Способ определения функциональной активности тимусзависимых лимфоцитов Советский патент 1987 года по МПК G01N33/48 

25

11322151

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Способ осуществляется следующим 5 образом.

Из периферической вены берут кровь в количестве 5-6 мл в пробирку с гепарином 25 ед/мл. Суспензию лимфоцитов выделяют общепринятым методом в градиенте фиколл-верографин. Для выявления Т-активных лимфоцитов к 0,2 мл взвеси лимфоцитов добавляют 0,2 мл взвеси эритроцитов барана и центрифугируют 5 мин при 1000 об/мин. Число розеткообраэующих клеток подсчитывают в нативном состоянии в камере Горяева. Затем на верхнюю часть плеча накладывают манжету сфигмомано- метра, в которой создают давление, 0 превышающее систолическое на 20- 30 мм рт.ст. Через 5 мин манжету распускают и вновь раздувают до указанных величин через 30-40 мин. Через 5 мин манжету распускают и повторно берут кровь для определения Т-активных лимфоцитов.

При этом у здоровых доноров наблюдается прирост числа Т-активных лимфоцитов не менее чем на 15%. В то же время у большинства больных (13 из 15) число Т-активных лимфоци тов после пробы снижалось и только у 2 наблюдалось повышение не более чем на 5% от исходного уровня. 35

Пример 1. Доброволец Л., 30 лет, здоровая. Исследование проводилось в условиях основного обмена. Сухой иглой пунктируют левую локтевую вену и забирают кровь в пробирку 40 с гепарином. Иглу удаляют. На верхнюю часть правого плеча накладывают манжету сфигмоманометра, в которой создают давление 140 мм рт.ст. Через 5 мин манжету распускают и вновь раз- 45 дувают через 30 мин. Через 5 мин манжету снова распускают и забирают кровь для определения Т-активных лимфоцитов до пробы 46,, после пробы 73. Величина прироста 58%.50

П р и м е р 2. Доброволец А., 35 лет. Исследование проводилось в условиях основного обмена. Локальная гипоксия создавалась двукратно в течение 6 мин с интервалом 40 мин. Ре- 55 зультат: до пробы содержание Т-активIВНИИПИ Заказ 2856/39 Тираж 776

Лых лимфоцитов 41%, по Процент прироста 50%.

П р и м е р 3. Боль ноз; рак молочной желе дии, состояние после к ного лечения. Исследов лось аналогичным способ процент Т-активных лимф пробы 78, после пробы прироста составила отри чину - 18%.

Временной интервал дания локальной гипокси оптимальным, так как з происходит статистическ снижение рО венозной к 1,68 мм рт.ст.

Предлагаемым способ нить функциональные воз фоцитов больного челов у здоровых доноров набл рост числа Т-активных л менее чем на 15% в то большинства больнык (8 тив-ных лимфоцитов посл лось.

Способ оценки функц тивности Т-активных ли ляет за короткое время используя объективньй жение pQj венозной кро функциональную недоста зависимых лимфоцитов у индивида, что невозмож при однократном исслед воляет своевременно вы ных скрытую иммунодепр осуществлять коррекцию ной недостаточности Ттета, используя соотве иммуномодуляторы. Формула изоб

Способ определения активности тимусзависи человека путем выявлен Т-активных лимфоцитов крови верхней конечнос чающийся тем, повьшения точности спо ние Т-активных лимфоци до и после остановки к разнице их содержания функциональную активно при этом остановку кро ствляют дваждь/ с помощ течение 5-6.мин с интерв

Подписное

Произв.-полигр. пр-тие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

5

0

5

0 5 0

5

Лых лимфоцитов 41%, после пробы 60%. Процент прироста 50%.

П р и м е р 3. Больная К. Диагноз; рак молочной железы III-B стадии, состояние после комбинированного лечения. Исследование проводилось аналогичным способом. Результат: процент Т-активных лимфоцитов до пробы 78, после пробы 64. Величина прироста составила отрицательную величину - 18%.

Временной интервал 5-6 мин для создания локальной гипоксии является оптимальным, так как за это время происходит статистически значимое снижение рО венозной крови на 7,9- 1,68 мм рт.ст.

Предлагаемым способом можно оценить функциональные возможности Т-лим- фоцитов больного человека, поскольку у здоровых доноров наблюдается прирост числа Т-активных лимфоцитов не менее чем на 15% в то время, как у большинства больнык (80%) число Т-ак- тив-ных лимфоцитов после пробы снижалось.

Способ оценки функциональной активности Т-активных лимфоцитов позволяет за короткое время (1,5-2,0 ч), используя объективньй критерий (снижение pQj венозной крови), определить функциональную недостаточность тимус-, зависимых лимфоцитов у отдельного индивида, что невозможно осуществить при однократном исследовании. Это позволяет своевременно выявлять у боль- ных скрытую иммунодепрессиюг быстро осуществлять коррекцию функциональной недостаточности Тсистемы иммунитета, используя соответствующие иммуномодуляторы. Формула изобретения

Способ определения функциональной активности тимусзависимых лимфоцитов человека путем выявления содержания Т-активных лимфоцитов в венозной крови верхней конечности, отличающийся тем, что, с целью повьшения точности способа, содержание Т-активных лимфоцитов выявляют до и после остановки кровотока и по разнице их содержания определяют функциональную активность лимфоцитов, при этом остановку кровот.ока осуществляют дваждь/ с помощью манжеты в течение 5-6.мин с интервалом 30-40 мин.

Подписное

Изобретение относится к иммунологии. Цель изобретения - повьпиение точности способа. К взвеси лимфоцитов добавляют эритроциты барана и центрифугируют. Подсчитывают число розетко- образующих клеток. Затем на верхнюю часть плеча накладывают манжету, в которой создают давление, превышающее систолическое на 20-30 мм рт.ст. Через 5 мин манжету распускают и вновь создают в ней давление через 30- 40 мин. После снятия манжеты повторно берут кровь для определения Т-ак- тивных лимфоцитов. У здоровых доноров отмечают после пробы прирост числа Т-активных лимфоцитов не менее чем на 15%.. . (С W