Штамм бактерий FLаVовастеRIUм тIRRеNIсUм,используемый для очистки подсланевых и промышленных сточных вод от нефти и нефтепродуктов Советский патент 1988 года по МПК C12N1/20 C02F3/34 C12N1/20 C12R1/20 C02F3/34 C02F101/32 

(/ С

Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается нового штамма бактерий, используемого для очистки промышленных вод, загрязненных нефтью. Цель изобретения - штамм бактерий Flavobacte- rium tirrenicum ВКПМ Б-3369, способный более активно по сравнению с известными штаммами разлагать нефть различного состава. При содержании в 1 л среды 4 г нефти в условиях аэрации после 24 ч вьфащивания штамм разлагает 81,1% парафинистой, 40%- метано-нафтено-ароматической и 80,3% метано-нафтеновой нефти.

4

С

г

ел

(Г

NJ

Изобретение относится к микробио- огической промьгашенности и касается ового штамма бактерий, используемого ля очистки промьшшенных вод, загряз- енных нефтью.

Цель изобретения - шгамм бактерий lavobacterium tirrenicum ВКПМ В-3369 пособный более активно разлагать ефть различного состава.

Штамм Flavobacterium tirrenicum 63 выделен из накопительной культу- ы при исследовании проб воды Каспийс ого моря с rny6jHHb l 50 м на мине- апьной среде Вороптловой-Диановой с -3% NaCl.. Хранится на,рыбопептонном агаре РПА) при +8 С с обязательными пере- евами один раз в 3-4 мес. Физиологи- ескую активность и способность ути- изировать нефть сохраняет в течение рех лет.

Штамм F.tirrenioum 63 депонирован сесоюзной коллекцией промыгопенных гакроорганизмов под номером ВКПМ -3369 и имеет следующую характеристику,у

Культурапьно-морфологические признаки. Клетки имеют разную форму: от коккобацшш до тонких палочек разме- ром 1,46-2,19)0,73 мкм, одиночные или соединены в группы. Палочки подвижные (перитрихи) , грамот ридательные, бес- споровые .

Колонии на МПА и РПА идентичны: круглые, диаметром 1-2 мм, ярко- красного цвета, вьтуклые, гладкие,; блестящие. Консистенция колоний пастообразная, край колонии ровный. Оттенок колонии зависит от температуры к используемой для роста среды. Боле интенсивная окраска при вьфащивании штамма - на картофеле и на средах, содержащих молоко.

На МПБ помутнение среды, осадок розового цвета, заметно образование пристеночного кольца.

Физиолого-биохимические признаки. Отношение к источникам углерода: использует глюкозу, лактозу, сахарозу, мальтозу. При сбраживании этих углеводов кислота и газ не обнаружены.

Ассимилирует сырые нефти, керосин вазелиновое, соляровое, парафиновое масла.

Отношение к источникам азота: рас тет на средах с аммонийным и нитратным азотом. Нитраты до нитритов не. восстанавливает.

Желатину не разжижает. Сероводоро и индол не образует. Молоко не свертывает и не пептонизирует. Крахмал, казеин, хитин, агар не гидролизует. Каталазной и оксидазной активностью не обладает.

Аэроб. Предпочитает расти на сред с добавлением 1-3% NaCi.

Растет при температуре от 18 до 30 С, оптимальный диапазон от 25 до 28°С.

Рост при рН от 6,5 до 8; опти мум - от 6 до 7.

При содержании в 1 л среды 4 г нефти в условиях азрации после 24 ч выращивания штамм усваивает 81,1% парафинистой, 40% метано-нафтено- ароматической и 80,3% метано-нафте- новой нефти.

Пример 1. Разрушение нефти в стационарных условиях.

Суточную культуру штамма смывают с косяка РПА и переносят в посевную среду следующего состава, г/л:

и

1

1

1

0,2

0,02

2 капли насыщ.

р-ра

1 л

Q

5

5

5

Исходный рН 7,0.

Среду разливают в колбы объемом 500 мл по 200 мл среды, стерилизуют при 1 атм в течение 30 мин. В колбы вносят нефть из расчета 4 г/л. Состав нефти,%: ароматические углеводороды 9; нафтеновые углеводороды 22i . метановые углеводороды 69i твердые парафины 20,5i смолы и асфальтены 1,9. Нефть стерилизуют текучим паром 30 мин.

Культивирование осуществляют при комнатной температуре (21 С). Полное разрушение нефти происходит на 10 сут. Скорость разрушения определяется дефицитом кислорода в среде.

Пример 2. Разруше ше нефти в условиях аэрации. Состав среды, нефти и условия выращивания такие же, как в примере 1, за исключением того, что штамм выращивают на качалке (180 об/мин). Через 24 ч происходит исчез1;овение пленки нефти, наблюдается обильное помутнение среды. С помощью метода гравиметрии показано, что убыль нефти составляет 81,12%, а через 10 сут - 100%.

Пример 3. Состав среды и условия культивирования, как в примере 2, за исключением того, что используют нефть, где метановые, нафтеновые и ароматические углеводороды содержатся примерно в одинаковом соотношении. Через 24 ч убыль нефти составляет 80,36%, а через 7 суток - 100%.

Пример 4. Состав среды и условия культивирования, как в приме- ре 2, аа исключением того, что нефть имеет следующий состав,%-: ароматические углеводороды 1-3,86; нафтеновые

14095944

30; твердые парафины 30 смолы и ас- фальтены 13,26. Через 24 ч культивирования штамма убьть нефти составляет 40%.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что с помощью штамма F. tirrenicum ВКПМ В-3369 может быть достигнуто интенсивное окисление нефтей разного состава.

10

Формула изобретения

Штамм бактерий Flavobacterium tirrenicum ВКПМ В-3369, используемый для Зчистки подсланевых и промьшшен- ных сточных вод от нефти и нефтепродуктов .