Способ получения производного 2,3,4,5-тетрагидро-1,5-бензоксазепин-4-она Советский патент 1988 года по МПК C07D211/18 A61K31/4465 A61K31/4523 A61K31/553 A61P9/12 

CM

Изобретение касается способа получения новых конденсированных семи- членных циклических соединений, а именно производного 2,3,4,5-тетра- гидро-1,5-бензоксазепин-4-она, которое обладает антигипертонической активностью и может найти применение в медицине.

Целью изобретения является разработка способа получения нового класса конденсированных семичленных циклических соединений, обладающих антигипертонической активностью при низкой токсичности.

Пример. 3(5)-Г5-(1-Бензил- оксикарбонил-А-пиперидил)-1-этокси- карбонилпентил -амино-2,3,4,5-тетра- гидро-1,5(5Н)-бензоксазепин-4-он в количестве 2,0 г,О,9 г трет-бутил- хлорацетата, 0,5 г иодида калия, 2,0 г карбоната калия и 15 мл N,N-ди метилформамида перемешивают в течение 15 мин при комнатной температуре Эту смесь выливают в 100 мл воды и далее экстрагируют 200 мл этилацета- та. Полученный таким образом экстракт промьшают разбавленной соляной кислотой, затем раствором бикарбоната натрия и водой, сушат с помощью безводного сульфата натрия и концентрируют в вакууме. Полученный остаток хроматографируют на колонке, заполненной силикагелем, в качестве злюен та используют смесь, состоящую из гексана и этилацетата в соотношении 2:1, с получением первоначально трет бутил-3(S)(1-бензилоксикарбонил- 4-пиперидил)-1(К)-этоксикарбонил- пентил -амиио 4-оксо-2,3,4,5-тетра- гидро-1,5,-бензоксазепин-5-ацетата в количестве 0,94 г, представляющего собой бесцветное масло.

Из второй фракции получают трет- бутил-3 (S)-i5-(1-бензилоксикарбонил- 4-п; перидил)-1 (S)-этоксикарбонилпен- тил -амино-4-оксо-2,3,4,5-тетрагид ро-1,5-бснзоксазепин-5-ацетат в количестве 0,83 г, представляющий собой бесцветное масло.

ИК-спектр, )„«кс см : 3330; 1740; 1690; 1680.

Масс-спектр: 651 (М) . Пример2. К раствору 1,5 г трет-бутил-3(S)5-(1-бензилоксикар- бонил-4-пиперидил)-1(Я)-этокс1жарбо- нилпентил -амино-4-оксо-2,3,4,5-тет рагидро-1,5-бензоксазепин-5-ацетата в 5 МП уксусной кислоты добавляют

5

5 мл 30%-ного раствора бромида водорода в уксусной кислоте. Полученную таким образом смесь отстаивают в те-

чение ,5 ч при комнатной температуре, а затем разбавляют простым этиловым эфиром в количестве 100 мл. Верхний слой удаляют путем сливания, а образовава(ийся остаток растворяют

в 1 н. растворе гидроокиси натрия в количестве 20 мл. Полученный раствор отстаивают в течение 30 мин при комнатной температуре. После добавления 4 мл уксусной кислоты, полученную

смесь хроматографируют на МС1-геле, с применением в качестве элюента смеси, состоящей из воды и метанола в соотношении 1:1. Полученный элюат концентрируют в вакууме и лиофшш-

0 зуют с получением в результате 0,71 г 3 (S)(5)-карбокси-5-(4-пиперидил) пентил -амино-4-оксо-2,3,4,5-тетра- гидро-I,5-бензоксазепин-5-уксусной кислоты (соединение I), представляющей собой бесцветный порошок . li jj, -118°(в воде).

Изучение антиг1тертонической активности соединения I.

Эксперимент 1 . Р1сследование ин- гибирующего влияния соединения I на энзим превращения ангиотензина I (ЭШО .

Эксперимент проводили с исполь5 зованием гиппурил-Ь-гистиднл-Ь-лей- цина (ГГЛ) в качестве основы, а ршги- бир дощее действие на ЭПА выражали в процентах ингибирования на количество гиппуровой кислоты, образуемой

0 ЭПА, при вводе соединения I. Раствор соединения I в буферном растворе 0,02-0,5% диметилсульфоксида - 100 ммоль бората-НС1 (рН 8,3, с содержанием 300 ммоль хлористого нат5 рия) вводили в 100 мкл ЭПЛ (концентрация белка 20 мг/мл) и 100 мкл ГГЛ (1,25 MMOjna) . В качестве контроля использовали буферный раствор борат- НС , содержащий диметилсульфоксид с

п концентрацией, равной концентрации испытуемого раствора. После нагревания раствора при 37°С в течение 1 ч в него вводили 150 мкл 1 н. соляной кислоты для завершения реакции. Посг ле ввода 0,8 мл этилацетата раствор подвергали центрифугированию со скоростью 11500 об/мин в течение 2 мин. Алкквоту в количестве 0,5 мл отделяли от этилацетатного слоя и высуши-

вали при температуре ниже 40° С в струе газообразного азота. Остаточный продукт тщательно перемешивали с 4,5 мл дистиллированной воды и смесь подвергали колориметрическому воздействию при длине волны 228 нм. Результаты испытания показали, что соединение Т. в концентра1ши 1.10 моль ингибирует активность ЭПА на 99%.

Эксперимент 2. Исследование влияния соединения Т против гипертонического действия ангиотензина I.

Эксперимент проводили на крысах- самцах (Sprague-Dawley) весом 300- 400 г, которые имели свободный дос- к воде и пище. Крыс анестезировали путем внутрибрюшинного ввода натрийпентабарбитала (50 мг/кг) за день до проведения испытания и в бедренную артерию вставляли полиэтиленовую трубку для измерения кровяного давления, а в венную артерию вставляли такую же трубку для ввода ангиотензина I и II. Трубки закрепляли неподвижно.

В день испытания измеряли среднее кровяное давление в контрольной фазе посредством электрического гемодина- мометра (модель МРИ-0,5-290-0-111, изготавливается NEC-Sanei, Япония) и регистрировали с помощью полиграфа (NEC-Banei типа 365 или Nippon Kol- den типа R.M-45) . Затем вводили ангио- тензин I, а после этого ангиотензин II через бедренную вену в дозе соответственно 300 и 100 мкг/кг для измерения гипертонического действия. Затем путем внутривенной инъекции вводили в дозе 300 мкг/кг соедине- ние I в виде солевого раствора, а через 5, 10, 30, 60, 90 и 120 мин после этого вводили ангиотензин I и II повторно для определения гипертонических реакций. При расчете процента ингибиропания гипертонической активности ангиотензина I величину процента ингибирования корректировали с учетом изменения со временем гипертонической реакции за счет ангиотен- зина II.

Результаты испытаний показали,что соединение I в дозе 300 мкг/кг ингибирует гипертоническое действие ангиотензина I на 100% на всех отрез

в ниш И

Заказ 503/58

ках времени исследования, т.е. от 5 до 120 мин включительно.

Эксперимент 3. Исследование токсичности соединения I проводили на 5 мьпнах путем перорального ввода соединения I в дозе 300 мг/кг каждой мьппи. Через 1 нед мышей подвергли осмотру. Все подопытные животные выжили, изменений не обнаружено.

Таким образом предлагаемое соединение 1 обладает высокой антигипер- тонической активностью при низкой токсичности.

Формула изобретения

Способ получения производного 2,3,4,5-тетрагидро-1,5-бензоксазепин 4-0на формулы

(

V 1HCH-COOH -Nсн соон

отличающийся тем, что соединение формулы

(

- NHCHCOOPi

где R - низший алкил, подвергают взаимодействию нием формулы

W - CHjCOOR,, где W - галоген;

Rj - низший алкил,

при комнатной температуре ное соединение формулы

(сн2 -х -соосн -(Q

30 35 404550

55

аж 370

-T HCH-COORi О

CH2COOR2

где R, и R имеют тсазанные значения, обрабатываиот последовательно кислотой и основанием.

Подписное

Изобретение касается гетероциклических соединений, в частности производного 2,3,4,5-тетрагидро-1,5- бензоксазепин-4-она - 3(S)-tl(S)- карбокси75-(4-пиперидил)-пентил -амино-4-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-I,5- бензоксазепин-5-уксусной кислоты(ОА), которая обладает антигипертонической активностью и может найти применение в медицине. Для выявления новой активности у соединений указанного класса был разработан способ синтеза ОА. Получение ОА ведут из 3(S)(l- бензилоксикарбонил-4 пиперидил)-1 - алкоксикарбонилпентил -амино-2,3,4,5- тетрагидро-1,5(5Н)-бензоксазепин-4 она и низшего алкилгалогенацетата при комнатной температуре с последующей обработкой сначала кислотой, а затем основанием для удаления защитных бензилоксикарбонильной и низших алкильных групп. Испытания показьша- ют, что ОА в дозе 300 мкг/кг ингиби- рует гипертоническое действие ангио- тензина на 100% на всех промежутках времени - от 5 до 120 мин. В указанной дозе ОА не оказьшает токсического действия. СО со СА 00 IND tsD