Способ получения убихинона Q 9 Советский патент 1987 года по МПК C12P7/66 C12P7/66 C12R1/01 

иый эфир (т.кип, 40-70° с) - зслоро- форм - диэтиловьй эфир (85;10j5), объем 100 мл, Францию в виде ярко- оранжевой полосы с R 0,55, содержа 13538082

Изобретение относится к микробио- хинона проводят на окиси алюминия логии и может быть использовано в ме- для тонкослойной хроматографии или дицине при терапии сердечно-сосудис- окиси алюминия II степени по Брокма- тых заболеваний, заболеваний, связан- ну. Элюцию проводят смесью петролей- ных с энергетикой клетки, и в научных исследованиях при изучении процессов дыхания и фотосинтеза, фотохимических реакций при фотосинтезе.

Целью изобретения является повы- ю 1чую убихинон Q , отделяют и упари- шение выхода целевого продукта. вают.

Пример 1, Убихинон Q полу- Рехроматографию проводят либо на чают из клеток бактерий Rhodopseudo-- пластинах силуфол, либо с помощью топаз viridis ВЫ, Культуру выращива- второй колонки с окисью алюминия в ют на среде Пфеннига следующего сое- 15 системе петролейньй эфир - диэти- тава, г/л: NH4C1 0, КЫ,,Р04 ловьй эфир - ледяная уксусная кисло- MgCl 0,33; КС1 0,33; NaHCOj 1,50, та (90:30:1), Элюат упаривают и оп- CaCljOj,33, Na-яблочнокислый 2,0; ределяют количество убихинона весо- дрожжевой экстракт 0,01; микроэлемен- вым методом или спектрофотометричес- ты 1 мЛо,20 ки по поглощению спиртового раствора

Состав микроэлементов, г/л: ЭДТА при 275 им, используя молярный коэф- 5,0j FeS04-7HzO 2,0; 0,03;- фициент экстинкции Е 14,600 для

рсюветы с длиной оптического пути 1 см.

Выход убихинона Q 2,6 мг/1 г 25 сухих клеток,

П р и м е р 2, Убихинон Q получают при выращивании пурпурной бактерии Rhodopseudomonas sulfoviridis PI на среде Орйерода с добавлением

CaCl, 2HiO 0,2; NiCl. 0,02; ЕпЗО УНгО 0,1; , 0,3; CuCl ,,0 0,01; Na2Mo04 2H20 0,03, рН среды 6,0, Выращивание проводят на свету (20x10 эрг/см с) при 30 С. Полученную биомассу отделяют от культуральной жидкости с помощью сепаратора и лиофильно высушивают. За- ЗО 0,01% дрожжевого экстракта, 0,05% тем проводят омыление - 1 г сухих тиосульфата и 0,2% лактата натрия, клеток помещают в колбу с мешалкой, приливают 10 мл воды, 0,5 г пирогаллола в 15 мл этанола и 5 мл 25%-ного раствора КОН (при использовании сырых ng клеток берут навеску 5 г и добавляют 5 мл воды), Смесь кипятят с обратным , шариковым холодильником в течение 25 мин при перемешивании в токе аргона, затем охлаждают на бане со льдом, до 0 раз (0,1о-0,2 мг/г сухих клеток), Добавляют 15 мл воды и экстрагируют а по сравнению с другими известными петролейным эфиром, гептаном или гек- саном три раза по 50 мл. Водную фазу отделяют с помощью делительной воронки. Объединенный; экстракт желтого цвета промывают два раза водой до нейтральной реакции и высушивают над сульфатом аммония.

Далее экстракт отфильтровывают, количественно переносят в колбу для

Убихинон вьщеляют из полученных клеток Rh. sulfoviridis PI аналогично примеру 1,

Выход П 1,8 мг/1 г сухих микробных клеток.

Использование предлагаемого способа выделения убихинона обеспечивает по сравнению с известным в 10в 100 раз увеличение выхода убихинона 0.

45

50

Формула изобретения

Способ получения убихинона Qy, включающий культивирование штамма- продуцента, отделение биомассы, ее омыление с. последующим выделением . убихинона из неомъшенной фракции, отличающийся тем,что, с целью повышения выхода целевого продукта, в качестве продуцента используют штамм Rhodopseudomonas viridis ВЫ или штамм Rhodopseudomonas sulfoviridis PI,

вьшаривания и упаривают под вакуумом при 45°С,, „

Сухой красно-оранжевый осадок растворяют в 2 мл смеси для элюции и наносят на колонку (1,6x15, см) с водяной рубашкой. Хроматографию убиВНИШШ Заказ 5670/24

ПронзБо-полигр, пр-тие, г, Ужгород, ул. Проектная, 4

иый эфир (т.кип, 40-70° с) - зслоро- форм - диэтиловьй эфир (85;10j5), объем 100 мл, Францию в виде ярко- оранжевой полосы с R 0,55, содержахинона проводят на окиси алюминия для тонкослойной хроматографии или окиси алюминия II степени по Брокма- ну. Элюцию проводят смесью петролей-

1чую убихинон Q , отделяют и упари- вают.

0,01% дрожжевого экстракта, 0,05% тиосульфата и 0,2% лактата натрия, 0 раз (0,1о-0,2 мг/г сухих клеток), а по сравнению с другими известными

Убихинон вьщеляют из полученных клеток Rh. sulfoviridis PI аналогично примеру 1,

Выход П 1,8 мг/1 г сухих микробных клеток.

Использование предлагаемого способа выделения убихинона обеспечивает по сравнению с известным в 100,01% дрожжевого экстракта, 0,05% тиосульфата и 0,2% лактата натрия, 0 раз (0,1о-0,2 мг/г сухих клеток), а по сравнению с другими известными

в 100 раз увеличение выхода убихинона 0.

0,01% дрожжевого экстракта, 0,05% тиосульфата и 0,2% лактата натрия, 0 раз (0,1о-0,2 мг/г сухих клеток), а по сравнению с другими известными

Формула изобретения

Способ получения убихинона Qy, включающий культивирование штамма- продуцента, отделение биомассы, ее омыление с. последующим выделением . убихинона из неомъшенной фракции, отличающийся тем,что, с целью повышения выхода целевого продукта, в качестве продуцента используют штамм Rhodopseudomonas viridis ВЫ или штамм Rhodopseudomoas sulfoviridis PI,

.Тираж 500

Подписное

Изобретение относится к микробиологии и касается получения убихи- нона Q, используемого в медицине. Цель изобретения - повышение выхода целевого продукта. Сущность способа сводится к тому, что фототрофные бактерии выращивают в питательной среде Пфеннига, полученную биомассу лиофильно высушивают, затем омьшяю г. После омьшения целевой продукт экстрагируют органическим растворителем, промывают и высушивают. Выход уби- хинона Q,j 1,8-2,6 мг/г сухих клеток. 01 CAS 00