Способ определения индивидуальной чувствительности детей к витамину Д Советский патент 1988 года по МПК A61B10/00 

со

05

со

о

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и касается способов определения индивидуальной чувствительности детей к витамину D.

Цель изобретения - повышение точности способа за счет разделения взвеси эритроцитов на две пробы, добавления трис-НС1- -буфера, добавления в одну пробу витамина D, инкубации двух проб, измерения степени гемолиза и концентрации малонового диальдегида (МДА) и определения чувствительности по уменьшению отношения МДА к гемолизу в пробе с витамином по сравнению с контролем.

Способ осушествляют следующим образом.

. Берут периферическую кровь, приготавливают взвесь эритроцитов и делят на две пробы. В одну из них добавляют 30 мкг витамина D. Обе пробы инкубируют 10 мин при 37° в трис-НС1-буфере (рН 7,8), после инкубации определяют в них степень гемолиза и количество МДА последовательно в одной пробе и по изменению отношения МДА/ге- молиз в пробе с витамином D по сравнению с пробой без витамина судят об адекватности D-витаминной терапии; при уменьшении отношения МДА/гемолиз начинают или продолжают терапию витамином D, а при отсутствии изменений или его увеличении прекращают или не назначают D-витаминную терапию.

Пример 1. Больной Л., недоношенность 8 недель, масса тела при рождении 2000 г. Начал обследоваться с 12-го дня жизни. Соматическое состояние удовлетворительное. До назначения витамина D отношение МДА/гемолиз было низким (0,30). Введение в пробу витамина D привело к незначительному его увеличению (0,38). Это указывает на нежелательность назначения витамина D. Через 2 нед. после начала D-витаминной терапии по 4000 ME в сутки отношение МДА/гемолиз возросло до 0,87. Введение на этом фоне в пробу (in vitro) витамина D привело к незначительному его умень

шению (0,74), через 3 нед. назначения препарата отношение остается повышенным (0,82).

Вывод: данному ребенку нецелесообразно назначение терапии витамином D.

Пример 2. Больная Б., недоношенность 3-4 нед, масса тела при рождении 2750 г. Начало обследования - 10-й день жизни. Соматическое состояние тяжелое, энцефалопатия тяжелой степени. До назначения витамина D отношение МДА/гемолиз было повышено (1,99), а содержание 25-ОНД снижено (14 нг/мл). Введение витамина D (in vitro) привело к уменьшению соотношения до 0,52, что явилось показанием адекватности D-витаминной терапии. Двухнедельное назначение витамина действительно снизило отношение МДА/гемолиз до 0,8 и повысило концентрацию 25-ОНД до 24 нг/мл. Введение в пробу витамина D на фоне двухнедельной терапии привело к дальнейшему снижению отношения МДА/гемолиз до 0,28, что дало основание сделать вывод о продолжении D-витаминной терапии этому ребенку и в течение 3-й недели.

По сравнению с известным предлагае- мый способ дает 100%-ную точность при определении чувствительности детей к витамину D, что иллюстрирует таблица.

5

0

Формула изобретения

Способ определения индивидуальной чувствительности детей к вита.мину D путем исследования свойств эритроцитов периферической крови под действием витамина D, отличающийся тем, что, с целью повышения

точности способа, взвесь эритроцитов разделяют на две пробы, добавляют в них трис- НС1-буфер, в одну добавляют витамин D, обе пробы инкубируют, затем измеряют степень гемолиза и концентрацию малонового

диальдегида и определяют организм чувствительным по уменьшению отношения малонового диальдегида к гемолизу в пробе с витамином по сравнению с контролем.

Изобретение относится к педиатрии. Цель изобретения - повышение точности способа. В одну из проб с взвесью эритроцитов добавляют вита.мин D. Обе пробы инкубируют. Затем определяют в ни.х степень гемолиза и концентрацию малонового диаль- дегида. При отсутствии изменений соотношения концентрации малонового днальде- гида к гемолизу в пробе с витамином по сравнению с контролем или увеличении этого соотношения витамин D не назначают. Способ позволяет определить состояние плазматической мембраны эритроцитов с точностью до 100%. I табл.

Известный способ

Предлагаемый способ I

До назначения витамина D исследуются мембраны эритроцитов и назначают витамин D только детям с высоким отношением МДА/гемолиз и его значительным уменьшением при введении витамина D в пробу (in vitro). Это дает возможность прогнозировать индивидуальную чувствительность к витамину D

Изменение параметров (активность АТФ-азы и гемолиза) могут носить адаптационный характер, поэтому не обеспечивается 100%-ная точность наличия патологических изменений, связанных с влиянием витамина D

Продолжение таблицы.

.Назначают витамин D внутрь.

.Исследуют в эритроцитах отношение МДА/гемолиз и изменение этого отношения на фоне лечения витамином D (а также в пробах с введенным витамином D in vitro). Снижение величины отношения считают положительным эффектом терапии, а снижение его и в пробе с витамином D - показанием к продолжению терапии, тогда как увеличение отношения ВДА/гемолиз является показанием к прекращению лечения

.Применение метода (отношения МДА/гемолиз) четко указывает

на наличие патологических изменений в мембранах при его повышении, что дает 100%-ную точность значительного улучшения состояния плазматической мембраны, если оно уменьшается, и 100%-ную точность ухудшения состояния мембран, если оно увеличивается под влиянием витамина D как in vitro, так и in vivo