Штамм бактерий VIвRIо NaG серовара 081, используемый для приготовления моноварной диагностической сыворотки Советский патент 1991 года по МПК C12N1/20 A61K39/106 A61K39/395 

(Л

С

Изобретение относится к области медицинской микробиологии, а именно к серологической идентификации патогенных вибрионов. Целью изобретения является штамм VIBRIO NAG 081 серовара, пригодный для получения моноварной диагностической сыворотки. Штамм VIBRIO NAG 081 серовара депонирован в музее живых культур Всесоюзного научно-исследовательского противочумного института "Микроб" под номером КМ-51(4017). Штамм КМ-51(4017) обладает всеми морфологическими, культуральными и физиологическими свойствами, характерными для рода VIBRIO. Штамм VIBRIO NAG КМ-51(4017) 081 серовара позволит получать высокоактивную и специфическую сыворотку. Данная сыворотка позволяет высокоспецифично дифференцировать патогенные для человека вибрионы.

Изобретение относится к области медицинской микробиологии, а именно к серологической идентификации патогенных вибрионов.

Целью изобретения является штамм Vibrio Nag 081 серовара, пригодный для получения моноварной диагностической сыворотки.

Штамм Vibrio Nag 081 серовара депонирован в музее живых культур Всесоюзного научно-исследовательского противочумного института Микроб под номером КМ-51 (4017).

Штамм Vibrio Nag КМ-51 (4017) обладает всеми свойствами, характерными для рода Вибрио.

Морфологические признаки. На плотном агаре образует гладкие круглые с ровным краем прозрачные колонии диаметром 2-2,5 мм. В жидких средах вызывает равномерное помутнение и образует на поверхности пленку.

Физиологические свойства. Оксидазо- положительный, ферментирует глюкозу и маннитдо кислоты без газа, не ферментирует салицин и инозит, продуцирует сероводород, обладает диастазной активностью, декарбоксилирует лизин и орнитин, не ди- гидрирует аргинин, не фосфоресцирует, не растет в 1 % пептонной воде с добавлением 7 и 10% хлорида натрия. Не агглютинируется холерными диагностическими сыворотками О, Огава, Инаба, РО. Не лизируется холерными фагами С, эльтор, ХДФ 3, 4, 5, ТЭПВ 1-3, 5-7. Лизируется фагом ТЭПВ 4 в

разведении .

Обладает специфическим 0-антигеном. При иммунизации животных 0-антигеном данного штамма происходит образование специфических антител.

О ON 00 СО 00

о

Пример 1. Для приготовления монс- арной диагностической сыворотки 081 се- ровара используют 0-антигвн штамма Vibrio Nag KM-51 (4017). Культуру штамма высевагог в 1 %-ную пептоннуго воду, рН 7,6 и вырашивают при 37°С в течение 4 ч, затем пересевают на свежескошенный агар, содержащий настой сердечной мышцы, рН 7,6.

Посевы инкубируют при 37 С в течение 18-20 ч. С поверхности агара культуру смывают физиологическим раствором рН 7,2. Полученную микробную взвесь кипятят при 100°С в течение 2-ч с момента закипания в 10%-ном физиологическом растворе хло- рида натрия. Затем взвесь дважды отмывают физиологическим раствором рН 7,2 путем центрифугирования. После контроля на специфическую стерильность мифе- бнуга взвесь используют для иммунизации животных.

Пример 2. Кроликов породы шиншилла весом 2-2,5 кг иммунизируют трехкратно с трехдневными интервалами: первую и вторую инъекции делают подкож- но по 20 млрд. м.т., третью - внутривенно по 5 млрд м.т. На седьмые сутки после последней инъекции кроликов обескровливают. Сыворотку консервируют путем добавления мертиолата натрия 1:10000. Титры

сыворотки составляют 1:1600. За диагностический титр принято разведение 1:400.

Сыворотку применяют в реакции агглютинации с вибрионами, выделяемыми от больных острыми кишечными заболеваниями людей. Реакцию агглютинации ставят объемным методом в пробирках. Сыворотку используют в одном разведении - диагностическом титре. Для разведения сыворотки и приготовления взвесей культур используют физиологический раствор рН 7,2. Положительной считают реакцию с оценкой 2-4 +.

Сыворотка против вибрионов нового 081 серовара строго специфична и высокоактивна. Положительная реакция отмечается только с вибрионами 081 серовара.

Таким образом, получение моновар- ной диагностической 0-агглютинирующей сыворотки против вибрионов 081серовара улучшит возможности бактериологического диагноза диарейных заболеваний, вызываемых энтеропатогенными вибрионами.

Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я Штамм бактерий Vibrio Nag KM-51 (4017) серовара 081, используемый для приготовления моноварной диагностической сыворотки.