СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ D - (1-H) -ГЛЮКОЗАМИНА Советский патент 1994 года по МПК C07H5/06 

Изобретение относится к усовершенствованному методу получения D-(1-³H)-глюкозамина, широко используемого в биохимии.

Целью изобретения является увеличение молярной активности D-(1-³H)-глюкозамина.

П р и м е р 1. К 1 мл 0,1 М фосфатного буфера с рН 5,8 добавляют 10,8 г (50 мкмоль) D-глюкозамина и 100 мг катализатора 5% PdO/Al₂O₃. Смесь перемешивают магнитной мешалкой в атмосфере ³Н₂-газа при давлении 0,1 МПа при комнатной температуре в течение 4 ч. По окончании реакции изотопного обмена фильтрованием отделяют катализатор и промывают дважды водой порциями по 3 мл. Объединенные фильтрат и промывной раствор упаривают на ротационном испарителе при температуре 40^оС. Удаляют лабильный тритий 3-кратным упариванием водно-спиртового раствора полученного продукта.

Очистку и обессоливание D-(1-³H)-глюкозамина проводят с помощью препаративной тонкослойной хроматографии на Силуфоле UV-254 в системе растворителей н-бутанол - уксусная кислота - вода 5 : 2 : 1. Размер пластин 15х15 см; R_f D-глюкозамина составляет 0,33±0,06. Продукт элюируют водой.

Молярную активность D-(1-³H)-глюкозамина А_моль (МБк/моль) выражает формула
A_моль= , где А_об - объемная активность раствора D-(1-³Н)-глюкозамина (МБк/мл);
М - молекулярная масса D-глюкозамина;
С - количественное содержание D-глюкозамина в растворе, г/л.

Количественное содержание D-глюкозамина в растворе определяют по цветной реакции с N,N-диметил-n-аминобензальдегидом.

Радиохимическую частоту определяют методом тонкослойной хроматографии на Силуфоле UV-254 в системе растворителей н-бутанол - уксусная кислота - вода 5:2:3 или методом восходящей бумажной хроматографии на ватмане-3 в системе растворителей н-бутанол - уксусная кислота - вода 4:1:5. Проявление пятна свидетеля проводят при опрыскивании хроматограмм раствором KMnO₄-NaIO₄. Определение R_f меченого продукта проводят при обычном сканировании радиохроматограмм.

Полученный D-(1-³Н)-глюкозамин имеет молярную активность 555-740 ТБк/моль (15-20 Ки/ммоль), радиохимическую чистоту более 95%.

Влияние кислотности реакционной среды на молярную активность D-(1-³Н)-глюкозамина показана в размерах 2-5 в таблице.

Таким образом этим способом удается получить целевой продукт с малой активностью в 3-4 раза превышающей активность препарата, полученного по прототипу.

Изобретение относится к аминосахарам, в частности, к получению D-(1-³H)- - глюкозамину (ГА), который используется в биохимии. Увеличение молярной активности ГА достигается использованием другого катализатора (КТ). Получение ГА ведут каталитическим гетерогенным изотопным обменом между D-глюкозамином и газообразным тритием в фосфатном буфере в присутствии КТ-5% PdO/Al₂O₃ при pH среды 5,8 - 6,0. Очистку и обессоливание ГА проводят тонкослойной хроматографией. Полученный ГА имеет 95%-ную радиохимическую чистоту и молярную активность 15 - 20 Ки/ммоль, что в 3 - 4 раза выше активности известного препарата. 1 табл.

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ D-(1- ³H) -ГЛЮКОЗАМИНА путем каталитического гетерогенного изотопного обмена между D-глюкозамином и газообразным тритием в фосфатном буфере в присутствии 5%-ного палладиевого катализатора на носителе, отличающийся тем, что, с целью увеличения молярной активности целевого продукта, реакцию изотопного обмена проводят в присутствии окиси палладия, осажденной на окиси алюминия, в реакционной среде, имеющей pH 5,8 - 6,0.