой до кон- центрации 2-10 в 1 мл 0,2 мл лейкоцитарной взвеси, смешивают с равным объемом 0,4%-ной взвеси эритроцитов барана на среде 199. Инкубируют 5 мин при 37 С, центрифугируют 5 ми при 800-1000 об/мин и помещают на час в холодильник при 4 С,- Затем в пробирку добавляют 0,1 мл 3%-ного раствора глютарового альдегида и ос тавляют при комнатной температуре на 20 мин. Добавляют в пробирку дистиллированную воду (примерно 1/3 пробирки), взбалтывают и центрифугируют 5 мин при 1000 об/мин. Из осадка обычным путем готовят мазок, который окрашивают по Май-Грюнваль- ду. Подсчитывают под иммерсией 200 лимфоцитов, определяя процент розет кообразующих клеток (РОК). За РОК принимают лимфоцит, к поверхности которого фиксировалось не 3 эритроцитов.

Определение РБТЛ с ФГА проводят следующим образом: гепаринизирован5

5

0 0 5 0 5 0 5

ную плазму с лейкоцитами разводят средой 199 до концентрации 2-10 клеток в 1 мл и кониентрации плазмы 20%. 5 мл взвеси помещают в два граненных флакона емкостью 40 мл. В один из них добавляют ФГА (Difco) в количестве 0,05 мл (опыт). Оба флакона помещают в термостат при 37 С на 72 ч. после чего содержимое флаконов центрифугируют, готовят мазки, окравшвают их по Романовско- му-Гимза. Подсчитывают тысячу клеток и определяют процентное содержание бластов. Из числа бластов в опытной пробе вычитают число бластов в контроле .

Примеры осуществления способа.

Пример I. Больной В., 45 лет, поступил в клинику с диагнозом: конгломератная туберкулома верхней доли левого легкого в фазе уплотнения. БК-. Б период подготовки к операции проведено иммунологическое обследование: определено содержание Т-лимфоцитов, уровень РБТЛ с ФГА. У больного выявлено снижение количества Т-лимфоцитов (20%) и низкий уровень РБТЛ с ФГА (22,3%). Больному произ- ведена операция: экономная резекция 1-го и 2-го сегментов левого легкого под эндотрахеальным наркозом. После операции больному проводили лечение по принятой в клинике схеме. Несмотря на проводимую терапию, на 5 сут после операции произошло ухудшение общего состояния: появился кашель с мокротой, повьщ1ение температуры тела до 38,6 С, потливость, слабость. На обзорной рентгенограмме легких на день после операции выявлена левосторонняя послеоперационная пневмония.

Возникновению послеоперационного осложнения предшествовало снижение показателей Т-системы иммунитета, имевшее место до операции.

По сравнению с прототипом предлагаемый способ прост в выполнении, так как основан на изучении лишь двух наиболее информационных показателей - числа Т-лимфоцитов и уровня РБТЛ с ФГА, кроме того, в отличие от прототипа более точен, так как в нем предлагаются четкие границы величин показателей, использование которых позволяет с высокой степенью точности прогнозировать развитие гнойно- воспалительных послеоперационных осложнений. При показателях

312870084

Е-РОК ниже 35% и РБТЛ с ФГА ниже 40%ганов дыхания путем исследования

вероятность ВОЗНИКНОЕВНИЯ осложне-иммунитета, отличающийся

НИИ равна 75%. При более высокихтем, что, с целью повышения точноспоказателях осложнения возникают в ,ти и ускорения способа, в крови до

7,5% случаев. Точность способа-прото- 5операции определяют уровень Т-лимфотипа составляет лишь 17-30%.цитов и число лимфоцитов, вступающих в реакцию бласттрансформации

Формула изобретения фитогемаглютинином и при значеСпособ прогнозирования послеопе-нии первого показателя ниже 35% и

рационных гнойно-воспалительных ос- fOвторого менее 40% прогнозируют разложнений у больных туберкулезом ор-витие осложнений.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для прогнозирования развития гнойно-воспалительных послеоперационных осложнений у больных с хирургическими формами туберкулеза органов дыхания при отсутствии клинических предпосылок возникновения осложнений. Целью предложения является повышение точности и упрощение способа за счет определения до операции в крови больного уровня Т-лимфоцитов и реакции бласт- трансформации лимфоцитов с фитогемаг- глютинином. Определение Т-лимфоцитов: центрифугируют 1 мл гепарини- зированной плазмы с лейкоцитами, плазму удаляют, к осадку добавляют 2 мл среды 199-, вновь центрифугируют. Осадок взвепшвают в I мл среды 199, подсчитывают лейкоциты и разводят средой до концентрации 240 в 1 мл 0,2 мл лейкоцитарной взвеси, смешивают с равным объемом 0,4%-ной взвеси- эритроцитов барана на среде 199. Инкубируют при 37 С, центрифугируют и помещают в холодильник при 4°С. Затем в пробирку добавляют 0,1 мл 3%-ного раствора глютарового альдегида, добавляют дистиллированную воду, центрифугируют. Из осадка готовят мазок, окрашивают по Май- Грюнвальду. Подсчитывают 200 лимфоцитов, определяют процент розетко- образующих клеток (РОК). Определение реакции бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ) с фитогемагглютинином (ФГА): гепаринизированную плазму с лейкоцитами разводят средой 199 до концентрации 210 клеток в 1 мл, 5 мл взвеси помещают в два граненых флакона. В один из них добавляют 0,05 мл фитогемагглютинина. Термо- статируют, центрифугируют, готовят мазки, окрашивают по Романовскому- Гимза. Подсчитывают 1000 клеток и определяют процентное содержание блас- тов. При показателях Е-РОК ниже 35% и РБТЛ с ФГА ниже 40% прогнозируют развитие осложнений. (Л С tv: 00 00