Способ получения производных метилендифосфоновой кислоты Советский патент 1987 года по МПК C07F9/38 C07F9/40 

Изобретение относится к химии фос- орорганических соединений с С-Р связью, а именно к способу получения новых производных метилендифос- фоновой кислоты общей формулы

pxORi

RlO-ll Т TORi О (, о

(1)

SR.

где R, - водород, линейный или раз- ветвленньш низший алкил ,

R - алкил, который может быть замещен гидроксильной или тиольной группой, одним или несколькими атомами галогена, алкоксикарбонильной группой или группой 2,

2

--ЫГ

где Z,

Z независимо друг от

друга водород, низший алкил, фенил, который может быть замещен одним или несколькими атомами галог ена, нит- рогруппой, низшей алкильной или низшей алкоксильной группой, трифторметилом.

-Ш

2

-СООН или - СОО - алкил группами;

- р -

и

X

ч,

где X - кислород или сера-, имеют указанные значения; 5- или 6-ти членньЕ гетеродикл, содержащий 1 или 2 гетероатома, выбранных из азота и серы-, 5-ти член- ньш гетероцикл, конденсированный с бензольным кольцом и имеющий формулу

V

RX

R, п

-кислород, группа NH или сера,

-водород или галоген;

-делое число от О до 10,

при условии, что при R -водород и

п

О, R - не является меТильной или пиридильной группами, при R, -метил или этил, п О, R является фенилом или замещенным фенилом формулы

-ОСИ

10

аупПроизводные метилендифосфоновой кислоты формулы (1) обладают противоревматической и противовоспалительной активностью и могут найти применение в медицине.

Целью изобретения является разработка способа получения новых производных мет 1лендифосфоновой кислоты, которые проявляют противоревматическую и противовоспалительную активность.

Пример 1. Тетраметил-2-бен- зоксазолилтиомехклендифосфонат, R,

«к°15 СН

ъ

п 0;

0

5

5

0

0

15°С

0

в смесь 24 г тетраметилметиленди- фосфоната и 50 мл диметилформамида добавляют в атмосфере азота и при 15°С 2,5 г гидрида натрия. Выдерживают смесь при перемешивании при в течение 1 ч, затем добавляют при 20 С 44 г 2-дибензоксазолилдисульфи- да. Продолжают перемешивание при 25 С в течение 68 ч, затем вьтаривают ди- метилформамид при 20 С под вакуумом. Остаток, растворенньй в метиленхлори- де, хроматографируют на колонке с 500 г двуокиси кремния.

Элюируя метиленхлоридом, удаляют непрореагировавшие исходные продукты, затем, элюируя смесью метиленхлорида с этанолом 96:4 (по объему), получают загрязненный целевой продукт.

Очищают путем нового хроматографи- рования на 160 г двуокиси кремния. С помощью смеси метиленхлорида и этанола 97:3 (по объему) получают продукт, который кристаллизуется при охлаждении раствора до О С, т.пл.76- 78°С.

Работая таким же образом со сложным тетраизопропиловым эфиром мети- 5 лендифосфоновой кислоты и изменяя

используемый дисульфид, получают различные сложные эфиры, представленные в табл. 1.

Условия синтеза и физические характеристики производных метиленди- фосфоновой кислоты представлены в табл. 1.

Пример 2. Тетраизопропил-4- фенилтио-1,1-бутилендифосфонат (SR55 41341),

где Q - галоген, нитро- или трифтор- метильная группа.

я, снс .

П-3-,

вакуумом. под

Получают натриевое производное тетраизопропилметилендифосфоната (34,4 г) как в примере 1, затем добавляют 28,7 г 1-бром-З-фенилтио- пропана и нагревают при 100°С в течение 1 ч.

Растворитель вьшаривают досуха под вакуумом, затем остаток растворяют в 500 мл воды и экстрагируют м тиленхлоридом. Отделяют органичес- |Кую фазу, сушат над сульфатом натрия и растворитель выпаривают под Остаток нагревают при вакуумом для удаления летучих продуктов, затем хроматогра- фируют на колонке с силикагелем, элюируя смесью хлороформа и метанола 99:1 (по объему).

Таким образом, получают масло . (23 г), которое очищают снова путем хроматографии на силикагеле с помощью той же системы растворителей. Пу тем тонкослойной хроматографии на двуокиси кремния с помощью системы растворителей бутанон-2 и воды 95:5 (по объёму), получают пятно с RJ 0,57.

Пример 3. Тетраизопропил-ноктилтиометилендифосфонат (SR-41454)

/CR.

;

СНз

О, RJ -(СН2)7-СН

Работают согласно примеру 1, используя в качестве растворителя смесь 35 образом, получают 8,5 г масла, хабезводного толуола с диметилформами- дом.

После нагревания в 16 ч при 100°С путем такой же обработки получают целевой продукт в виде масла, характеризующийся согласно тонкослойной хроматографии на двуокиси кремния в системе растворителей этил- ацетата и этанола 8:2 (по объему), R 0,65.

рактеризующегося путем тонкослойной хроматографии на.двуокиси кремния с помощью системы растворителей эти ацетата и этанола 95:5 (по объему),

40 R, равном 0,37.

Поступая таким же образом, но изменяя используемое бромсодержащее производное, получают:

тетраизопропил-7-(4-метоксифенш1

45 тио)-1,1-гептилидендифосфонат (SR

Точно так же, заменяя диоктилдисуль- фид эквивалентным количеством ди-п- ТОЛШ1ДИсульфида, получают тетраизо- пропил-п толилтиометилендйфрсфонат (SR-41455), масло, характеризующееся путем тонкослойной хроматографии на двуокиси кремния с помощью системы растворителей этилацетата и этанола 8:2 (по объему), R, равным 0,57.

Точно так же с ди(3-трифторметил- фенил)дисульфидом получают тетраизопропил (3-трифторметилфенилтио)мети- лендифосфонат, Rj 0,51, (при соот42306) , R 0,37 этштацетат:этанол 95:5, по объему);

тетраизопропил-7(4-хлорфенилтио) 1,1-гептш1Идендифосфонат (SR 41964) 50 i 0537 этилацетат:этанол, 95:5, по объему)-,

тетраизопропил-7-(3,4-дихлорфенил тио)-1,1-гептилидендифосфонат (SR 42146), R :0,37 (этилацетат:этанол 55 95:5, по объему);

тетраизопропил-7-(4-хлорфенилтио) 1,1-ундецилидендифосфонат (SR 42145) Rf-0,37 (этилацетат:этанол 95:5, по объему).

ношении этилацетата и этанола 95:5 (по объему) (SR-42248).

Наконец, используя ди(3-трифтор- метил-4-нитро-фенил)дисульфид, получают точно так же тетраизопропил (3- трифторметил-4-нитро-фенилтио)метил лендифосфонат, R 0,51, при соотношении этилацетата и этанола 95:5 (по объему), SR 42247.

Пример 4. Тетраизопропил- 7-(4-нитрофенилтио),1-гептилиденди- фосфонат (SR-42147), . CH-i

сн

3

0

5

0

п 6, Rj Н, раствору 27 г тетраизопропил- . метилендифосфоната в 200 мл толуола- порциями добавляют 3,8 г 50%-ной суспензии гидрида натрия в масле. После окончания добавления оставляют 1 ч перемешиваться, затем добавляют 27 г 1-(4-нитро-фенилтио)-6-бромгек- сана и нагревают в течение 3 ч при 80°С.

Выпаривают досуха под вакуумом и остаток растворяют в гексане. Раствор промывают два раза водой, затем сушат над сульфатом натрия. Растворитель выпаривают досуха и остаток хро- матографируют на колонке с двуокисью кремния, элюируя смесью метиленхло- рид:метанол 98:2 (по объему). Таким

рактеризующегося путем тонкослойной хроматографии на.двуокиси кремния с помощью системы растворителей этил ацетата и этанола 95:5 (по объему),

40 R, равном 0,37.

Поступая таким же образом, но изменяя используемое бромсодержащее производное, получают:

тетраизопропил-7-(4-метоксифенш145 тио)-1,1-гептилидендифосфонат (SR

42306) , R 0,37 этштацетат:этанол 95:5, по объему);

тетраизопропил-7(4-хлорфенилтио)- 1,1-гептш1Идендифосфонат (SR 41964), 50 i 0537 этилацетат:этанол, 95:5, по объему)-,

тетраизопропил-7-(3,4-дихлорфенил- тио)-1,1-гептилидендифосфонат (SR 42146), R :0,37 (этилацетат:этанол 55 95:5, по объему);

тетраизопропил-7-(4-хлорфенилтио)- 1,1-ундецилидендифосфонат (SR 42145), Rf-0,37 (этилацетат:этанол 95:5, по объему).

Пример 5. Тетраизопропил

(З-фенил-пропилтио)метилидендифосфо- нат (SR 41907).

В течение 20 вают смесь 29,2 лиденфосфоната,

ч при 25°с перемешн- г тетраизопропилмети- 80 мл толуола, 11,2 г

поташа и 23,2 г (3-фенил-пропил)дисульфид а.

Смесь промывают пять раз 50 мл воды, зате м сушат раствор над сульфатом натрия и выпаривают досуха под вакуумом.

Получают масло, хроматографируемое на колонке с 500 г двуокиси кремния. После удаления элюированньк метилен- хлоридом примесей путем злюирования смесью метиленхлорида с этанолом 95:5 (по объему) получают .целевой продукт (11,2 г), хроматографируемой на

тонком слое двуокиси кремния: R, 0,5 (этнлацетат:зтанол 95:5, по объему) . Точно таким же образом, но ис .пользуя ди(2-метокси-токсикарбонил- зтил)дисульфид, получают тетраизопро- пил (2-меток:сикарбонилзтилтио) метилен- дифосфонат (SR 42250), R 0,37 (этил- ацетат: этанол 95:5, по объему)„

Пример 6. Тетразтил(N,N-ди- этилтиoкapбaмoилтиo)-мeтилeндифocфo- нaт (SR 41905).

Работают, как в примере 3, исходя из тетраэтилметилендифосфоната и бис (диэтилтиокарбамоил)дисульфида. Точно таким же образом получают масло с R, 0,5 (этилацетат:этанол 8:2, по объему), при тонкослойной хроматографии на двуокиси кремния.

Пример 7, Тетраизопропил (перфторгексилтио)метилендифосфонат (SR 42327).

При 25 С и в атмосфере, азота перемешивают смесь 16 г тетраизопро- пилметилендифосфоната и 1,05 г гидрида натрия. Спустя 1 ч добавляют 10 мл перфто.ргексилсульфенилхлорида. Температура спонтанно повьш1ается до 80°С. Выдерживают 3 ч при этой температуре, затем смесь вьшивают.в 50 мл воды и экстрагируют эфиром. Растворитель выпаривают и остаток растворяют в 100 мп гексана Раствор промывают 5 раз 100 мл воды, затем сушат раствор и концентрируют досуха под вакуумом.

, Остаток хроматографируют на колонке с двуокисью кремния. Непрореагировавшие продукты удаляют метилен- хлоридом, затем элюируют целевой про1333240

дукт

смесью метиленхлорида с этано0

Q

лом 97:3 (по объему). Продукт получается в виде масла R. 0,60 (этил- ацетат:этанол,95:5, по объему).

Пример 8. Три(трет-бутил- амин)метилтиометилендифосфонат (SR 4103.6), R, Н, п О, R, СП.

В смесь 8,8 г тетраизопропилме- тилендифосфоната и.25 мл толуола при 0°С добавляют 0,65 г гидрида натрия, затем перемешивают в течение 1 ч при 15 С. Добавляют 25 мл диметилво°с

25

30

дисульфида, затем нагревают при 15 в течение 24 ч. Концентрируют досуха под вакуумом, затем остаток растворяют в 250 мл диизопропилового эфира. Отфильтровывают нерастворимую часть и концентрируют досуха. Хроматографируют на колонке с окисью алюминия (150 г). Элюируют сначала ди- изопропиловым эфиром для удаления примесей, затем метиленхлоридом, извлекающим целевой продукт.

Кипятят с обратным холодил.ьником в течение 5 ч 3 г вьш1еполученного сложного эфира в 12 мл водного 6 н. раствора НС1. Раствор промывают три раза 30 мл пентана, затем обесцвечивают водную фазу активным углем и концентрируют под вакуумом досуха. .

Таким образом, полученную сырую кислоту превращают в соль, добавляя к ней 2,4 г трет-бутиламина в 200, мл кипящего абсолютного этанола. После охлаждения получают тритетрабутил- аминную соль в виде бесцветного твердого вещества, т.пл. 212°С.

Точно таким же образом, изменяя используемые дисульфиды, получают кислоты (1), представленные в табл.2.

Условия синтеза и физические характеристики производных метиленди- фосфоновой кислоты представлены в табл. 2.

Пример 9. Ди-(трет-бутил- амин)-(4-хлорфенил)тиометилендифос- фонат (SR.41319), R, Н; п 0;

35

40

50

:i

Работают как описано в примере 4, заменяя в качестве растворителя толуол диметилформамидом.

Для осуществления замещения эфир ix,, метилендифосфоновой кислоты нагревают с дисульфидом при 25 С в течение 6 ч. Выделяют сложньй эфир как : указано в примере 4, затем превраща- ют в соль с 12 Н.НС1 в течение 18 ч.

Таким же образом получают кислоту, которую превращают в ди-трет-бу- тиламинную соль, как указано в примере 4, т.пл. 253 С (разложение).

Условия синтеза и физические ха- ;рактеристики производных метиленди- фосфоновой кислоты представлены в табл. 3.

Пример 10. Трет-бутиламин- ,3-метилтио-1,1-пропилидендифосфонат (SR 4127.3),, R, Н, п 2, R, СН,

Работают как в примере 4, заменяя дисульфид 1-бром-2-метилтиоэтаном. После нагревания в течение 20 ч при 30 С, выделяют сложный эфир, затем его гидролизуют как указано в примере 4 с помощью 8 н,НС1 при кипячении с обратным холодильником.

цилтиометилендифосфоновую- кислоту, вьщеляемую в виде ди-трет-бутиламин- ной соли (SR 41457), т.пл. 170-175 с. Приме-р 13с Ди(трет-бутил- амин)-(2-окси-этилтио)-метилендифос- фонат (SR 41318), R, Н, п О, R HO-CHj-CH -.

При 70°С в течение 1 мин нагревают смесь 35 г ди-(2-оксизтил)дисульфида, 80 МП 3,4-дигидро-2Н-пирана и . 0,1 г п-толуолсульфркислоты.

Охлаждают до 40 С, и в течение 1-0 мин перемешивают. Выливают в

200 МП воды и экстрагируют эфиром. ЭфирМый раствор высущивают и выпаривают растворитель досуха с получением 71 г дисульфида, содержащего две спиртовые функции, блокированные в

Наконец,, кислоту превращают в соль JQ Ф.орме простого 3,4-дигидро-2н-пиравоздействием на нее трет-бутиламина, т.пл. 212-214 с.

П р и. м е р 11. Ди-(трет-бутил- амин)-4-фенилтиобутилидендифосфонат

(SR 41342), R Н; п .,

Кипятят с обратным холодильник ом в течение 7 ч раствор 5 г сложного эфира SR 41341 (пример 1) в 18 мл 6 н, НС1. Вьшаривают досуха и остаток растворяют в 25 мл воды. Отсасывают и осадок высушивают и перекристал- ; лизуют из ацетонитрила, затем пре- - вращают в соль с трет-бутиламином, т.пл. 223°С.

Точно таким же образом, изменяя исходный сложный эфир, получают продукты, представленные в табл. 4.

|ч -

Условия синтеза и физические характеристики производных метиленди- фосфоновой кислоты представлены в табл. 4.

Пример 12. Моноаммониевая соль гексадецилтиометилендифосфоно- вой кислоты (SR 41453), R. Н, п

3Q

нилового эфира.

Осуществляют конденсацию вьшеука- занного дисульфида с тетраизо пропил- метилендифосфонатом, согласно при- 25 меру 5, поддерживая температуру в течение 3-х ч.

Полученньш продукт (18 г) растворяют в 150 мл метанола и добавляют 2 мл концентрированной соляной кисло ты. Кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч, затем концентрируют метанол и выпивают в 200 мл воды. Экстрагируют 2 раза метиленхлГоридрм, раствор высушивают и концентрируют досуха. Таким образом, получают 13 г сложного эфира, защитные группы которого удалены.

Сложный эфир превращают в соль как описано в примере 4 путем кипячения с обратным холодильником с 6 н, НС1 в течение 16 ч.

Таким образом, полученная кислота обработанная т рет-бутиламином в эта- ноле, дает дисоль (SR 41318), т.пл. ,168°С.

5 Пример 14. Три-(трет-бутиламин)-2-бензотиазолилтиометиленДи- фосфонат (SR 41481) , R Н, п О,

35

40

.0, R,

- - (.СН),. -CHj,

Работают согласно способу примера 4, но в качестве растворителя используют смесь толуола с диметилформами- дом 40:2 (по объему).

После нагревания при 100°С в течение 20 ч получают соответствующий сложньй эфир, который гидролизуют кипячением с обратным холодильником, в течение 15 ч с 12 н. НС1. Сырая кислота, растворенная в аммиаке, моноаммониевую соль, т.пл.

Точно таким же образом, изменяя используемый дисульфид, получают дедает103-110 С.

Q

нилового эфира.

Осуществляют конденсацию вьшеука- занного дисульфида с тетраизо пропил- метилендифосфонатом, согласно при- 5 меру 5, поддерживая температуру в течение 3-х ч.

Полученньш продукт (18 г) растворяют в 150 мл метанола и добавляют 2 мл концентрированной соляной кислоты. Кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч, затем концентрируют метанол и выпивают в 200 мл воды. Экстрагируют 2 раза метиленхлГоридрм, раствор высушивают и концентрируют досуха. Таким образом, получают 13 г сложного эфира, защитные группы которого удалены.

Сложный эфир превращают в соль как описано в примере 4 путем кипячения с обратным холодильником с 6 н, НС1 в течение 16 ч.

Таким образом, полученная кислота обработанная т рет-бутиламином в эта- .- ноле, дает дисоль (SR 41318), т.пл. ,168°С.

5 Пример 14. Три-(трет-бутил амин)-2-бензотиазолилтиометиленДи- фосфонат (SR 41481) , R Н, п О,

.:NV

5

0

50

Ди(2-бензотиазолил)дисульфид.

К раствору 30 г 2-меркаптобензо- тиазола и 1,6 т гидроксида натрия в 800 МП абсолютного этанола прикапывают раствор 20 г иода и 115 г иоди- да калия в 400 мп воды. По окончании добавления перемешивают 30 мин при комнатной температуре, затем отсасывают осадок, который промывают этанолом, затем сложным эфиром. После высушивания получают 28 г дисульфида, т.пл. 174°С.

Конденсируют вышеполученйьш дисульфид с тетраметилметилендифосфо- натом согласно примеру 5 (нагревание 2 ч при 20°С).

К раствору 6,5 г вышеполученного, тетраметилового эфира в 80 мл четы- реххлористого углерода добавляют в атмосфере азота при температуре 7 мл триметилсилилбромида и перемешивают 30 мин при этой температуре,

Добавляют 10 мл воды, отделяют водную фазу и промывают ее эфиром. После выпаривания водной фазы получают А г целевой кислоты, ее превращают в трисоль путем воздействия

10

15

и их фармакологические свойства подчеркиваются следующим образом.

Изучение in vitro.

Изучение in vitro основано на том факте, что культивированные хондроци- ты вьщеляют нейтральные протеиназы после стимуляции фактором, синтезированным перитонеальными макрофагами и мононуклеарными клетками крови.

Привлечение этого типа стимуляции в ревматические заболевания широко известно.

.Принцип теста заключается в изучении секреции нейтральных протеиназ стимулированными хондроцитами, об20

работанными продуктами, по сравнению с секрецией необработанных стимулированных хондроцитов.

Используют следующий ход теста.

Приготовление хондроцитов.

Хондроциты вьщеляют из хряща носовой перегородки теленка или межсуставного хряща кролика путем ферментативного переваривания и культивируют в питательной среде ДНЕМ с 10% телячьей сыворотки, при плотности клеток 5x10 на чашку Петри, размером 10 см. Среда для культивирова- Пример 15. ДиСтрет-бутиламин)- ния обновляется все 48 ч.

трет-бутиламина в этаноле, т.пл. 202- 204°С.

Точно таким же образом, используя ди(2-тиенил)дисульфид, получают 2- тиенилтиометилендифосфоновую кислоту, 25 выделяемую в виде три-трет-бутиламин- ной соли, крист-аплизующейся с двумя молекулами воды (SR 41549), т.пл. .

40

7-(1-метил-2-имидазолилтио)-1,1-геп- тилидендифосфонат (SR 42132).

Тетраизопропил-7-бром-1 , 1-гепти- лидендифосфонат получают, используя 1,6-дибромгексан.

Нагревают при 80°С в течение 2ч раствор 10 г предьщущего бронированного производного, 2 г 2-меркапто-1- метилимидазола и 0,8 г гидроксида натрия в 50 мл этанола.

Выпаривают досуха, остаток растворяют в воде и экстрагируют эфиром. Промывают раствор Зн.раствором гидроксида натрия, затем водой. Раствор высушивают над сульфатом натрия и выпаривают досуха.

- Хроматографируют на колонке с двуокисью кремния, элюируя смесью метиленхлорида с метанолом, 98-2, по объему. Таким образом получают 4 г целевого сложного эфира. 50

Гидролизуют с помощью 12 н,НС1 путем кипячения с обратньм холодильником в течение 16 ч. Целевое соединение вьщеляют в виде ди-трет-бутиламинной соли, т.пл. 158-162 С. 55 I

Соединения предпочтительно используются в качестве противовоспалительных и противоревматических лекарств

45

Спустя неделю после культивирова-, ния клетки субкультивируют обработкой трипсином ЕДТА. Клетки снова помещают для культ ивирования в среду ДМЕМ с 10% сыворотки зародьшевого .теленка, при плотности клеток 2x10 точками размером 16 мм. Слив реализу- ют спустя 3 дня культивирования.

Перитонеальные макрофаги кролика получают согласно известному методу. Мононуклеарпые клетки человеческой крови готовят и культивируют согласно способу ДАУЕР.

После культивирования содержащую .хондроцит стимулирующий фактор среду рекуперируют, фильтруют на фильтре с размером пор 0,22 мк и замораживают при -20 С.

Стимулирование хондроцитов. При слиянии культуральная среда хондроцитов нагружается средой ДМЕМ с 1% сыворотки зародышевого теленка, содержащей.20% среды, содержащей фактор активации хондроцитов.

Испытуемые продукты вводятся в культуральную среду в то же самое время, что и среда активации, при концентрации, при которой избегают цитотоксичности продукта или его не

и их фармакологические свойства подчеркиваются следующим образом.

Изучение in vitro.

Изучение in vitro основано на том факте, что культивированные хондроци- ты вьщеляют нейтральные протеиназы после стимуляции фактором, синтезированным перитонеальными макрофагами и мононуклеарными клетками крови.

Привлечение этого типа стимуляции в ревматические заболевания широко известно.

.Принцип теста заключается в изучении секреции нейтральных протеиназ стимулированными хондроцитами, об0

0

5

5

Спустя неделю после культивирова-,. ния клетки субкультивируют обработкой трипсином ЕДТА. Клетки снова помещают для культ ивирования в среду ДМЕМ с 10% сыворотки зародьшевого .теленка, при плотности клеток 2x10 точками размером 16 мм. Слив реализу- ют спустя 3 дня культивирования.

Перитонеальные макрофаги кролика получают согласно известному методу. Мононуклеарпые клетки человеческой крови готовят и культивируют согласно способу ДАУЕР.

После культивирования содержащую .хондроцит стимулирующий фактор среду рекуперируют, фильтруют на фильтре с размером пор 0,22 мк и замораживают при -20 С.

Стимулирование хондроцитов. При слиянии культуральная среда хондроцитов нагружается средой ДМЕМ с 1% сыворотки зародышевого теленка, содержащей.20% среды, содержащей фактор активации хондроцитов.

Испытуемые продукты вводятся в культуральную среду в то же самое время, что и среда активации, при концентрации, при которой избегают цитотоксичности продукта или его не

растворимости. Спустя 3 дня культивирования, среду рекуперируют с целью определения в ней содержания нейтралных прбтеиназ..

Полученные с различными продукта- .ми результаты представлены в табл.5 (выражены в % ингибирования секреции нейтральных протеиназ стимулированны ми хондроцитами, обработанными иссле дуемыми продуктами, по сравнению с таковой стимулированных хондроци- тов, не обработанных продуктами).

Изучение in vivo; Артрит при вспомогательном средстве,.

Инъекция Mycobacterium крысе вызывает полиартрит, напоминающий человеческий ревматоидный артрит.

Суспензию Mycobacterium tuberculoses (0,4 ,мг на 0,05 мл парафинового масла) инъекцируют внутрикожно 3 хвост самцов крыс Sprague Dawley со средним весом 150 г.

Спустя 15 дней отбирают животных,

30

35

чение 6 дней в неделю (подкожно). Одна из групп получает только растворитель и служит контролем.

Спустя 3 недели обработки, живот- ных убивают и отрезают правую заднюю лапу на уровне берцово-предплюсневого, сустава, затем взвешивают.

Для каждой группы определяют среднее и стандартную погрешность этих весов.. .

Активность каждого продукта вы- 40 ажается изменением в процентах среднего веса лап артритных, обработанных крыс, по сравнению с таковыми артритных лап контрольных крыс.

Ингибирование артрита новыми соеди- 45 нениями представлено в табл. 6.

Кроме того, предлагаемые продукты мало токсичны. Они могут быть использованы в терапии человека для лечения заболеваний, обязанных воспали- 50 тел ьнь1м явлениям, и в особенности ля лечения артритных состояний. Особенно соединения могут быть использованы при лечении ревматоидного поиартрита. 55

Соединения могут быть в формах, оответствующих для введения перо- рально, парентерально и эндоректальНО.

обладающих наиболее заметными симпто-25 мамн артрита. Этих крыс разбивают йа партии по 5 животных, затем каждую группу обрабатывают исследуемым про- дуктом в дозе 10 мг/кг в день, в те

240

12

Желатинозные капсулы или таблетки содержат количество действующего на- чвла 10-500 мг/единица.

Ежедневная доза этих продуктов взрослому может быть порядка 100 мг - 5 г в день, разделенная на несколько порций.

Цифровые результаты, приведенные в табл. 5 и 6, указывают на более высокую эффективность новых соединений, чем этидронат натрия.

Токсичность соединения SR 41319 (пример 9) : ЛД 50 для мьппей - 1414 мг/2г при оральном введении и 197 мг/кг при внутривенном введении ЛД 50 для крыс - 700 мг/кг при оральном введении и 197 мг/кг привнутривенном введении.

Соединения SR 41960, SR 41036, SR 41421, введенные мьшам в дозе 300 мг/кг оральным путем ни в одном случае не приводят к летальному ис0

5

0

5

5

ходу.

Формула изобретения

Спо.соб получения производных ме- тилендифосфоновой кислоты общей фор RlO 0

RlO-- О (СНг}п О

SR

где R - водород, линейный или раз- ветвленный низший кил

R - .алкил, KOTopbD i может быть замещен гидроксильной или тиольной группой, одним или несколькими атомами галогена, алкоксикарбонильной груп-

Z,

пой или группой -N

/

де Z ,, и

Z - независимо друг от друга водород, низший алкил, фенил, который может быть замещен одним или несколькими атомами галогена, нитрогруп- пой, низшей алкильной или низшей алкоксильной группой, трифтормети- .лом, - NH , -СООН или -СОО - алкил группами,- .

группа

-r-M

9 Z X i

где X - кислород или сера, Z,H Zj имеют указанные значения, 5- или 6-ти членный гетероцикл, содержащий 1 или 2 гетероатома, выбранных из азота и серы, 5-ти членный гетероцикл, конденсированньй с бензольным -кольцом и имеющий формулу

X

Из Л. Я

где X - кислород, группа NH или сера 15

- - водород или галоген, п г целое число от О до

г целое число от и до 10, при условии,что при R, - водо и п ,0, R,j не является ме- тильной или пири,цильной группами, при R, - метил или этил, п о, R не является фенилом или замещенным фенилом формулы .ОСИ

Q

где. Q - галоген,. нитро- или трифторметильная группа,

заключающийся в том, что тетраалкило- вый эфир метилендифосфоновой кислоты подвергают взаимодействию с гидридом натрия в среде толуола и/или диметил- формамида при IS-ZS C с последующей обработкой образующегося натрийсодержа- щёго дифосфоната сульфидом общей фор- .мулы

R,S-(GH)-Y

или дисульфидом общей формулы R 2, ,

где

R и п

- имеют указанные значения,

Y - галоген,

при температуре от 20°С до температуры кипения реакционной смеси и выде- лением целевого продукта в виде эфира или переводом его в кислоту путем омыления,

Таблица 1

Изобретение касается фосфорорга- нической химии, в частности получения производных метилендифосфоновой кислоты (МФК) общей формулы И (R,0)2.R(0)-CHK-R(0) (OR,).,гдeK ( R, Н, прямой или разветвленный С,-С4-алкил; R,j -алкил, не- или - замещенный: а) ОН, SH, одним или несколькими галогенами, алкоксикарбони- лом-, б) NZjZ; ; Z, и г -независимы и представляют Н, низший алкил, фенил, не- или замещенньй одним или несколькими атомами галогена, N02, низшим алкилом, низшим алкоксилом, CFg NHz, , С(0)ОН, С(0)0 - алкил; в) C(X)NZ4Z2; : X О или S, или вместе с азотом - 5-. или 6-ти членный гетероцикл, содержащий один или два гетероатома - азота и/или серы, гетероцикл: где X O-i, NN, R Н или галоген, п - целое число « 0-10, при условии, чт при R Н и п О R не может быть метилом или пиридидом или при R СН или п О и R не может быть фенилом или замещенным фенилом: ОСИ где Q - галоген, W, CF,, которые обладают противоревматической и противовоспалительной активностью и могут быть использованы в медицине. Цель - разработка способа получения новых активных веществ указанного класса. Синтез МФК ведут из тетраал- килового эфира метилендифосфоновой кислоты и гидрида натрия в среде толуола и/или диметилформамида при 15- 25 С с последующей обработкой П(5лу- ченного продукта сульфидом (СНр. -У, или дисульфидом -R -S-S-Ri, где Кип - -указаны вьше; Y - галоген,, при температуре от 20°С до точки ки- пеяия реакционной смеси. Вьщеление делевого продукта ведут в виде эфира, который при необходимости может быть переведен омылением в кислоту. Новые МФК оказывают ингибирующее действие на секреции нейтральных протеи- наз стимулированными хондр оцитами до 99%, а также на артриты и ревматоидные полиартриты до 55%. 6 табл. СО со САЭ СО to О4

SR 41265

о f Y™° , 5 ,

SR 41452

140 С (ацетонитрил)

6 ч

Желтое масло, тонкослойная хроматография на двуокиси кремния этилацетат- ,.ОН 8:2 (по объему), R 0,7

-сн-PC

41100

CH 0 -СНС , 24 ч

ca

3

SR 41690

0 //

С1,5 ч ди-трет-бутил- аминная соль, т.пл. 252°С

НС1,24 ч хлоргидрат,

т.пл. 280 с

- fНС1,8 ч хлоргвдрат,

т.пл. 300°С

НС1,18 ч хлоргидрат, , т.пл.285-290°С

НС1,18 ч хлоргидрат, т.пл.

НС1,6 ч три-трет-бутил- аминная соль, т.пл. 24 С (с 1/2H.JO)

НС1,16 ч свободная кислота, т.пл. : 2бо с

НС1 16 ч с.вободная кислота, т. пл. . 226°С

НС1 ди-трет-бутил-- аминная соль, т.пл.

17

SR 41388

NHr

20°с, 4 ч

SR 41480

о Cl-MvN Н

, 16 ч

SR 41552

О CHUCH,), 20°С, 18 ч

НО. П11 ОН

Р -СН-РХ

™ йл °«

SR 41421

О-(СН2)7СН;

SR 41456

-СИ:

1333240

18

Таблица 3

Выделенный про- цукт

та, т.пл. 300 С

свободная .кислота, т.пл.272 с (кристаллизуется, с 1 молекулой воды)

свободная кислота, т.пл. 260°С

12н.НС1,20 ч. трат.-бутиламинная соль, т.пл. 218°С

Таблица 4

12н. НС1, 16 ч

свободная кислота, т.пл. 155-160°С

12н.НС1, 16 ч ди-трет-бутиламинная соль, т.пл. 255-260°С (разло- ожение)

.

3-O

C1, 16 ч HCl, 16 ч

HCl, 10 ч Cl, 12 ч

HCl, 12 ч

свободная кислота, т.пл. Пб-ПВ С

ди-трет-бутиламин- ная соль, т.пл. 235 С (разложение)

свободная кислота, т.пл. -202-204 с

ди-трет-бутнламин- ная соль, т.пл. 220-224°С

ди-трет-бутиламин- ная соль, т.пл. 224-22б с

Таблица 5