Способ получения реагентов для определения наследственных антигенов групп крови животных Советский патент 1988 года по МПК A01K67/02 G01N33/50 

сл

с:

Изобретение относится к иммунобиологии и может быть использовано в биопромьшшенности при изготовлении реагентов, применяемых в скотоводстве для генетического маркирования и контроля происхождения племенных животных. Цепью изобретения является . увеличение выхода реагентов.-Иммунную сьшоротку, полученную от животных, содержащую антитела к нескольким антигенам в титре 1:1 или выше, абсорбируют раздельно по фракциям, соответственно их специфичности к антигенам, используя эритроциты свежевзятой крог ви, затем каждую абсорбированную фракцию элюируют при 59-60°С в течение 3-4 мин. 1 .табл.

ел СЛ СП

Изобретение относится к иммунобиологии и может быть использовано в биопромышленности при изготовлении pesfreHTOB, применяемых в скотоводстве для генетического маркирования и

I контроля происхождения племенных животных.

Целью изобретения является увели|чение выхода реагентов,

Для этого.иммунную сыворотку, содежащую антитела к нескольким антигенам в титре 1:8 нли вьше, абсорбируют раздельно по фракциям соответственно их специфичности к антигенам, используя эритроциты свежевзятой крови, затем каждую абсорбированную фракцию элюит руют 3-4 мин при 59-60 0 в центрифужг ных стаканах объемом 0,75-1,0 л и по,- лучают реагент,

Пример. Изоиммунная сыворотка полученная от быка 2851 в объеме 3л содержит антитела к антигенам Igj Х2 и W . в титрах 1:8, 1:8 и1:16 соответственно. При обработке сыворотки на центрифугах S-60 и К-70 используют v: свежую цитратную кровь забиваемых на мясокомбинатах быков с установленными до убоя антигенами групп крови.

Антитело к антигену Xj абсорбируют

путем смешивания сыворотки с равным объемом отмытых эритроцитов животных, имеющим антиген Х при отсутствии антигенов I и W, Через 10 мин смесь центрифугируют в течение 10-12 мин, сьшоротку отсасывают, осадок эритроцитов 5-кратно промывают физиологи-ч ческим раствором.

I К осадку эритроцитов после промы-ч |вания добавляют равный объем подогре35

Как видно из таблицы, по специфичности и активности реагенты, изготовленные из элюатов, соответствуют эталонным реагентам.

Формула изобретения

Способ получения реагентов для определения наследственных антигенов групп крови животных, включающий поiToro до 54-5б С физиологического ра- лучение от животных изоиммунных сьтоствора хлористого натра. Компоненты смешивают, стаканы с суспензией переносят в водяную баню с температурой I59-60°С. По достижении температуры внутри стаканов 59-60°С суспензию выдерживают в бане 3-4 мин, помеши- :вая мешалкой, затем без промедления центрифугируют 5-6 мин при 3000- 4000 об/мин. Надосадочную жидкость

отсасывают и получают реагент к антигену Х в объеме 2,9 л.

Затем сыворотку абсорбируют эритроцитами животных, имеющих антиген W при отсутствии антигенов 1 и Х2, После центрифугирования смеси сыворотку отсасывают и получают из нее реагент к антигену 1 (2,9 л). Фиксированные на эритроцитах антитела элюируют описанным приемом и попуча- ют реагент к антигену W (2,9 л).

В результате из сьшоротки подучают 3 реагента: I абсорбцией, Х2 и W - элюцией. Реагент их элюата представляет собой светлую или слегка розоватую в толстом слое опалесцирую- щую жидкость, содержащую специфические антитела к тому антигену, с помощью которого они сорбированы. Реагенты из элюатов испытьшают на специфичность и активность в параллельных гемолитических тестах с эталонами на образцах крови разных пород скота.

Фрагмент гемолитического теста на образцах крови черно-пестрого скота представлен в таблице (гемолиз полный обозначен цифрой 4, частичньй- цифрами 1-3, отсутствие гемолиза точкой).

Как видно из таблицы, по специфичности и активности реагенты, изготовленные из элюатов, соответствуют эталонным реагентам.

Формула изобретения

Способ получения реагентов для определения наследственных антигенов групп крови животных, включающий по5

роток с последующим вьщелением из них абсорбцией и элюцией реагентов, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта, абсорбцию проводят раздельно по фракциям соответственно их специфичности к антигенам, а элюцию каждой фракции осуществляют при 59- 50 с в течение 3-4 мин.