Способ определения активности терминального эритропоэза Советский патент 1988 года по МПК G01N33/48 

00

i;o

со

4::

Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии, и может быть использовано для диагностики макро- цитарных анемий.

Цель изобретения - ускорение способа .

Пример. Больной К., 35 лет, поступил с диагнозом: анемия, болен в течение 2 лет. Анализ крови: гемоглобин 71 г/л, эритроциты 2050000, ц.п. 1,1; ретикулоциты 0,5% (10250/мкл). Резко выражен анизоци- тоз, содержание макроцитов 31%. Ми- елограмма: содержание зритроидных клеток 52%. Мегалобластов 12%.

Для проведения дифференциальной диагностики анемии определяют активность терминального эритропоэза что позволяет установить механизм макроцитоза. С этой целью проводят пункцию грудины, готовят мазки костного мозга. После фиксации в течение 30 с при 60° ч ацетоне, насыщенном трилоном Б, мазки ополаскивают и высушивают. Инкубацию мазков проводят в течение 1 ч при 37 С в среде содержащей: сукцината натрия 540 мг, 1/15 М фосфатного буфера (рН 7,2) 10 мл, п-нитротетразолия фиолетового (1 мг/мл) 10.мл, трилона Б сухого 13 мг, метиленовой сини 0,1% - 8мкл. По истечении срока инкубации мазки промывают 30 с в проточной воде, ополаскивают дистиллированной водой и высушивают. При микроскопии мазков костного мозга подсчитали 100 клеток эритроидного ряда. Из них 3 полихро- матофильных нормобласта содержали соответственно 12, 18 и 17 гранул восстановленного формазана. Таким образом, активность терминального

0

5

0

5

0

5

0

зритропоэза (ТЭ) у больного 3%, что свидетельствует о его снижении. Это может быть связано с дефицитом витамина В,. Больному проведена В ,2- терапия, после чего - дегельминтизация (отошло 50 экземпляров дифилло- ботриоид). Через 12 дн. состояние значительно улучшилось. На фоне восстановления гемоглобина до 127 г/л, эритроцитов до 3905000, ретикулоци- тов до 10% (39050/мкл) отмечено повышение активности ТЭ до 11%, что является благоприятным прогностическим показателем. Больной выписан в удовлетворительном состоянии.

Предлагаемый способ позволяет сеус- ратить время для выполнения одного исследования и для получения конечного результата: 15 сут в известном способе, 2 ч 30 мин - в предлагаемом.

Формула изобретения

Способ определения активности терминального эритропоэза пут.ем инкубации клеток костного мозга с последующим микроскопическим исследованием эритроидных клеток с высокой биосинтетической активностью гема, отличающийся тем, что, с целью ускорения способа, клетки костного мозга инкубируют в среде , содержащей в качестве красителей сукцинат натрия, п-нитротетразолий фиолетовый и метиленовую синь, и по проценту полихроматофильных нормо- бластов, содержащих гранул восстановленного формазана, определяют активность терминального эритропоэза.

Изобретение относится к медицине. Мазки костного мозга инкубируют в среде, содержащей сукцинат натрия, п-нитротетразолий и метиле- новую синь. По проценту полихромато- фильных нормобластов, содержащих 10-20 гранул восстановленного фор- мазана, определяют активность терминального эритропоэза. Изобретение позволяет сократить время исследования до 2 ч 30 мин.