СМ
. 113841
Изобретение относится к области получения новых 1,4-замещенных пипе- разиновых производных обшей Формулы
R
|)-(сн2)п-к()к-в.
. где R, - фенил, незамещенный или замещенньй галогеном; R - фенил или С, -С алкил, или R и R вместе образуют 1-(1,2,3,4-тетрагидррнафта- лил) или 1-инданил при условии, что Н, или вместе образуют конденсированное фенильное кольцо, незамещенное или замещенное галогеном или нитрогруппой; В - пиримидинил-2 или его 5-фто (хлор)- или 5-фтор-4-метил- тиозамещенные, 3-цианопири- дил-2, бензизотиазолил-3; .п 2-4, обладающим психотропными свойствами,
Целью изобретения является разработка, на основе известных методов, способа получения новых соединений, обладающих ценными фармакологическими свойствами при низкой токсичности
Пример 1. 2- 4-t4-(5-Фтор-4- метилтио-2-пиримидинил)-1-пиперази- нил бутилТ-1Н-изоиндол-1,3 (2Н)-дион.
Смесь 8- 5-фтоР-4-(метилтио-2- пиримидинил)} -8-аза-5-азонийспиро- (4,5)деканбромида (9,76 кг, 0,027 мол и фталимидной калиевой соли (5,0 г, 0,027 моль) кипятят с обратным холодильником в диметилформамиде (100 мл в течение 16 ч. Летучие соединения удаляют под вакуумом, смесь растворяют в хлороформе (100 мл) и экстрагируют водой (2x50 мл). Органическую фазу отделяют, сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют и кон- центрируют под вакуумом до смолистог соединения, которое растворяют в эта ноле (50 мл) и.обрабатывают этаноль- ным раствором хлористоводородной кислоты. После охлаждения продукт кристаллизуют и получают 12,9 г (93,0%) продукта в виде белой твердой хлористоводородной соли, т.пл. 235-237°С.
Вычислено, %: С 54,14 Н 5,41; N 15,03.
C,,,SHCl
Найдено, %: С 54,25; Н 5,34; N 15,06.
5
JQ 52025
30
-зс ) 0 д
0
5
992
ЯМР-спектр (ДМСО - dg): 1,73 (4, м)Г 2,51 (3,c)i 3,09 (4,м)| 3,58 (6, м) 4,59 (2, м); 7,86 (4,м);8,19 (1,Д,;1,8 Гц); 11,63 .(1, щс).
ИК-спектр (КВг), 725, 1440, 1500, 1550, 1585, 1715, 1770, 2500 и 2940.
П р и м е р 2. 3,3-Дифенш1-1-Г4- и-(2-пиримидинил)-1-пиперазинил1бу- ,5-пирролидиндион.
Смесь 1-(4-брюмбутш1)-3,3-дифе- нил-2,5-пирролидиндиона с 1,4-дибро- бутаном и карбонатом калия в ацето- нитриле при кипячении с обратным холодильником (4,1 г, 0,01 моль), 1-(2-пиримидинил) пиперазина (1,75 г, 0,01 моль) и карбоната калия (2,94 г, 0,02 моль) кипятят с обратным холодильником в ацетонитрила (300 мл) в течение 12 ч. Раствор фильтруют и концентрируют под вакуумом до масла, которое обрабатывают смесью воды и хлороформа. Органическую фазу отделяют, сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют до масла, которое растворяют в изо- пропаноле. Обработка этого раствора этанольным раствором хлористоводородной кислоты приводит к кристаллизации белой хлористоводородной соли (4,2 г, 83%) т.пл. 201,5-203,5°С.
Вычислено, %: С 66,46, Н 6,38J N 13,84.
C,,Hj,N,0, НС1.
Найдено, %: С 66,31; Н 6,42; IN 13,64.
ЯМР-спектр (ДМСО - d): 1,64 (4, м), 3,05 (4, м), 3,50 (6, м), 3,60 (2 с), 3,68 (2, м), 6,74 (1, т, ;4,4 Гц), 7,34 (10, с); 8,45 (2,д, 4,4 Гц), 11,78 (1, шс). . , ИК-спектр (КВг), см : 700, 765, 1445, 1495, 1550, 1585, 1700, 1775, 2450 и 2940.П р и м е р 3. 1 - 4-Г4-(2-Пири- мидинил)-1-пиперазинил бутил -спиро- ; (1,2,3,4-тетрагидронафталин-2,3-пир- ролидин-2 ,5 -дион).
Смесь -Г4-бромбутил )спиро(1,2, 3,4-тетрагидронафта;7Ин-2,3-пирроли- дин-2,5-диона, (3,9 г 0,6l1 моль) и 1-(2-пиримидинил)пиперазина (1,82 г 0,011 моль) нагревают в ацетонитриле (100 мл) в течение 24 ч с 2,76 г (0,02 моль) карбоната калия. Горячий раствор фильтруют и концентрируют под вакуумом до твердого остатка, который растворяют в хлороформе
(100 мл) и экстрагируют водой (2х 100 мл). Органическую фазу отделяют, сушат над безводным сульфатом натрия фильтруют и концентрируют под вакуумом до твердого остатка, которьм растворяют в ацетбнитриле (40 мл) и обрабатывают 1,62 мл 7 и, этанольно- го раствора хлористоводородной кислоты Охлаждение приводит к кристаллизации 3,5 г (выход 68,6%) белого твердого соединения, которое пере- кристаллизовывают из смеси ацетонит- рил:этанол (2:1) и получают продукт в форме хлористоводородной соли, т.пл. 241-243,.
Вычислено, %: С 63,89; Н 6,86, N 14,90.
НС1.
Найдено, %: С 63,76; Н 6,79; N 14,68.
ЯМР-спектр (ДМСО - dg) : 1,76 (6,м), 2,36 (1,д$ 17,6 Гц) 2,72 (1,д; 17,6 Гц); 3,00 (8,M)j 3,44 (6,м); 4,67 (2,м), 6,72 (1,т, . 4,5 Гц); 7,09 (4,м); 8,42 (2,д, 4,5 Гц), 11,75 (1, шс).
ИК-спектр (КВг), см : 750, 1440, 1550, 1585, 1700, 1770, 2500 и 2930.
Аналогично могут быть получены соединения, указанные в табл.1.
Соединения обладают психотропными свойствами. С этой точки зрения они
обладают транквилизирующей активностью при использовании в нетоксичных дозах и представляют собой особьш интерес как успокаивающие и/или антипсихотические агенты. Соединения активны также при снятии каталептического состояния. Выбранные испытания на животных in vivo u in vitro подтверждают то, что предпочтительные соединения формулы, в которых В представляет собой 2-пиримидильньй остаток, обладают успокаивающим и/или антипсихотическим действием. Представленные отборочные испытания in vivo использованы в качестве основы для определения транквилизирующего действия и возможньк побочных действий предлагаемый соединений.
Методика проведения фармакологических исследований осуществляется следующим образом: защита против нор пинефринового летальноро исхода.
1. Вещества в объеме воды О,1 см орально вводят группам по 20 мьщ1ей . (19-21 г не вьщерживались без пищи, обоего пола). Через 2 ч мьшам внутри
0
5
0
5
0
5
0
5
брюшинно вводят по 14,4 мг/кг гидрохлорида эпинефрина (что эквивалентно 12,0 мг/кг эпинефрина в форме основания) , что достаточно для умерщвления 67,0 t 1,53% в 40 группах по 20 контрольных мышей (которым вводят физиологический раствор). У мьшей, предварительно обработанных нетоксическими дозами веществ, снижение смертности свидетельствует об антагонизме действию эпинефрина. Вещества считаются эффективными, если смертность в обработанной группе снижается существенно по сравнению со смертностью в группе из 20 обработанных физиологическим раствором контрольных мьшей. Если вещество проявляет свою, эффективность, то испытуемую дозу последовательно уменьшают на 50% до тех пор, .пока одна или больше доз перестанут оказывать существенное влияние на смертность. Обычно используемые оральные дозы равны 50 25; 12; 5;-6,0; 3,0 и 1,5 мг/кг.
Значения увеличивающейся с уменьшением доз смертности откладывают на логарифмическом графике доз, из которого делается оценка эффективной дозы для каждого вещества и ее стандартного отклонения. Эффективная доза представляет собой профилактическую дозу, защищающую 50% животных, которые в другом случае погибли бы после инъекции эпинефрина, т.е. оцениваемая доза снижает смертность с 67,0 + 1,53% (контроль) до 33,5%. Анализ данных по смертности, полученных для 40 групп по 20 контрольных мышей с применением испытания Chi Square на гомогенетичность показывает, что группы взяты из гомогенной по- ;пуляции (,50).
Выбор двухчасового интервала между оральным введением вещества и инъекцией эпинефрина, основан на нескольких известных или установленных фактах. Кроме времени, необходимого для усвоения испытуемого соединения, необходимо учитывать тот факт, что характерные соединение из нескольких химических серий, охватываемых исследованием, не развивают, как известно, максимальной активности при реверсировании прессорного ответа на эпинефрин и блокировании адре- нергического нервного влияния в течение 10-30 мин.и больше даже при внутривенном введении собакам. Проводят
эксперименты с несколькими адренер- гическими блокирующими веществами для получения важной информации относительно начала и продолжительност действия на мышей. Полученные данные показывают, что с точки зрения удобства и простоты при массовом отборе соединений интервал в 2 ч между введением вещества и инъекцией эпинефри на наиболее пригоден для определения активности соединений, независимо от того начинается ли действие вещества несколько позже или раньще. Даже такое соединение, как дибенамин (N,N- дибензил- -хлорэтиламин пНС) J обладающее медленным началом действия, проявляет активность через 2 ч после введения и дает достаточно высокую дозу (50,0 мг/кг или больше). Выбор двухчасового интервала после орального введения пригоден также для про- верки соединений, обладающих быстрым действием.
Острую токсичность после орально- го применения трех или четырех доз каждого вещества в группах по 20 м,ы- шей (19-21 г не вьщерживались без пищи, обоего пола) оценивают после
откладывания данных по проценту смер
тности на логарифмическом графике доз.
Подавление индуцированной реакции уклонения (ИРУ),
2. Воспитанная избегающая реакция Крыс приучают перебираться через барьер в качающемся ящике в течение 30 с помещения в ящик(ВИР). Помещение животного в испытуемую камеру является воспитанным стимулом (ВС). Через 30 с электрический удар производится еще в течение 30 с в той половине камеры, которую первоначально занимала крыса. Этот удар является .неожиданным стимулом (НС). После удара необработанная крыса перебирается в другую безопасную половину ящика. Это избегающая реакция на неожиданность (ИРН). Блокирование ВИР без влияния на ЙРН рассматривается как лабораторное доказательство транквилизирующего действия.
Испытуемые соединения вводят внут рибрюшинно и через 30 мин начинают наблюдения 5 которые продолжают в течение 30 мин. Первоначальное испыта- ние проводят на четырех животных при единичной дозе. Если соединение проявляет лишь слабую активность, то
д г 0
5
0
5
0
5
испытывают еще четырех животных при той же дозе, и если плохая активность подтверждается, то соединение отбрасывают. Если соединение оказывается активным, то испытывают другие дозы с использованием четырех животных на каждую дозу. После э того. определяют НИР и для ВИР.
Амфетамин-агрегационный стресс. Группам по 20 или больще мышей-самцов весом 18-20,г подкожно вводят различные дозы испытуемого соединения. Затем мыщей высаживают в отдельные клетки на 60 мин, после чего им подкожно вводят по 20 мг dl-амфета- мина сульфата (ЛД99,д),и высаживают в две клетки по Ю мышей в клетку. Через 23 ч регистрируют смертность. Защиты от смертности для каждой дозы откладывают на логарифмическом графике и определяют дозу (ЭД) требуемую для защиты 50% при доверительном интервале 95%.
3. Анализ на связывание с рецептором. Допамин.
Мембраны крысиных и бычьих мозгов связывают (Зн) допамин таким образом который указывает на связь с постси- наптическими допаминовьми рецепторами. Региональные изменения распределения связывающих центров параллельны .региональным различиям мозговой допаминовой иннервации. Относительная активность веществ по отношению к , этцм связывающим центрам аналогична относительной фармакологической активности изменения поведения, которая предположительно реализуется через допаминовые рецепторы.
Каудальную или другую часть свежих или замороженных телячьих мозгов гомогенизируют в 40 объемах ледяного 0 мМ трис-буфера, ,7 при 25 с с помощью Brinkmann Polytron РТ-10 (с установкой на 6,5 с). Гомогенизат центрифугируют дважды при 50000 g в течение 10 мин (Sorvall РС2-В, 20000 об/мин, ротор SS-34 или М-24) при повторной гомогенизации осадка в свежем буфере. Результирующий осадок гомогенизируют в 90 объемах холодного, свежеприготовленного 50 мМ трис-буфера, содержащего 0,1% аскорбиновой кислоты, 10 мкМ паргилина и следующих ионов, мМ: NaCl 120, НС1 5, CaClj 2 и MgClj1 с получением результирующего ,1 при 37°С. Тка- невую суспензию (11 мг/мл) помещают
71
на 5 мин в баню при и возвращают на лед.
Замораживание ткани в течение периода времени до 2 недель не ока зы- вает влияния на связывание или оказывает лишь незначительное влияние. Добавление приблизительно физиологических концентраций ионов снижает значения для обоих лигандов, но не изменяет специфического связывания.
Используют (зтил-1- H/N/) допамин 8,4 С/ммолв.
В день использования каждое радиоактивное вещество разбавляют 0,1%-ной аскорбиновой кислотой до концентра- ц;ии 100 нМ t(H)допамин.
В две или три одинаковые инкубационные пробирки прибавляли по 100 мкл раствора соединения в различных концентрациях, растворенного в 0,1%-ной аскорбиновой кислоте и 1,8 мл тканевой суспензии. Пробирки инкубируют при 37 С в течение 10 мин и быстро фильтруют под вакуумом через фильтр Whatmar GF/B и промывают фильтр двумя порциями по 5 мл ледяного 50 мМ трис-буфера, ,7 при 25°С. Фильтры измеряют методом жидкостной сцинцилляционнбй спектромет- рии в 10-12 мл Hydromix lorktown Research с эффективностью 37-44%.
Насьщение или специфическое свя- зыванИе (Н) допамина измеряют как избыток по сравнению с холостым опытом, проводимым в присутствии 1 мкМ допамина рши 10 мкМ М(+)-бутакламола Как установлено ранее, связанная радиоактивность из ( Н) допамина мигрирует с аутотентичным допамином. Об- щая связанная мембранной радиоактивность составляет менее 3% для (Н) допамина. Специфическое связывание каудальными мембранами составляет около 40% приблизительно 60% для ( Н допамина. Последнее значение значи- - тельно более точно, чем полученные ранее результаты с использованием центрифугирования.
Бутирофенон и аналогичные соединения растворяют в минимальном объеме ледяной уксусной кислоты (результирующий объем менее 1%) и прибавляют до концентрации 2 мМ к-горячему 0,1%- ному раствору аскорбиновой кислоты. Другие вещества растворяют в 0,1%-ном растворе аскорбиновой кислоты и все вещества разбавляют дополнительно
Q
5
0 5 о
„
5
0
5
998
0,1%-ной аскорбиновой кислотой. Белки определяют по методике Лоури,
Региональное распределение при связывании (Н) допамина телячьими мозгами.
Зоны телячьих мозгов, вьздержанных в замороженном виде по 1 неделе, анализируют с помощью 5 нМ ( Н) допа- мина.
Результаты выражают как среднее значение ± стандартная ошибка для трех экспериментов (за исключением заднего мозга), Следует отметить, что представленные данные отражают реально наблюдаемое связывание, а не общее число связывающих центров в каждом регионе (зоне). Неспецифическое связывание во всех регионах приблизительно одинаково и равно приблизительно 200-250 моль (мг белка для связывания (Н) допамина. Как правило, невозможно определить специфическое связывание, которое составляет менее 10% от этих контрольных значений.
Региональные изменения конкуренции вещества по отношению к связыванию (Н) допамина.
Регионы свежих или замороженных телячьих мозгов анализируют с помощью трех или более концентраций соединений, проводя Для каждого случая два или три эксперимента. Концентрации соединения, требуемые для ингибирова- ния специфического связывания на 50% (HKjt) определяют из логарифмических графиков и переводят в значения К; по уравнению; К (1 + с) KB, где концентрация радиоактивного лиганда (5 нМ для (Н) допамина), а К- -| их константа диссоциации (принимаемая за 20 нМ для ( Н) допамина), Результаты представлены как среднее значение i стандартная ошибка для числа экспериментов, указанного в скобках. Значения К, для индивидуальных лекарств одинаковы для использованных концентраций 1 или 2 нМ/(Н) гало- перидола,
Ингибирование соединениями связывания (Н) допамина.
Каждое вещество испытывают в трех и более концентрациях дважды или трижды для указанного числа экспериментов.
Фармакологические данные некоторых соединений, охватываемых формулой, указаны в табл.2,
913841
Формула изобретения
Способ получения производньсх 1-ге- тероарил-4-(2,5-пирролидиндион-1- ил-алкил)пиперазииа общей формулы
«Л°
(снг1„-кО-в
10
де R, - фенил, незамещенный или
замещенный галогеном; R - фенил или С -С -алкил, или R 1 и R вместе образуют 1-(1,2,3,4-тетрагидронафта- лил) или 1-инданил при условии, что R3 - Hj, либо R ,- RjBMecTe образуют конденсированное фенильное кольцо, незамещенное или замещенное галогеном или нитрогруппой;
В - пиримидинил-2 или его 5- фтор(хлор)- или 5-ФТОР-420
25
иетилтиозамещенные, 3-циано99
10
пиридил-2, бензизотиазо- лил-3; п 2-4,
отличающийся тем, что соединение общей формулы
RI О
RO-H:
.:Е
где R,-Rj - указаны выше;
W - / NH или N - (CHj) -Q, где Q - галоид,
подвергают взаимодействию с соединением общей формулы
Y-N(N-B
где В - указано выше;
. Y - водород или группа Q-(CH,), где пир- указаны выше, при условии, если W -) Ш, то Y - группа Q-(CH ,,)„-, либо, если W (CH)Q, то Y - водород.
Изобретение относится к гетероциклическим соединениям, в частности к производным 1-гетероарил-4(2,5-пирролидиндион-1-ил-алкил)пипе- разина (ПР) общей формулы: R, R 1 о )в где R, - фенил, незамещенный или замещенный галогеном; R г фенил или С1-С4-алкил, или R , и R - вместе 1 - (1,2 ,-3,4-тетрагидронафталил) или 1-инданш1, при условии что R3 Н, либо R -R - вместе образуют конденсированное фенильное кольцо, незамещенное или замещенное галогеном или нитрогруппой; пиримидинил-2 или его 5-фтор(хлор)-или 5-фтор-4-метил- тиозамещенные, З-цианопиридил-2, бензизотиазолил-3, , обладающим психотропными свойствами. Цель - разработка способа получения новых соединений, обладающих ценными фармакологическими свойствами. ПР полу- чают из соединения общей формулы: ( (R -CO-W-C(0)-CR j, где R - R3 имеют указанные значения W - )Ш или N (CHj) n - Q, где Q - галоид и S о СО соединения общей формулыi Y N-CHi-CHi-N(B)-CH -СН-г, где В имеет указанное значение, Y - водород или группа Q-(CH j) п,где пир имеют указанные значения, при условии, W- vNH, Y - группа 0-(СН.,) , либо если (CH2), Y - водород. 2 табл. оо оо 4 яяЛ. QD СО
Rt (CHi tT-NQN-B 1
9 Фенил
Трифтор- Hj 4 метил
10
Фенил Hj 4
11
Таблица 1
Н, 4
3-Бензизотиазолил
188-189,5
2-Пиримидинил
185-186
2-(3-Цианопири- 179-182 дил) .
Н.
3-Бензизотиазо- 188-189,5 лил
11
Этил
131-(1,2,3,4-Тетрагидронафталин)
141-(1,2,3,4-Тетрагидронафталин)
15 1-(1,2,3,4-Тетрагидронафталин) Н,
1-Инданил
1-Инданил
Бензо
2,3-Дихлорбёнэо
1,2,3,4-Тетрахлорбензо
2-Нитробензо
1,4,5,6-Тетрагидробензо
2-Нитробензо
Бензо
Бензо
1384199
12 Продолжение табл.1
а
а
,
а А .
, 4
4 4 4 4 4 4
5-Фтор-2-пиримидинил
2-Пиримидинил
2-(3-Цианопири- дил)
З-Бензизотиа-- золил
2-11иримидиншг
5-Фтор-2-пиримидинил
2-Пиримидинш1
241- 196207241
247 198
-212 -248
2-(3-Цианопи- ридил
5-Фтор-2-пири- мидинил
5-Хлор-2-пириМИДИНИЛ
137- 145- 154- 130- 209- 205139,5 146,5 156 , 133 210 208
Таблица2
| Вейганд-Хйльгетаг | |||
| Методы эксперимента в органической химии, М., Химия, 1968, с.413 | |||
| , |
