Способ оценки действия антиаритмических факторов Советский патент 1987 года по МПК A61B5/00 G09B23/28 

Изобретение относится к биологии, а именно к физиологии и элссперимен- тальной медицине, и может быть исползовано для испытания новых антиаритмических средств.

Цель изобретения - повышение специфичности способа за счет использовния селективной модели стабильной аритмии и возможности оценки антиаритмического действия нефармаколо- гических факторов.

Способ осуществляется следующим образом.

Модель аритмии воспроизводят путе создания у животных постинфарктного кардиосклероза, который через 1,5-2 мес после перевязки коронарной артерии характеризуется наличием в миокарде четко ограниченного соединительнотканного рубца и такими тра- диционными, количественно оцениваемыми нарушениями электрической стабильности сердца, как снижение в 2-3 раз электрического порога фибрилляции и появление значительной эктопической активности, т.е. выраженной экстра- систолии при торможении активности синусного узла.

Необходимость вьщерживания животных в течение 1,5-2 мес связана с тем, что в течение этого срока формируется плотный соединительнотка ный постинфарктный РУбец. При меньших сроках выдерживания рубец сформирован не в полной мере, а выдержива- ние в течение сроков, превышающих 2 мес нецелесообразно в связи с развитием у животных возрастных изменений.

Для создания экспериментального кардиосклероза .У животных (крыс- самцов линии Бистар) перевязывают нисходящую ветвь левой коронарной артерии. После этого животные находятся в клетках, в обычных услови- ях вивария. Через 1,5 мес постинфарктный кардиосклероз определяют по наличию белого рубца с очерченными краями, весом 85-90 мг, при весе левого желудочка 760-820 мг и весе крыс 350-400 г,

Дпя оценки электрической стабильности сердца у животных с постинфарктным кардиосклерозом и парил- лельно у контрольных животных проводят опыты,которые состоят в том, что под нембуталовым наркозом (50 мг/кг) вначале оценивают реакцию

сердца на раздражение периферического конца блуждающего нерва (длительность 2 мс, задержка 5 мс, частота 20 Гц) с помощью стимулятора ЭСЛ-2. После определения пороговой силы тока, составляющей 0,22- 0,28 В, последовательно с интервалом в 5 мин оценивают ответ на раздражение величиной в 2,3 и 4 порога. При этом регистрируют ЭКГ и артериальное давление в сонной артерии с помощью регистратора.

Затем определяют электрический порог фибрилляции желудочков (ПФЖХ Для этого проводят торакотомию и с помощью электростимулятора, запус-. кающегося, от зубца R ЭКГ, раздражают сердце преждевременными одиночными прямоугольными импульсами длительностью 10 мс через коаксиальный электрод, введенный интракардиально в верхушку правого желудочка. Величину ПФЖ оценивают как минимальную силу тока (мА), при- которой возникает фибрилляция. В этих экспериментах одновременно с ЭКГ и артериальным давлением регистрируют силу тока, вызывающего фибрилляцию.

На основе этого методического подхода показано, что нарушение электрической стабильности сердца, а именно снижение порога фибрилляции и экстрасистолия, которая возникает в условиях постинфарктного кардиосклероза при раздражении блуждающего нерва, могут быть устранены с помощь антиаритмического препарата лидокаин с помощью новых, ранее не .применявшихся антиаритмических средств, например, антиоксиданта ионола, и наконец с помощью немедикаментозных воздействий, таких как адаптация к периодическому действию высотной гипоксии или коротким стрессорным воздействиям.

Таким образом, предлагаемая модель реагирует на эффективные антиаритмические факторы так же, как больное сердце человека, т.е. является адекватной и, вместе с тем, в отличие от существующих моделей, пригодна для оценки прямого терапевтического действия новых медикаментозных и немедикаментозных антиаритмических факторов, применяемых Ь форме курсовых воздействий, причем эффект этих факторов заведомо не зави

сит от их антистрессорного и антиишемического действия. 1

П р .и м е р 1. В табл.1 показано влияние лидокаина и ионола на элект- рическую стабильность сердца при постинфарктном кардиосклерозе. Данны представленные в табл. 1, свидетельствуют о том, что у контрольных животных электрический ПФЖ составляет 6,4-0,2 мА, а экстрасистолия пр брадикардии, вызванной раздражением блуждающего нерва, ограничивается отдельными случайными экстрасистолами, т.е. практически отсутствует. У животных с постинфарктным кардиосклерозом (через 1,5 мес после операции) того же возраста и веса электрический ПФЖ снижен в 2-2,5 раза. Брадикардия, возникающая при раз -дражении блуждающего нерва, сопровождается вьфаженной экстрасистоли- ей. В среднем при равном времени раздражения блуждающего нерва у животных с постинфарктным кардиосклерозом возникли 62 экстрасистолы, а в контроле они отсутствовали. Введение животным одного из наиболее эффективных антиаритмических фактор.ов - .лидокаина в дозе 1 мг/кг под язык в растворе за 30 мин до опыта приводило к вьфаженному антиаритмическому эффекту, который проявлялся в том, что порог фибрилляции повысился до 4,2-0,3 мА, а количество экстрасистол уменьшилось в 2 раза. Ранее не пременявшийся в качестве антиаритмического препарата антиоксидант йо- нол (2,6-ди-трет-бутил-4-метил-фенол) , вводившийся животным peros в суточной дозе 60 мг/кг в течение 4 дн до опыта, обладал не менее выраженным антиаритминеским действием чем лидокаин, и соответственно вел к увеличению порога фибрилляции и уменьшению эктопической актив ности сердца. Таким образом, предлагаемая модель реагирует на традиционный антиаритмический препарат (лидокаин) уменьшением вероятности фибрилляции сердца и количества экстрасистол, т.е. в принципе так же, как сердце человека, страдающего аритмиями. Во-вторых, гаким же действием обладает ранее не применявшийся для подавления аритмий а.нтиоксидиант ио- НОЛ, антистрессорный и антиишемически эффект которого в данном случае не играет ро ли. .

fO

f5

20

25

. 5 - й

24640 4

Таким образом, предлагаемая модель применима для оценки дейстрнш новых фармакологических факторов, которые потенциально могут обладать антиаритмической активностью.

Пример2. В табл.2 показано влияние адаптации к гипоксии и адаптации к коротким стрессорным воздействиям на электрическую стабильность сердца при постинфарктном кардиосклерозе.

Данные представленные в табл.2 свидетельствуют о снижении электрического ПФЖ и повышении эктопической активности при постинфарктном кардиосклерозе (через 2 мес после операции) и показано, что постепенная адаптация животных к периодическому действию высотной гипоксии или повторным коротким стрессорным воздействиям устраняет эти нарушения электрической стабильности сердца.

В этих экспериментах адаптацию к коротким стрессорным воздействиям начинали через 30 дн после создания экспериментального инфаркта миокарда и проводили путем фиксации животных в положении на спине в течение 15 дн: в 1 день на 15 мин, 2 день - 30 мин, 3 день - 45 мин и остальные 12 дней- по часу. Такая адаптация повысила электрический порог фибрилляции сердца до нормального уровня 6,3- 0,5 мА и уменьшила количество экстрасистол в 2 раза.

Адаптацию к гипоксии проводили в барокамере, начиная с 15 дня после создания экспериментального инфаркта: 1-2 день на высоте 1000 м над уровнем моря в течение 2-х часов, далее каждые 2 дн высоту увеличивали на 1000 м до достижения уровня 5000 м. После этого ежедневно увеличивали время пребывания в барокамере на 1 ч и доводили его до 6 ч. Всего животные получили 45 гипоксических воздействий. Такая адаптация приводила у животных с постинфарктным кардиосклерозом к увеличению порога фибрилляции до 5,3 мА и к 4-кратному уменьшению количества экстрасистол при раздражении блуждающего нерва.

Предлагаемый способ позволяет оценить не только предупреждающее но и прямое антиарит1«1ческое действие как фармакологических препаратов, применяемых одноразово или в виде курса, так и антиаритмический эффект

30

35

40

45

50

55

дозированной адаптации организма к факторам внешней среды. Антиаритмический эффект указанных факторов реализуется на предлагаемой модели вне связи с их антистрессорным или антиишемическим действием и поддается строгой количественной оценке, т.е. является селективным.

Формула изобретения

Способ оценки действия антиаритмических- факторов путем применения этих факторов на животных с моделью аритмии и выявления восстановления ритма сердца, отличающийся тем, что, с целью повышения специфичности способа за счет использования селективной модели стабильной аритГруппаживотных

Порог фибрилляции, мА

Контроль ()

6, 45-0, 2

2,9+0,2

4,2±0,3

6,3±0,2

Достоверно по сравнению с постинфарктным кардиосклерозом. Достоверно по сравнению с контролем,

24640 6

мии и возможности оценки антиаритмического действия нефармакологических факторов, в качестве животных используют лабораторных крыс, у кото- 5 рых создают экспериментальный постинфарктный кардиосклероз путем перевязки левой коронарной артерии с последующим определением выраженности кардиосклероза по массе рубцовой О ткани через 1,5-2 мес после перевязки, у этих крыс оценивают снижение .электрического порога фибрилляции сердца и повышение его эктопической активности при раздражении блуждающего нерва, после этого применяют антиаритмический фактор и оценивают его действие по степени восстановления порога фибрилляции и эктопической активности.

15

Таблица 1

Среднее количество экстрасистол На 1 животное за 2 мин стимуляции блуждающего нерва силой тока, равной 3 порогам

32±-4

23.ir5

Группа животных

Порог фибрилляции, мА

6,4-0,2

2,9-0,2

5,4+0,5

6,3+0,5

«,

Достоверно по сравнению с постинфарктным кардиосклерозом. Достоверно по сравнению с контролем.

Редактор О.Головач

Заказ 2987/3Тираж 595Подписное

ВНГОШИ Государственного комитета СССР iпо делам изобретений и Открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород,ул. Проектная, 4

Таблица

Среднее количество экстрасистол на 1 животное за 2 мин стимуляции блуждающего нерва силой тока, равной 3 порогам

62-И2

«и

16+1

зз+з

Составитель Н.Гуляева Техред И.Попович Корректор Л. Пилипенко

Изобретение относится к биологии, точнее к физиологии и экспериментальной медицине, и предназначено для испытания новых антиаритмических средств. Цель изобретения - повышение специфичности способа. Для этого воспроизводят модель аритмии путем создания у подопытных крыс «остин- фарктного кардиосклероза. Дпя создания экспериментального кардиосклероза перевязывают нисходящую ветвь левой коронарной артерии.Через 1,5-2 мёс по наличию белого рубца с оч ерчен- ными краями (масса 85-90 мг, масса левого желудочка 760-820 мг, масса крысы 35 0-400 г) определяют постинфарктный кардиосклероз. Затем определяют электрическую стабильность сердца у животных и электрический порог фибрилляции желудочков (ПФЖ). Величину ПФЖ оценивают как минимальную силу тока в мА, при которой возникает фибрилляция. Одновременно с ЭКГ и артериальным давлением регистрируют силу тока, вызывающего фибрилляцию. Нар ушение электрической стабильности сердца - снижение ПФЖ и экстрасистолия, возникающая в условиях постинфарктного кардиосклероза при раздражении блуждающего нерва, устранимы традиционным антиаритмическим препаратом - лидокаином, а также ранее применяемыми антиаритмическими средствами, например, антиокси- дантом ионола, немедикаментозными воздействиями - адаптацией к периодическому действию высотной гипок- сии или коротким стрессорным воздей- ствиям. Предлагаемая модель является адекватной, пригодна для оценки прямого терапевтического действия новых медикаментозных и немедикаментозных антиаритмических факторов. 2 табл. i (Л со ьо 4:: 35 i(