Способ получения производных бис-триазола Советский патент 1988 года по МПК C07D249/08 

ел ч

Изобретение касается производных бис-триазола (БТ), в частности полз чения соединений общей формулы ;HC N-CH N-N-CH 2-CR, (ОН)-CR jF-N-N- , где R - 4-F-CgH ; 4-С1-С Н4; 2,4-ди- фторфеншт, 2,4-диклорфенш1;К 2 H.CHj или F,проявляющих антигрибковое действие. Синтез БТ ведут конденсацией триазола с оксираковой группой и 1, 2,4-триазола в присутствии основания (KjCOj) или без него, если берут основную соль 1,2,4-триазола. Выделение целевого продукта ведут либо в виде смеси изомеров, либо хроматогра- фически разделяют на диастереомерные пары. Активность новых БТ проявляется в дозе 0,06-0,49 мг/кг при токс 1Чнос- : ти 720 мг/кг, 2 табл. СО

см

Изобретение относится к способу получения новых производных бис-триа- зола, которые обладают противогрибковой активностью, общей формулы

ОН RI

.

К N-CHg-C- C-N

N

R Р N

где R - 4-фтор-54-хлор, 2,4-дифтор2,4-дихлорфенил j Н, CHg или F.

Целью изобретения является способ позволяющий получить новые противогрибковые соединения с улучшенными свойствами.

Пример 1 .

Процесс А. 1 ,2--бис(1Н-1 ,2,4-Tpи- aзoл-l-ил)-2-(2 4-дифтopфeнил)-l- фтopпpoпaн-2-oп (смесь двух диасте-О реоизомернык пар).

Смесь гидрида натрия (21 мг 60%- ной дисперсии в масле, 0,54 ммоль гидри,ца натрия) и 143 мг (0,65 ммоль йодистого триметил сульфония перемешивают в среде сухого азота и добавляют безводный диметил сулльфоксид (4 мл }, 40 мин спустя к раствору добавляют 4 мл безводного тетрагидро- фурана и смесь охлаждают до . Добавляют раствор 2-(lH-i , 254-три- азол-1-ил)-2,2,4-трифторацетофенона (130 мг; 0,54 ммоль) в тетрагидрофу- ране (3 мл) и температуру медленно поднимают до комнатной. Затем добавляют воду (10 мл) и эфир (50 мл). Эфирный слой отделяют,, высушивают над сульфатом магния и выпариванием получают в виде смолы промежуточный продукт эпоксид (А)Добавляют 1,2, 4-триазол (112 мг; 1,62 ммоль),без- водньш карбонат калия (223 мг; 1,62 ммоль) и безводный диметилфор- мамид (4 мл), смесь перемешивают и нагревают в течение 2 ч до 70 С. Смесь охлаждают, добавляют воду (50 мл) и экстрагируют хлористые- метиленом (2 X 50 мл). Совместным выпариванием соединенных хлоридметиле- новых экстрактов с кст-шолом получают смолу, которая содержит неочищен- ньш продукт в виде смеси двух диас- тереоизомерньЕс пар. Смолу подвергают хроматографии в колонке с силика- .гелем при элюировании 4%-ной (по объему) смесью мета.нола в хлористом метилене. Последующим вьшариванием

0

5

0

5

5

0

5

0

5

собранных продуктосодержащих фракций получают указанное соединение в виде бесцветного вещества (72 мг; 41%), которое после кристаллизаци-и из смеси этилацетата и циклогексана имеет т.пл. 142-145 с. Соединение является смесью двух диастереоизо- мерных пар в приближенном соотношении 4:1.

Найдено,%: С 48,3; Н 3,5; N 25,6.

.

Вычислено,%: С 48,2; Н 3,4; N 25,9.

Процесс В. Частичное разделение двух .диастереоизомерных пар 1,3-бис (1Н-1 ,2,4- триазол- -ил)-2-(2,4-дифтор- фенил)-1-фторпропан-2-ола-.

Смесь гидрида натрия (406 мг 60%- ной дисперсии в масле,10,17 ммоль гидрида натрия) и триметилсуль- фоксония (2,68 г, 12,20 ммоль) перемешивают под сухим азотом и добавля- ют безводный диметил сульфоксид (40 мл). Спустя 30 мин к раствору добавляют безводный тетрагидрофуран (40 мл) и смесь охлаждают до . К смеси добавляют раствор, состоящий из 2-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)-2,2 , 4 -триацетофенона (2,45 г; 10, 17 ммоль). в тетрагидрофуране (30 мл), и температуру медленно поднимают- до . Добавляют воду (50 мл) и смесь экстрагируют тремя равными частями (60 мл) эфира. Соединенные эфирные слои высушивают над MgSO и выпариванием получают промежуточный продукт эпоксид (А) в виде полукристаллического осадка. Добавляют 1 , 2,4-триазол (3,51 г; 50,85 ммоль), безводный карбонат калия (7,0 г; 50,85 ммоль) и безводный диметилформамид (40 мл), смесь перемешивают в течение 18 ч, нагревая до 70 с. Смесь охлаждают, добавляют воду (1 00 мл ) и экстрагируют хлористьм метиленом (3 х 60 мл). После высушивания над N§864 соединенных хлоридметиленовых экстрактов совместным выпариванием с ксилолом получают смолу. Эту смолу подвергают хроматографии в KOfioHKe с силикагелем при элюировании 3%-ной смесью метанола в хлористом метилене с последующим элюированием 4%-ногЬ метанола в хлористом метилене. Две диастереоизомет- рические пары элюируют чистыми, в неразделенном вид. Собранные и выпаренные продуктосодержащие фракции дают указанное соединение в виде бесцветного осадка (1,1 г,33%). Хрома .

тография при высоком давлении жидкости (ХЕДЖ) показьшает, что продукт является смесью двух диастереоизомер- ных пар в приблизительном соотношении 4:1.

Кристаллизацией этой смеси изомеров из раствора, содержащего этил- ацетат (20 мл) .и гексан (30 мл), получают первую чистую диастереоизо- ю мерную пару в виде бесцветного осадка (688 мг) с т.плЛ49-150 С.

ВьмисленоД: С 48,2; Н 3,4;N 25,9.

C,,H,,FjN,0.

Найдено,%: С 48,0; Н 3,4; N 25,9. is

Концентрированием кристаллизационных жидкостей получают вторую группу кристаллов (88 мг ) с т.пл. 17-1 23 с, Хроматография при высоком давлении жидкости показьшает, что они являют зо ся смесью двух диастереоизомерньпс пар в приблизительном соотношении 1s5.

Вычислено,%: С 48,2; Н 3,4;N 25,9.

Найдено,%: С 48,0; Н 3,5; N 26,0. 25

Вьтариваннем последних кристаллизационных жидкостей получают смолу (170 мг)5 хроматография при высоком давлении жидкости показывает, что смола содержит две диастереоизонер- ЗО ные пары в приблизительном соотношении 1:1.

П р и м е р 2. Полное разделение двух диастереоизомерных пар 1,3-бис 1Н-1,2,4-тpиaзoл-l-ил)-2-(2,4-ди- фтopфeнил) -1-фторпропан-2-ола.

1S 3-бис(1Н-1,2,4-Триазол-1-ил)- 2- (2,, 4-дифторфенш1) -1 -фторпропан-2- ол (170 мг) как смесь диастереоизомерных пар в приблизительном соотно-. 40 шении 1:1 по примеру 1 (процесс В) растворяют в хлористом метилене

35

Пример

Rf I T.nn.i cl Амаляа, (майдено/итислепа) JIС JН N

114-

Я too-гог «з,,7 эи/з,1 22,9/23,5

1 0-4и,1М.1З.г/3,123.4/23,5

CHj 13«-145 ,t/4«,«З.в/3,в24.6/24,8

s

о

5

О

0

5

(1 мл), а затем адсорбируют в колонке (2 X 30 см) на Мерк-силикагеле (230-400 меш), приготовленном в смеси, состоящей из гексана: изопропано- ла:уксусной кислоты (60:40:2), Элюи- руют 500 мл того же растворителя при умеренном давлении (5 фунтов на KB.дюйм), получают полное разделение диастереоизомерных пар. Выпариванием растворителя получают изомеры в виде бесцветных осадков (этилацетат используют как растворитель для элюирования при повторении этого процесса).

Диастереоизомерная пара, злюиро- ванная первой (80 мг): кристаллизация из смеси этилацетата и гексана дает кристаллический осадок с т.пл. US-ISO C.

Вычислено,%: С 48.,2; Н 3,4;N 25,9.

.O

Найдено,%: С 48,0; Н 3,4; N 25,9.

Вторая Диастереоизомерная пара (70 мг): кристаллизация из смеси этилацетата и гексана дает кристаллический осадок с т.пл. 137-139 0.

Вычислено,%: С 48,2; Н 3,4;N 25,9.

C jH FjNgO

Найдено,%; С 48,4; Н 3,5; N 25,7.

Примеры 3-6. Соединения готовят аналогично примеру 1 (процесс А) из соответствующих исходных веществ 1 используя при хроматографии хлорис- тый метилен, содержащий (по объему) 2% изопропилового спирта и 0,2% аммиака (уд.вес.О,880), и кристаллизуя продукт из смеси, состоящей из этил- ацетата и петролейного эфира (т.кип. 60-80 С) .

Характеристика соединений по примерам 3-6 представлена в табл.1.

Таблица

41,3/48,«

25,8/26,0

-t

50,/50,S

4,1/3,9

26,7/27,4

В примерах 3-6 разделения диас- . тереоизомеров не достигнуто. В примере 5 происходит частичное разделение . Первым элюируют один чистый ди- астереоизомер, который кристаллизуется из смеси этилацетата и петролей- ного эфира (т.кип.бО-вО с), т.пл. . 200-202 . После этого элюируют смесь диастереоизомеров, которая кристаллизуется из смеси этилацетата и пет ролейного эфира (т.кип.бО-ЗО С), т.пл. leO-lSA C.

Пример 7.iJ2-(H-1,2,4-Три10

вают в смеси, состоящей из диметилфор- мамида (5 мл), карбоната калия . (200 иг) и I,2,Д-триазола (200 .мг), до . Затем реакционную смесь охлаждают, соединяют с водой (30 мл) и экстрагируют этилацетатом (3 х 15 мл) Соединенные органические экстракты промывают солевым раствором (2 х X 5 мл), высушивают (MgSO) и выпаривают до масла (235 .мг) .

Флеш-хроматографией этой смолы на силикагеле с применением для злюиро- вания icnopHCToro метилена, содержаазол-1-ил)-2,2,2, 4 -тетрафторацето- 15 щего изопропанол (10% по объему) и фенон.гидроксид аммония (уд.вес 0,880,

2-(1Н-,2,4-триазол-1-ил)-2,2-4- 1% по объему), получают 53 мг вещест- трифторацетофенон (l60 мг) обрабатывают промытым эфиром гидридом натрия (25 мг) в сухом тетрагидрофуране. (5 мл), при этом образуется оранжевый раствор. Когда раствор вьщержи- вают в атмосфере фторида хлорноватой кислоты, то при быстром поглощении этого химиката происходит образоваIние бледно-желтой суспензии. Тетра- гйдрофуран удаляют при пониженном НайденоД: С 45,6; Н 3,0; N 24,3.

давлении, остаток разделяют между ЯМР-спектр (CDClj) с/ : 4,77 (d,.

водой (10 мл) и этилацетатом (10мл), Н, 1. 14 Гц); 5,39 (d, 1Н, ); органический слой высушивают (MgSO) ЗО 6,1 (6s, 1Н); (т,2Н); 7,44 (dd,

на Rr 0,3 (в той же растворяющей Системе), которое затвердевает в эфи-

20 ре с образованием порошка. Кристаллизацией этого осадка из смеси цикло- гексана и этилацетата получают бесцветные Кристаллы указанного соединения с т.пл. 132-1ЗЗ С.

25 Вычислено,%: С 45,7; Н 2,9; N 24,6 С,.

1Н, Гц,7Н); 7,73 (s,lH); 7,82 (s, IH); 7,10 (s,lH); 8,32 (s,lH).. (e 343, M+l).

и выпариванием получают указанное соединение в виде масла (127 мг).

ЯМР-спектр (CDClj) : 6,95 (т;2Н); 8iO (s,lH); 8,2 (m); 8,69 (s,.lH). I ii 1,3-бис (.1H-1,2,4-Триазол-1 - i ил)-2-(2,4-дифторфенил)-.1 ,1 -дифтор- |пропан-2-ол.

Процесс А. Из йодистого триметил- сульфоксония (0,44 г) и гидрида натрия (0,12 г 50%-ной суспензии в мае- 40 ксония (1,2 г) и гидрида натрия

ле) в сухом диметилсульфоксиде (lOMjj) при приготовляют метилид диметилоксосульфоксония. К нему добавляют сухой тетрагидрофуран (10 мл) и смесь охлазвдают до -40 С. Неочи- щенньА 2-(1Н-1,2,4-триазрл-1-ил)- 2,2,2,4 -тётрафторацетофенон (0,52 г) добавляют в сухой тетрагидрофуран (5 мл). Смесь перемешивают в течение 10 мин при , затем температуру в течение 15 мин поднимают до -10 С, nocjje этого смесь помещают на лед (100 г) и экстрагируют этилацетатом (2 х 50 мл). Соединен- ные этнлацетатные экстракты промьша- ют солевым раствором (2 х 10 мл), высушивают (MgSO) и выпаривают до получения оксирана (В) в виде масла (240 мг). Масло в течение 3 ч нагре45

(0,3 г 50%-ной дисперсии в масле диметилсульфоксиде (20 мл). Доба ют сухой тетрагидрофуран (30 мл) смесь охлаждают до -35 С. 2-(1Н2,4-Триазол-1-ш1)-2,2,2 ,4 -тётр фторацетофенон добавляют в тетра рофуран (5 мл), в течение 15 мин смесь перемешивают при -ЗО С; по этого в течение 15 мин температу поднимают до , смесь переме вают при -Ю С в течение 30 мин, тем в течение 15 мин температуру нимают до . На этой стадии : смеси добавляют 1,2,4-триазол (1 gg и безводный карбонат калия (1,0 и нагревают в течение 3 ч до затем перемешивают при комнатной пературе в течение ночи. После э реакционную смесь помещают в вод

50

вают в смеси, состоящей из диметилфор- мамида (5 мл), карбоната калия . (200 иг) и I,2,Д-триазола (200 .мг), до . Затем реакционную смесь охлаждают, соединяют с водой (30 мл) и экстрагируют этилацетатом (3 х 15 мл). Соединенные органические экстракты промывают солевым раствором (2 х X 5 мл), высушивают (MgSO) и выпаривают до масла (235 .мг) .

Флеш-хроматографией этой смолы на силикагеле с применением для злюиро- вания icnopHCToro метилена, содержащего изопропанол (10% по объему) и гидроксид аммония (уд.вес 0,880,

1% по объему), получают 53 мг вещест-

НайденоД: С 45,6; Н 3,0; N 24,3.

на Rr 0,3 (в той же растворяющей Системе), которое затвердевает в эфи-

ре с образованием порошка. Кристаллизацией этого осадка из смеси цикло- гексана и этилацетата получают бесцветные Кристаллы указанного соединения с т.пл. 132-1ЗЗ С.

Вычислено,%: С 45,7; Н 2,9; N 24,6. С,.

Н, 1. 14 Гц); 5,39 (d, 1Н, ); 6,1 (6s, 1Н); (т,2Н); 7,44 (dd,

1Н, Гц,7Н); 7,73 (s,lH); 7,82 (s, IH); 7,10 (s,lH); 8,32 (s,lH).. (e 343, M+l).

Процесс В. Этот процесс является альтернативой ; направлению процесса А. При этом направлении процесса ок- сиран (В) не вьщеляется.

Метилид диметилоксосульфоксония готовят из йодистого триметилсульфо5

(0,3 г 50%-ной дисперсии в масле) в диметилсульфоксиде (20 мл). Добавля-; ют сухой тетрагидрофуран (30 мл) и смесь охлаждают до -35 С. 2-(1Н1, 2,4-Триазол-1-ш1)-2,2,2 ,4 -тётрафторацетофенон добавляют в тетрагидрофуран (5 мл), в течение 15 мин смесь перемешивают при -ЗО С; после этого в течение 15 мин температуру поднимают до , смесь перемешивают при -Ю С в течение 30 мин, за-: тем в течение 15 мин температуру поднимают до . На этой стадии к : смеси добавляют 1,2,4-триазол (1,0 г) g и безводный карбонат калия (1,0 г) и нагревают в течение 3 ч до , затем перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. После этого реакционную смесь помещают в воду

0

(150 мл) и экстрагируют этилацетатом (3x100 мл). Соединенные органичес- кие экстракты высушивают (MgSO), упаривают до масла (1,6 г и флеш-хро матографией при элюировании смесьи. хлористый метилен:изопропанол:аммиак (уд.вес 0,880) 90:10,:. по объему получают после выпаривания соответствующих фракций кристаллический осадок (447 мг), Перекристаллизацией этого осадка из смеси циклогексана и этнлацетата получают бесцветные кристаллы с т.пл. , идентичные продукту процесса А.

П р и м е р 8. 1,3-бис(1Н-1,2,4 Tpиaзoл-l -ш1)-2-(2,4-дихлорфенш1)- 1 ,1-дифторпропан-2-ол,, т.пл. 155-6 С, получают аналогично примеру 7 (процесс В) из соответствующих исходных веществ.

Найдено,%: С 41,8; Н 2,7; N 2.2,5,

C,,H,C1,,F2NO.

Вычислено,%: С 41,6; Н 2,7;N 22,4.

Исходньй кетон 2 ,4 дихлор-2, 2-дифтор-2-,(1Н-1,2,4-триазол)-1-аце- тофенон, приготовляют подобно тому, как в примере 7, часть Ci 1 в виде масла.

ЯНР-спектр (CDClj) f: 7,3 (m; ЗН); 7,55.(s, IH); 7,8 (s, IH).

il p и M e p 9. (2,4-Дифтор фенил) -3-фтор-З-О Н-1 ,2,4-тр иазол- 1-ш1)-проп-1-ен. .

2-(1Н-1,2,4-Триазол-1-ил)-2,2 , 4 -трифторацетофенон (10 г), безводный карбонат калия (7,3 г) и бромид метилтрифенилфосфония (15,5 г) в течение 16 ч нагревают до кипения с применением обратного холодильника в 1,4-диоксане (250 мл), к которому добавляют воду (1,0 г).

Когда тонкослойная хроматографией , (силикагель, с элюированием эфиром) показывает, что исходных веществ не осталось , добавляет дополнительное . количество бромида метилтрифенилфосфония (0,74,г), а нагрев продолжают еще в течение 1 ч. Когда образуются осадок неорганического вещества н оксид трифенилфосфина, диоксан удаляют под пониженнь1м давдением, а темно- Коричневый остаток растирают в порошок в эфире (150 мл). Эфирный раствор декантируют С осадка, осадок промывают эфиром (100 мл) а промывные растворы добавляют к декантиро . ванному эфирному раствору. Соединен0

5

5

0

5

0

S

0

5

ные эфирные растворы выпаривают до темно-коричневого масла (20,0 г).

Масло хроматографируют на силика- геле (150 г) с элюированием эфиром. .Фракции, содержащие продукт (основываясь на результатах тонкослойной хроматографии) соединяют и выпаривают до образования указанного соединения в виде янтарного масла (9,6 г),

ЯМР-спектр (CDCla) . 5,78 -(dd, 1Н, Гц, 2.Гц); 6,03 (d, 1Н, Гц); 7,0 (in,4H); 7,9. (s, IH); 8,25 (s, IR)..

,3-бис(1Н-1,2,4-Триазол-1- ил)-2-(2,4-дифторфенил)-1-фторпропан- 2--СЛ.

2-(2,4-Дифторфенил)-3-фтор-З-(1Н- I ,2,4-триазол-1 ил)-проп-1-ен (0,5 г) мгта-хлорпербензойная кислота (10,8 г) (МХПБК) и ингибитор радикалов 3,3 -ди-t-бyтил-4,4 -диокси-5,5- диметилдифенилсульфид (0,11 г) нагревают до кипения с применением обратного холодильнш а в дихлорэтана (75 мл). ЯМР-спектральный анализ аликвотной части реакционной смеси показывает остаток некоторого количества исходного вещества, поэтому добавляют дополнительное количество мета-хлорпербензойной кислоты (3,5 г) 3 реакционнуто смесь нагревают еще в течение 1 ч. После охлаждения и фильтрации для удаления мета-хлорбензой- ной кислоты реакционную смесь разбавляют хлористым метиленом (150 мл), промьшают 10%-ным раствором бисульфи- та натрия (2 х 50 мл), а затем насы- щенным раствором бикарбоната натрия (2 X 100 мл). После этого органичес- ;кий СЛОЙ промыванэт насыщенным раство- IpoM хлористого натрия (2 х 50 мл)« высушивают (MgS04.) и выпаривают до получения масла (7,7 г).

ЯМР-спектральный анализ этого масла показьшает, что оно содержит эпок- сид в виде смеси двух диастереоизо- мерных пар в соотношении 3:2 совместно с другим органическим остатком. Общий выход эпоксида, как определено, составляет около 50%. Неочищенный реакционный продукт йодвергают взаимодействию с 1,2,4-триазолом (7,5 г) и карбонатом калия (7,5 г) в диметил- формамиде (100 мл) при 70°С в течение ночи. Затем реакционн/л смесь охлаждают, разбавляют 300 . воды и экстрагируют этилацетатом (3 ч 1 00 мл). Органический экстракт промьшачт на

сыщенным раствором хлористого нат- рия (2 X 50 мл), высушивают (MgSO) и выпаривают до темно-коричневого масла (4,8 г). Масло подвергают хроматографии на силикагеле (200 г) с элюированием сначала этилацетатом (1,5 л), а затем этилацетатом, содержащим 5% изопропанола, с постепенным увеличением содержания его до, 20% (по объему). Как показьшает тонко слойная хроматография, более поздние фракции содержат требуемый продукт, их выпаривают до образования белого осадка (1,4 г), который растирают в эфире до .порошка с получением белого твердого вещества, (1,5 г) т.пл. 38-1 . Для этого вещества спектроскопически подтверждена идентичность с выделенной в примере 2 второй диастереоизомерной парой.

Противогрибковую in vitro активности соединений оценивают определением М.П.К. испытуемых соединений в среде, в которой культура специфического микроорганизма не может встретиться. Серия чащек Петри с агаровой средой, в которых имеется введенное испытуемое соединение с определенной концентрацией, засевается стандартной культурой Candida albi- cans, и каждая чашка Петри затем выдерживается в термостате при в течение 48 ч. Затем чашки Петри исследуются для определения присутствия или отсутствия грибковой культуры, а соответствующая величина М.П.К отмечается. Другие микроорганизмы, используемые в таких тестах, могут включать в себя Cryptococcus neofor- mans, Aspergillus fumigatuSj- Trichop hyton spp.5 Microsporum spp., Epi dermophyton floccosum,- Coccidioides immitis u Torulopsis glabrata.

Оценку противогрибковой активности целевых соединений in vivo -проводят в серии уровней дозы при введении, путем внутрибрюшной или внутривенной инъекции или приема через пищеварительный тракт, мьшам штамма Candida albicans. Об активности судят по вьвкиванию через 48 ч группы мышей, подвергнутых воздействию исследуемого соединения, после смерти группы мьппей, не подвергнутой воздействию соединения. Отмечают уровень дозы, при котором соединение обеспечивает 50%-ную защиту против

,

140570140

ч смертельного эффекта от инъекции (D 3JP).

Оценки у мышей, кнфицирован5

ных Candida albicans, для предл агае1/мых соединений представлены в табл.2

Т а б л и ц а. 2

2 (первая диастерео- изомерная пара)

2 (вторая диастерео- изомерная пара)

5 (смесь диастерео- изомеров)

5 (выделенный диасте0,29

0,2

1

0,13

20

45

Формула изобретен

Способ получения производных

бис-триазола общей формулы

ОН

где R - А-фтор-, 4-хлор-, 254-дифтор-, 2,4-дихлорфенш1; Н, СН, или F,

отличающийся тем, что оксиран общей формулы

и,1405701 2

g. Q, 4-триазолом в присутствии основания,

ч 1 / или с 1,2,4-триазодом, взятым в N-С -С СН2Де основной соли, с последующим выI ,Д в5 Д целевого продукта и/или

при необходимости с разделением на где R и Rf имеют указанные значения, диастереомерные пары хроматографичес- подвергают взаимодействию или с 1,2, ки.