11
Изобретение относится к исследованию и анализу материалов путем определения электрохимических параметров точнее путем измерения тока ферментных реакций при электролизе, и может быть использовано для определения этилового спирта в крови и других би- олопгческих жидкостях.
Цель изобретения - увеличение чув- ствительности и селективности определения этилового спирта.
Электрод для осуществления способа, содержащий алкогольоксидазную мембрану, изготавливают из стеклоуг- лерода, а в слой мембраны дополнительно вводят пероксидазу в количестве, в 10-50 раз превышающем количество алкогольоксидазы.
В алкогольоксидазной мембране, со- держащей пероксидазу, в присутствии ферроцианида калия протекают следзао- щие процессы:
Алкогольоксидаза „
+ Ог- -CtLCOH+Ha;
- 2 2,25 этом потенциале.
Согласно предл ределению не меща щества, как мочев кислоты, аминокис но находятся в ре ких растворах, та электрохимически
Н„0„ 4- ( 2Н Пероксидаза
(CN) HjO.
Восстановление образовавшегося феррицианида проводят при 0,0 В отн, Ag/AgCl электрода.
Увеличение селективности способа обусловлено тем, что цри использовании электрода из стеклоуглерода, содержащего в алкогольоксидазной мембране пероксидазз ; и в присутствии в буферном растворе феррицианида калия электролиз проводят при потенциале 0,0 В отн. Ag/AgCl электрода, при котором не окисляются другие коьтонен- ты биологических растворов: аскорбиновая и мочевая кислоты, аминоккспо- ты, кислород и т.д.
Пример 1. ВО,2 мл 0,1 М фосфатного буферного раствора (рН 7,2) растворяют 16 мг альбумина,10 мг пероксидазы и 0,2 мг алкогольоксидазы. Смесь-перемешивают, добавляют 2 мкл 5%-ного раствора глутарового альдегида в том же буфере и выливают на диализную мембрану с алощадью поверхности 3 см. Высушенную мембрану толщиной около 0,05 мм накладывают на стеклоуглеродньгй электрод таким образом, чтобы ферментный слой непосредственно контактировал с электродом. Далее электрод погружают в Oj,l М фосфатный буфер (рН 7,2), содержащий I мМ этилендиамин-К,Ы,Н;Н - тетрауксусной кислоты (ЭДТА), 1,5 ферроцианида калия (степень разбавления образцов - 20 раз) и добавлянзт этиловый спирт.
При потенциале 0,0 В отн. Ag/AgCl электрода определяют ток электрода.
Данные измерен1-1й првиедены в таблице.
Предел обнаружения (С„1,„ 0,95) этилового спирта равен О, 12мМ, т.е. 6 мкМ в измерительной ячейке.
Согласно предлагаемому способу определению не мещают органические вещества, как мочевая, аскорбиновая кислоты, аминокислоты, которые обычно находятся в реальных биологических растворах, так как они являются электрохимически неактивными при
0
5
0
5
0
5
Формула изобретения
1.Способ электрохимического определения этилового спирта, включающий электролиз исследуемого вещества в буферном растворе в диапазоне рН 7,0-8,0 с использованием ферментного датчика с последующим измерением тока, по которому определяют концентра- Щ1Ю этилового спирта, отличающийся тем, что, с целью увелит чения селективности определения, перед электролизом в исследуемый буферный раствор дополнительно вводят фер- рицианид калия в концентрации 1,0- 1,5 мМ и измерение катодного тока проводят при 0,0 В отн. Ag/AgCl электрода,
2.Ферментный электрод для определения этилового спирта, содержащий твердьш электрод с расположенной на нем ферментной мембраной на основе алкогольоксидазы, отличающийся тем. что, с целью повьше- ния селективности и чувствительности определения, электрод выцолнен из стеклоуглерода, а слой ферментной мембраны дополнительно содержит пероксидазу - в количестве, в 10-50 раз превьщтающем количество алкогольоксидазы.
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
Способ определения глюкозы | 1982 |
|
SU1032401A1 |
Способ определения L-аминокислот | 1986 |
|
SU1386883A1 |
Способ определения мочевой кислоты | 1984 |
|
SU1236378A1 |
Тест-полоска для определения содержания этилового спирта в крови электрохимическим способом с помощью портативной амперометрической ячейки | 2019 |
|
RU2713111C1 |
Способ иммобилизации алкогольоксидазы | 1988 |
|
SU1615179A1 |
Способ определения концентрации органических веществ | 1982 |
|
SU1045104A1 |
Способ получения ферментных электродов чувствительных к метаболитам | 1979 |
|
SU891774A1 |
Способ определения активности холестеролэстеразы | 1986 |
|
SU1395677A1 |
Способ электрохимического определения глюкозы и электрод для его осуществления | 1984 |
|
SU1180771A1 |
СПОСОБ ИММОБИЛИЗАЦИИ АЛКОГОЛЬОКСИДАЗЫ | 1991 |
|
RU2010858C1 |
Изобретение относится к области исследования и анализа материалов путем определения электрохимических параметров. Цель изобретения - повышение селективности и увеличение технических возможностей. В данном способе в алкогольоксидазную мембрану вводится пероксидаза в 10-50-кратном избытке по сравнению с алкогольоксидазой, а электролиз проводят в нейтральной либо слабощелочной среде в присутствии ферроцианида калия в концентрации 1,0-1,5 . По данному способу производится экспрессный контроль этилового спирта в крови, при этом повышается чувствительность и селективность определения. 2 с..п.ф-лы, 1 табл. с в (Л оо 1С О5 со ч СХ)
Печь-кухня, могущая работать, как самостоятельно, так и в комбинации с разного рода нагревательными приборами | 1921 |
|
SU10A1 |
, Clark L.C | |||
А, family of polarogra- phic enzyme electrodes and the measurement of alcohol | |||
- Biotechnol-T Bioeng | |||
Symp | |||
Контрольный висячий замок в разъемном футляре | 1922 |
|
SU1972A1 |
Авторы
Даты
1987-07-30—Публикация
1985-11-05—Подача