Способ получения 2-амино-9-(2-оксиэтоксиметил)-9Н-пурина (его варианты) Советский патент 1988 года по МПК C07D473/32 A61K31/52 A61P31/12 

со

к1

со

Од ГО

ОО

Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности получения 2-амино-9-(2-оксиэтоксиметил)- -9Н-пурина (АП) - биологически активного вещества, которое может быть использовано в ветеринарии и медицине. Цель - создание более активных и малотоксичных веществ. Синтез АП ведут: а) из 2-амино-6-хлор-9- - 2-бензоилоксиэтоксинетш1 пурина, который гидрируют в среде абсолютного этанола в присутствии 5% Pd/C с последукщим удалением бензоильной группы обработкой ацетиламином; б) из 2-ацетамидо-9-(2-ацетоксиэток- симетил)-6-меркапто-9Н-пурина, который гидрируют на никеле Ренея при кипячении. АП имеет т. пл. 186- 187,5°С. Испытания АП показывают его противовирусное действие и низкую токсичность - LDjo 3100 мг/кг. 2 с.п. ф-лы, 3 табл. СО

сн

Изобретение относится к способу получения 2-амино-9-(2-оксиэтокси- метил)-9Н-пурина - нового биологи- чрски активного соединения, которое может найти применение в медицине и ветеринарии.

Цель изобретения - поиск новых производных в ряду пурина, малоток- сичных и обладающих более высокой антивирусной активностью.

Пример 1. 2-Амино-9-(2-ок- сиэтоксиметш1)-9Н-пурин.

Смесь 2,48 г (7,13 мМ) 2-амино- -6-хлор-9-(2-бензоилоксиэтоксиметил) пурина, 250 мл абсолютного этанола, 1,9 мл триэтиламина и 0,6 г 5% палладия на активированном угле встряхивают в среде вЪдорода при начальном давлении 3,52 кг/см при комнат- ной температуре в течение 20 ч, фильтруют, к фильтрату добавляют 0,265 г свежего палладиевого катализатора и 1,9 мл триэтиламина и смесь встряхивают в среде водорода еще в течение 16 ч,

Этанольный раствор после фильтрования через фильтр из целита упаривают под вакуумом и полученный белый остаток экстрагируют кипящим бензо- лом несколько раз. Объединенные бензольные экстракты, содержащие 2-ами- но-9-(2-бензоилоксиэтоксиметил)-9Н- пурин, концентрируют, добавляют 20 мл 40%-ного водного метиламина и 20 мл метанола и упаривают в открытой колбе на паровой бане досуха. Полученную смесь растирают с диэтило вым эфиром для удаления N-метилбенз- амида, а затем перекристаллизовыва- ют из 100% этанола, получают 2-ами- но-9-(2-оксиэтоксиметил)-9Н-пурин в виде аналитически чистых гранул, т. пл. 186-187,5°С.

Пример 2. 2-Ацетамидо-9- -ацетил-6-меркапто-9Н-пурин.

Смесь тиогуанидина (54,0 г), уксусного ангидрида (250 мл) и п-толу иленсульфоновой кислоты (2,0 г) кипятят в течение ночи. Реакционную смесь охлаждают, образовавшееся тведое вещество отфильтровывают, тщательно промывают ацетоном, получают 2-ацетамидо-9-ацетил-6-меркапто-9Н- пурин (62,3 г) в виде коричневого твердого вещества, спектр ЯМР соответствует описанной структуре.

2-Ацетамидо-9-(2-ацетоксиэтокси- метил)-6-меркапто-9Н-пурин.

5 0 5

0 г О

5

0

К смеси 2-ацетамидо-9-ацетил-6- -меркапто-9Н-пурина (30,0 г) и п-толуиленсульфоновой кислоты (2,0 г) в толуоле (150 мл) по каплям добавляют в течение 4 ч при 90-95 С 2-ок- си-1,4-бутандиол диацетат (40,0 г). Через 10 ч реакционную смесь охлаждают и образовавшееся твердое вещество отфильтровывают и промывают ацетоном. Перекристаллизовывают из диметилформамида/ацетонитрила (1/1) с обесцвечиванием при использовании активированного угля. Получают 2- -ацетамидо-9-(2-ацетоксиэтоксиметил)- -6-меркапто-9Н-пурин (25,6 г) в виде желтого вещества, т. пл. 205- 206°С.

2-АМИНО-9-(2-оксиэтоксиметил)- -9Н-пурин.

2-Ацетамидо-9-(2-ацетоксиэток- симетил)-6-меркапто-9Н-пурин (0,50 г, 1,53 ммоль), свежеприготовленный никель Ренея W-2 (2 г) и 58%-ный гидроксид аммония (25 мл) кипятят 2 ч. Катализатор отфильтровывают и фильтрат упаривают до 5 мл, добавляют ацетон (20 мл) и выпавший осадок отфильтровывают и сушат. Получают 0,21 г (65%) белого кристаллического вещества, по данным ТСХ и ЯМР соответствующего аутентичному образцу, т. пл. 188-189°С.

Проведены биологические испытания 2-амино-9-(2-оксиэтоксиметил)- -9Н-пурина (6-деоксиацикловира).

Следующие опыты были проведены с целью определения уровней содержания в моче и плазме ацикловира . (известного соединения) после орального дозированного введения его крысам и 6-деоксиацикловира (предлагаемого соединения).

Методика проведения экспериментов .

Крысам (мужские особи длинных крыс Эванса) дозированно вводят с помощью внутрикишечной иглы препарат и помещают их в метаболические клетки, где происходит разделение мочи и фекалиев. Образцы собранной мочи и плазмы анализируют на содержание ацикловира методом радиоиммунопробы. Показано, что 6-деоксиацикловир не взаимодействует с антисывороткой, используемой при проведении этой пробы.

В табл. 1 дано содержание ацикловира в моче после орального дози

рованного введения крысам ациклови- ра, аминоацикловира и 6-деоксиацик- ловира.

В табл. 2 дано сравнительное содержание в плазме ацикловира после орального дозированного введения крысам 6-деоксиацикловира и аминоацикловира.

Изучение токсичности. Четырем собакам Бигля (две женские особи и две мужские) давали 6-деоксиацикло- вир per. OS. (один раз в день в течение пяти дней) в количестве 40 мг/кг в день. Отрицательного воздействия на одну мужскую и одну женскую особи не обнаружено после их умерщвления в конце периода введения препарата и на одну мужскую и одну женскую особи после их умерщвления через две недели после окончания введения препарата. LD. 6-деоксиацикловира 3100 мг/кг.

Противовирусное действие. 70 мышей СД1 инфицируют вирусом герпес типа I штамма ICI 300 LD, введя внутрицеребрально 0,025 мл. Мышей разделяют на группы по десять в каждой, одну группу оставляют в качестве контрольной, не зараженной вирусом, а остальным группам вводят соответственно ацикловир в дозировке 100 мг/кг (I) подкожно (s.c.), (II) орально, (III) внутрибрюшинно (i.p.) и соединение примера 1 (6-деоксиацик ловир) в дозировке 100 мг/кг (I) подкожно (s.c.), (II) орально, (III) внутрибрюшинно (i.p.). Опытные группы получают дозы препарата через 2-3 ч после инфицирования и дважды в день в течение четырех дней. Оценку производят через 14 дней и фиксируют время выживания.

Полученные результаты представлены в табл. 3.

Таким образом, Полученные результаты показывают, что 6-деоксиацикло- вир, полученный предлагаемым способом и его вариантом, при сохранении низкой токсичности обладает более высокой антивирусной активностью, чем известное соединение (ацикловир) при оральном введении.

Формула изобретения

гх)

1

N I

СН ОШаСН ОН

отличающийся тем, что производные пурина общей формулы

X

TY

L

сЛ

N

t

CHiOCH2.CHiOR

где М - Cl;

G - NH,;

R - бензоил,

подвергают каталитическому гидрированию в среде абсолютного этанола в присутствии 5% Pd на активированном угле с последующим удалением бензо- ильной группы взаимодейстгчем с аце- тиламином.

Ъ1

СНгОСН СН ОН

отличающийся тем, что производное пурина формулы

А6

N Ъ1

CHiOCH CH OR

где G - группа CHjCONH;

М - SH;

R - COCHj,

подвергают гидрированию над Ni-Pe- нея.

Т а б л и ц а 1

Примечание. В скобках даны номера животных.

3733236

Таблица 2

Концентрация ацикловира в плазме

6 ДеоксиациклоБир

Крыса 1 Крыса 3

Контрольная 4+2 1+2+5+30,407

Опытная при ведении:

ацикловира

(s.c.) 3+3 4+4 2+4 1+6 0,261

6-деоксиацикловира (s.c.) 1+2 3+3 1+4 2+4 2+50,289

ацикловира

(орально) 2+2 3+3 5+40,325

6-деоксиацикловира

(орально) 1+2+ 1+4 2+5 3+6 1+8 0,186

(I выживание) ацикловира

(i.p.) 2+2 2+4 2+5 2+7 0,242 (1 выживание)

6-деоксиацикловира (i.p.) 1+2+ 2+3 1+4 4+6 1+80,233