Способ определения жизнеспособности мирацидиев трематод Советский патент 1987 года по МПК A61B10/00 A01K67/00 

1

Изобретение относится к области медицинской и ветеринарной паразитологии (гельминтологии), а именно к способам определения жизнеспособности мирацидиев трематод,, патогенных для человека и хозяйственно полезных животных.

Цель изобретения - повышение точности определения жизнеспособности мирацидиев.

Пример 1, Предварительно осуществляют приготовление среды и водного.раствора бутанола.

Среду готовят из 5 ч, бутанола и 95 ч. 0,5%-ного раствора NaCl, приготовленного на дистиллированной воде. Приготавливают 1,5%-ный раствор бутанола.на дистиллированной воде. Среда и раствор могут храниться 3 сут.

Определение жизнеспособности мира цидиев.

Одну каплю взвеси яиц гельминта в воде вносят пипеткой в центрифужную пробирку. Пробирка со взвесью Должна содержать 100-500 яиц (мен-ь- шее их число может повлиять на репрезентативность результатов, а большее затрудняет подсчет), Пробирка становится в штатив на 1--2 мин для тогО), чтобы яйца опустились на дно„ Полоской фильтровальной бумаги осторожно отсасывают воду и пастеровской пипеткой в пробирку с подсушенными таким образом яйцами добавляют 0,1 мл Среды и инкубируют на водяной бане при 27 С 5 мин. Затем пробирку встряхивают и содержимое пипеткой переносят на предметное стекло и оставляют на 1,5-2 ч при комнатной температуре (18-22 с), через каждые 25-35 мин (по мере подсыхания капли) добавляя 0,05 мл 1,5%-ного раствора бутанола.

Препарат просматривают под обычным световым микроскопом при 100- 200-кратном увеличении. Перечисленны операции занимают 2-2,5 ч. .

Пример 2. Приготовление среды и раствора.

Среду готовят из 7 ч, бутанола и 93 ч. 0,1%-ного раствора NaCl, приготовленного на дистиллированной воде. Раствор готовят из 0,5 ч„ бутанола и 99,5 ч. дистиллированной воды Определение жизнеспособности мирацидиев проводит как в примере 1, но

278822

пробирку со взвесью яиц в среде инкубируют при 35 С 2 мин.

Пример 3. Приготовление среды и раствора.

Среду готовят из 6 ч. бутанола и 94 ч, 0,3%-ного раствора NaCl, приготовленного на дистиллированной воде о Раствор готовят из 1 ч, бутанола и 99 ч. дистиллированной воды. Определение жизнеспособности мирацидиев проводят как в примерах 1 и 2, но пробирку со взвесью яиц в среде ин10

кубируют при 38 С 1 мин,

Пример 4, Приготовление среды и раствора.

Среду готовят из 6 ч. бутанола и 94 ч. 054%-ного раствора КС1, приготовленного на дистиллированной воде. Раствор готовят из 0,8 ч. бутанола и 99,2 ч. дистиллированной воды. Определение жизнеспособности мираци- диев проводят как в примерах 1,2 и 3, но пробирку со взвесью яиц в среде инкубируют при 30 С 3 мин.

Испытание метода проводили на яйцах дикроцелиумов (Dfcrocoelium lanceatum), полученных из гельмин-. той % желчи спонтанно инвазирован- ных овец из очагов дикроцелиоза в Курской .области и Молдавской ССР. Полученные таким образом яйца гельминтов- различное время (от нескольких недель до 6 мес) содержались в воде при 5-10°С.

Эффективность предлагаемого способа определения жизнеспособности ми- ацидиев трематод составляет 85%,

Формула изобретения

I„ Способ определения жизнеспособ- ности мирацидиев трематод, включающий обработку яиц стимулирующим раствором с последующим микроскопировани- ем и подсчетом мирацидиев, отличающийся тем, что, с целью повьшения точности определения, после обработки яиц стимулирующим раствором проводят инкубирование яиц при 27-38 0 в течение 1-5 мин, а перед микроскопированием полученный субст- рат выдерживают при комнатной температуре на предметном стекле в течение 1,5-2 ч, при этом периодически через 25-35 мин добавляют в него 0,5-1,5%- ньш раствор бутанола в дистиллирован31327882

ной воде, при этом в качестве стимули- 2. Способ по п.1, о т л и ч а ю- рующего раствора используют смесь, щ и и с я тем, что концентрация содержащую бутанол и водный раствор водных растворов хлоридов натрия и хлоридов натрия или калия в соотно- калия составляет соответственно 0,1- шении {5-7):(93-95). 0,5% и 0,05-0,4%.

Изобретение относится к области медицинской и ветеринарной паразитологии (гельминтологии). Цель изобретения - повышение точности определения жизнеспособности мирацидиев трематод. Вначале проводят обработку яиц Dicrocoelium lanceatum стимулирующим раствором, состоящим из смеси бутанола и О,1-0,5%-ного водного раствора хлорида натрия (или 0,05- 0,4%-ного водного раствора хлорида калия) в соотношении (5-7): (93-95). После этого яйца инкубируют при 27- З8 с в течение 1-5 мин. Перед микро- скопированием полученный субстрат выдерживают 1,5-2 ч на предметном стекле, периодически добавляя в него 0,5-1,5%-ный водньш раствор бутанола. Сочетание указанных приемов приводит к открыванию крьшечки у яиц и выходу мирацидиев именно у данного вида трематод. Эффективность способа определения жизнеспособности мирацидиев трематод составляет 85%. 1 з.п. ф-лы. (Л со to vj 00