(21)4076304/31-13
(22)04.04.86
(46) 07.05.88. Бюл.№ 17
(71)Институт элементоорганических соединений им. А.Н.Несмеянова
(72)И.А.Ямсков, Л.Л.ХинКис, В.А.Даванков, М.С.Мосичев
и И.М.Грачева
(53)577.5(088.8)
(56)Авто рское свидетельство СССР № 1060675, кл. С 12 N 11/04, 1982.
Авторское свидетельство СССР № 1070163, кл. С 12 N 11/04, 1982.
(54)СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММОБИЛИЗОВАННЫХ КЛЕТОК, ОБЛАДАЮЩИХ ГЛЮКОЗОИЗОМЕ- РАЗНОЙ АКТИВНОСТЬЮ
(57)Изобретение относится к микро- . биологической промышленности, а именно к способам иммобилизации микробных клеток, обладающих глюкозоизоме- разной активностью. Целью изобретения является повышение выхода фермента тинной активности при иммобилизации и увеличение стабильности иммобиг лизованных клеток. Способ состоит в том, что проводят включение клеток Streptorayces а1Ъо5г1зео1и8 28-3 в нерастворимый сорбент путем смешивания клеток с. водным -раствором соли кобальта с последующим осаждением водным аммиаком, отделением и высушиванием осадка. Соотношение сухих клеток и ацетата кобальта устанавливают равным 1:(О,1-10,0), а осаждение осадка проводят при рН 6,5-10,0. Способ позволяет увеличить стабиль-- ;, ность в раз и повысить выход ферментативной активности на 19-22%. 1 табл.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| Способ получения иммобилизованных клеток, обладающих глюкозоизомеразной активностью | 1990 |
|
SU1731815A1 |
| Способ получения иммобилизованных клеток, обладающих глюкозоизомеразной активностью | 1988 |
|
SU1634715A1 |
| БИОКАТАЛИЗАТОР, СПОСОБ ЕГО ПРИГОТОВЛЕНИЯ И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГЛЮКОЗО-ФРУКТОЗНЫХ СИРОПОВ | 2007 |
|
RU2341560C1 |
| Способ получения препарата внутриклеточной глюкозоизомеразы | 1982 |
|
SU1125248A1 |
| Способ получения иммобилизованных клеток,обладающих глюкозоизомеразной активностью | 1982 |
|
SU1070163A1 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГЕТЕРОГЕННОГО БИОКАТАЛИЗАТОРА, БИОКАТАЛИЗАТОР НА ОСНОВЕ ГИДРОЛАЗЫ ЭФИРОВ АЛЬФА-АМИНОКИСЛОТ И СПОСОБ СИНТЕЗА АМИНОБЕТА-ЛАКТАМНОГО АНТИБИОТИКА ПОД ДЕЙСТВИЕМ ЭТОГО БИОКАТАЛИЗАТОРА | 2008 |
|
RU2381273C2 |
| Способ ковалентной иммобилизации лизоцима для последующего применения иммобилизованного лизоцима для снижения бактериальной обсемененности биологических жидкостей | 2018 |
|
RU2694883C1 |
| РЕКОМБИНАНТНЫЙ БЕЛОК LACspCBD, ОБЛАДАЮЩИЙ БЕТА-ГАЛАКТОЗИДАЗНОЙ АКТИВНОСТЬЮ И СПОСОБНОСТЬЮ САМОПРОИЗВОЛЬНО СВЯЗЫВАТЬСЯ С ЦЕЛЛЮЛОЗОСОДЕРЖАЩИМИ СОРБЕНТАМИ, РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК, КОДИРУЮЩАЯ СИНТЕЗ РЕКОМБИНАНТНОГО БЕЛКА LACspCBD, ШТАММ Escherichia coli M15 [pREP4, pLACspCBD] - ПРОДУЦЕНТ РЕКОМБИНАНТНОГО БЕЛКА LACspCBD, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММОБИЛИЗОВАННОГО РЕКОМБИНАНТНОГО БЕЛКА LACspCBD НА ЦЕЛЛЮЛОЗЕ И СПОСОБ ФЕРМЕНТАТИВНОГО РАСЩЕПЛЕНИЯ ЛАКТОЗЫ | 2004 |
|
RU2278160C2 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОКАТАЛИЗАТОРА И БИОКАТАЛИЗАТОР ДЛЯ ДЕТОКСИКАЦИИ ФОСФОРОРГАНИЧЕСКИХ НЕЙРОТОКСИЧНЫХ СОЕДИНЕНИЙ В ПРОТОЧНЫХ СИСТЕМАХ | 2006 |
|
RU2315103C1 |
| КОМПЛЕКСНЫЙ ПРЕПАРАТ-ПРОБИОТИК В ИММОБИЛИЗОВАННОЙ И ЛИОФИЛИЗИРОВАННОЙ ФОРМЕ | 2008 |
|
RU2371479C1 |
00 со со
00 Niiik
Изобретение относится к микробиологической Лромышленности, а именно к способам иммобилизации микробных клеток, облдающих ферментативной активностью, и быть использовано в пищевой промьциленности при производстве гл:аокозо фруктозных сиропов из крахмалоСодержащего сырья,
Цель изобретения - повышение вы- хода ферментативной активности при иммобилизации и увеличение стабильно сти целевого продукта.
Способ заключается в том, что клетки, обладающие глюкозо-изомераз- ной активностью, включают в нерастворимый сорбент, для чего их сусепн- дирзпот Bi растворе соли кобальта, при массовом соотношении сухие клетки; соль кобальта 1:(О,1-10,0) и прЪводят осаждение доведением рН до 6,5-10,0. Полученный осадок отфильтровывают, промывают водой и фосфатным буфером рН 7,0, высушивают и измельчают.
П.р и м е р 1. 5 г влажных кле- ток (влажность 90%) Streptomyces albogriseolus 28-3, полученных после центрифугирования культуральной нид- кости. и обладающих активностью 46,2 ед/Гз суспендируют в 5 мл 1 -но го раствора ацетата кобальта (соотношение сухих клеток к ацетату кобальта l;0,)j добавляют по каплям концентрированный раствор аммиака до рН 655, Осадок отфильтровывают, про- мьшают водой, фосфатным буфером и измельчают.
Активность влажного иммобилизованного препарата 93,2 ед/г, выход ак- Т1-ГОНОСТИ 86%, стабильность 30 сут.
За единицу активности глюкозоизо- меразы принимают количество фермента, катализирующее изомеризацию одного ; микромоля глюкозы во фруктозу при рН 7,0 и температуре 60°С за 1 мин. В качестве субстрата используют 2 М раствор глюкозы с добавлением 10 М ионов М. Стабильность иммобилизованного препарата определяют как время полуинактивадии.глюкозоизомеразы при 60°С и рН 7,0,.
Пример 2. Иммобилизацию кле ток проводят аналогично примеру I. Соотношение .клеток и ацетата кобальта 1:10, рН 10,0. Активность препарата 71,0 ед/г, выход активности 81%, стабильность 41 сут.
Пример 3„ Иммобилизацию клеток проводят аналогично примеру 1
г
|0
J5 . 0
5 О ,г
Q
45- 0
5
Соотношение клеток и ацетата кобальта 1lOsSjpH 8,0.Активность препарата 133 ед/г, вьрсод активности 96%, стабильность 42 сутг
Пример 4. Иммобилизацию клет ток проводят aHajjorH4Ho примеру 1 . Соотношение клеток и ацетата кобальта 1:5, рН 9jO. Активность препарата- 65,1 ед/г, выход активности 99%, стабильность 45 сут.
Пример 5. Иммобилизацию клеток проводят аналогично примеру 1. Соотношение клеток и ацетата кобальта 50,04j рН 6,4. Активность препарата 32,0 ед/г, выход активности 22%, стабильность 12 сут.
П р и м е р 6. Иммобилизацию клеток проводят аналогично примеру 1. Соотношение клеток и ацетата кобальта 1:11, рП 10,1 Активность препара.та 15,1 ЕД/Г, выход активности 40%. стабильность 6 сут.
Пример 7. Для иммобилизации используют клетки активностью 38J6 ед/г. Иммобилизацию проводят аналогично примеру 1, Соотношение сухих клеток и ацетата кобальта ,1:1, рН 8,0. Активно сть препарата : 86,2 -ед/г, выход активности 92%, стабильность 36 сут.
Пример 8. Иммобилизацию np o. водят аналогично примеру 1, но исполь- ззпот 1%-ный раствор хлорида кобальта, Соотношение клеток Str, albogriseolus и СоСе 1:1 рН 8,0 .Активность препарата 77,6 ед/г, выход активности 88%, стабильность 28 сут.
Использование предлагаемого спосо - ба позволяет получить иммобилизованный препарат клеток с высоким-выходом глюкозоизомеразной активности и достаточно высокой стабильностью,
Результаты иммобилизации клеток приведены в таблице.
Предлагаемый способ по сравнению с известным способом позволяет повы г ; сить активность иммобилизованного препарата в 1,5 - 3,2 раза, выход активности - на 19 - 22%, стабильность - более, чем в 20 раз.
Формула изобретения
Способ получения иммобилизованных клеток, обладающих глюкозоизомеразной активностью, путем кх смешивания, с гёлеобразующими соединениями и последующего включения клеток в не31 3938 7
растворимый сорбент, отличаю-.
щ и и с я тем, что, с целью повьше- ния выхода ферментативной активности при иммобилизации и увеличения стй- бильности целевого продукта, клетки смешивают с водным раствором соли
1:5
9,0 3,5 65,1
Известный 3
4,2
кобальта при массовом соотношении сухие клетки:соль кобальта 1:0,1-10,0 доводят рН среды до 6,5-10,0 и проводят отделение и высушивание осадка включенных в нерастворимый сорбент клеток.
99,0 45
41,5
77,0 2
