ТРИС-(2-ГИДРОКСИЭТИЛ)АММОНИЕВАЯ СОЛЬ ПАРАХЛОРФЕНИЛСУЛЬФОНИЛУКСУСНОЙ КИСЛОТЫ, ОБЛАДАЮЩАЯ ГИПОХОЛЕСТЕРИНЕМИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ Советский патент 1996 года по МПК C07C317/46 A61K31/10 

Изобретение относится к новому химическому соединению, а именно трис- ( 2-гидроксиэтил ) аммониевой соли парахлорфенилсульфонилуксусной кислоты формулы 1
которая обладает гипохолестеринемическим действием.

Указанное свойство предполагает возможность его применения для профилактики и лечения атеросклероза.

Целью изобретения является выявление новых химических соединений в ряду производных трио-(2-гидроксиалкил) аммониевых солей арилтиоуксусных кислот, обладающих гипохолестеринемическим действием.

П р и м е р 1. Синтез трио-(2-гидроксиэтил) аммониевой соли парахлорфенилсульфонилуксусной кислоты.

23,4 г (0,1 моля) парахлорфенилсульфонилуксусной кислоты растворяют в 60 мл абсолютного этилового спирта и приливают 14,98 г (0,1 моль) триэтаноламина в 10 мл спирта. Нагревают до кипения раствора (75^oС) и выдерживают 15 мин. Охлаждают до -5^oС, выпавший осадок отфильтровывают, промывают эфиром, сушат. Получают 34,5г (90%) соли, т.пл. 92-93^oС.

Найдено, СI 9,20; N 3,62; S 8,34.

Вычислено, С1 9,23; Н 3,65; S 8,35.

П р и м е р 2. Изучение гипохолестеринемического действия трис-(2-гидpоксиэтил) аммониевой соли парахлорфенилсульфонилуксусной кислоты.

Эксперименты проводят на белых беспородных крысах. Экспериментальную гиперлипидемию у крыс создают путем однократного введения внутрибрюшного неионного детергента твина-80 из расчета 200 мг массы на 100 г массы тела в 1 мл дистиллированной воды ("твиновая" модель по Э.Д.Поляковой и Т.А.Климовой, 1973). Животных забивают через 1 сут после инъекции твина-80. В крови определяют содержание общего холестерина по Ильку.

Трис-( 2-гидроксиэтил ) аммониевую соль парахлорфенилсульфонилуксусной кислоты вводят внутрибрюшинно через 5 мин после введения твина-80.

Изучение гипохолестеринемического действия трис-( 2-гидроксиэтил) аммониевой соли парахлорфенилсульфонилуксусной кислоты проводят в дозах 25 и 50 мг/кг. Эффективность действия соединения 1 сравнивают с официальным противосклеротическим препаратом клофибратом, эффективным в дозах 50 и 100 мг/кг. Результаты опытов подвергают статистической обработке с определением среднеквадратичных ошибок и достоверности различий сравниваемых показателей при Р 0,05.

Влияние трис-(2-гидроксиэтил) аммониевой соли парахлорфенилсульфонилуксусной кислоты (п-Сl ФСУ. ТЭА) на содержание холестерина в крови крыс с "твиновой" моделью гиперлипидемии приведено в табл. 1. Эти данные свидетельствуют о том, что исследованное соединение в опытах на крысах вызывает снижение уровня холестерина в крови опытных животных на 49,6-53,5% в дозе 25 мг/кг и на 63,3% в дозе 50 мг/кг по отношению к контролю. Причем применение клофибрата и предлагаемого соединения в равных дозах (50 мг/кг) показывает, что триc-(2-гидроксиэтил) аммониевая соль парахлорфенилсульфонилуксусной кислоты понижает уровень холестерина в крови на 63% по сравнению с контролем, в то время как в случае клофибрата эта величина составляет лишь 24,6-30%
Близкого к действию предлагаемого соединения в дозе 50 мг/кг снижения уровня холестерина в крови (79% ) удается достичь, увеличивая дозировку клофибрата до 100 мг/кг, но при этом наблюдается резкое ухудшение состояния животных и их быстрая полная гибель
Соединение 1 проявляет достаточно высокую эффективность снижения уровня холестерина также в дозе 25 мг/кг, что ниже в два раза эффективной дозы клофибрата.

Наконец, применение соединения 1 в дозе 25 мг/кг при однократном введении приводит к уменьшению уровня холестерина в крови на 53,5% по сравнению с контролем и, что особенно важно, при этом содержание холестерина в крови снижается до величины, близкой к физиологической норме его для животных (см. табл. интактные животные)
В применяемых дозах соединение 1 не оказывает токсического действия на организм животных. Приведенные данные свидетельствуют, что соединение 1 в меньшей дозе проявляет гипохолестеринемическое действие выраженное ярче, чем у клофибрата.

П р и м е р 3. Изучение острой токсичности трио-(2-гидроксиэтил)-аммониевой соли парахлорфенилсульфонилуксусной кислоты.

Определение острой токсичности осуществлялось на беспородных белых мышах массой 18-20 г при введении препарата через рот, внутрибрюшинно, а также через кожные покровы и слизистые оболочки. Для оценки токсичности подбирались различные дозы препарата, каждая из которых вводилась не менее, чем 6 животным. Расчет проводили по методу Першина. При введении исследуемого соединения в желудок мышей через рот даже в дозе 8000 мг/кг (т.е. в пределах растворимости вещества) гибели животных в течение 14 сут не наблюдалось.

При внутрибрюшинном введении LD₅₀ 6000 + 108 мг/кг.

При внутривенном введении LD₅₀ 2260 + 108 мг/кг. Микроскопическое исследование животных после внутривенного введения триc-(2-гидроксиэтил) аммониевой соли парахлорфенилсульфонилуксусной кислоты показало полнокровие печени, селезенки и головного мозга, а также не показало увеличения щитовидной железы.

При воздействии исследуемого соединения в дозе 1000 мг в 1 мл воды на слизистую оболочку глаза белых мышей и морских свинок изменений конъюктивы в течение 14 дней не обнаружено.

При действии предлагаемого соединения на кожные покровы в виде аппликаций изменений не наблюдалось.

Отсутствие симптомов отравления и кожно-некротического эффекта свидетельствует об отсутствии кожно-резорбтивного действия для морских свинок и белых мышей.

Таким образом, сопоставление показателей острой токсичности трис-(2-гидроксиэтил) аммониевой соли парахлорфенилсульфонилуксусной кислоты позволяет сделать вывод о том, что данное соединение по степени токсичности относится к веществам 5 класса (практически нетоксичным)
П р и м е р 4. Изучение хронической токсичности трис-(2-гидрокси-этил) аммониевой соли парахлорфенилсульфонилуксусной кислоты.

Изучение токсичности нового соединения в хроническом опыте (7 дней, 3 мес.) проводят на кроликах массой 2,5-3,0 кг. Затравку животных проводят путем внутривенного введения растворенного в физиологическом растворе препарата в дозе 300 мг/кг однократно и в дозе 5 мг/кг в течение 7 дней и 3 мес. соответственно. Животным контрольных групп вводят физиологический раствор в эквиобъемных количествах. После проведения эксперимента на животных проводят исследования функции сердечно-сосудистой и дыхательной систем, щитовидной железы, липидного, белкового и углеводного обмена, морфологические исследования внутренних органов, которые продемонстрировали отсутствие существенных изменений по отношению к контролю.

Полученные результаты показывают, что трис-(2-гидроксиэтил) аммониевая соль парахлорфенилсульфонилуксусной кислоты не оказывает токсического действия на функции сердечно-сосудистой и дыхательной систем, не приводит к развитию патологических сдвигов и белковом и углеводном обмене, не вызывает патоморфологических сдвигов в большинстве внутренних органов. Введение соединения 1 в терапевтической дозе (5 мг/кг) в течение 7 дней не оказывает существенного влияния на функцию щитовидной железы кроликов, в дозе 300 мг/кг приводит к некоторому снижению функции щитовидной железы. Семидневное введение препарата в дозе 5 мг/кг не вызывает сдвигов показателей липидного обмена, но при введении его в дозе 300 мг/кг однократно наблюдается увеличение фракции свободных жирных кислот (более, чем в 2 раза) и фосфолипидов, уменьшение содержания холестерина и его эфиров что может свидетельствовать о гипохолестеринемическом действии Влияние п-Сl ФСУ.ТЭА на соотношение фракций липидов в крови подопытных животных (% М+м) приведено в табл. 2.

Аналогичным образом установлено, что затравка животных соединением 1 ежедневно с пищей в дозе 5 мг/кг в течение 3 мес, не оказывает токсического действия на функции всех изученных систем, существенных изменений в обмене липидов у кроликов под влиянием этой дозы не наблюдается, что свидетельствует об отсутствии угнетения функции печени. Влияние трис-(2- -гидроксиэтил) аммониевой соли парахлорфенилсульфонилуксусной кислоты на соотношение фракций липидов в сыворотке крови кроликов (% М+м) приведено в табл. 3.

Анализируя все данные, можно заключить, что действие соединения 1 тем эффективнее, чем выше содержание холестерина в крови. Введение препарата в дозе 5 мг/кг в течение 7 дней и 3 мес практически не уменьшает концентрацию холестерина при ее содержании равной физиологической норме. Доза 300 мг/кг незначительно снижает содержание холестерина в крови Эта закономерность говорит об адаптационном действии соединения 1 на обмен липидов. Гиполипидемическая активность нового соединения, по-видимому, обусловлена торможением синтеза холестерина в организме
Таким образом показано, что на основе доступных исходных соединений синтетическим путем с высоким выходом получено биологически активное соединение трис-(2-гидроксиэтил)аммониевая соль парахлорфенилсульфонилуксусной кислоты практически нетоксичное для теплокровных животных, водорастворимое, обладающее ярко выраженным гипохолестеринемическим действием. Учитывая его доступность, можно считать соединение 1 перспективным для создания лекарственного средства.

Изобретение касается сероорганических веществ, в частности трис-(2-гидроксиэтил) аммониевой соли п-хлорфенилсульфонилуксусной кислоты, обладающей гипохолестеринемическим действием, что может быть использовано для профилактики и лечения атеросклероза. Цель - создание нового вещества указанного класса с нехарактерной для него активностью. Его синтез ведут из п-хлорфенилсульфонилуксусной кислоты и триэтаноламина в среде этанола при кипении. Выход 90%, т. пл. 92-93^oС брутто-ф-ла С₁₄Н₂₂СlNO₇S Активность выше, чем у клофибрата, токсичность LD₅₀ = 6000 ±108 мг/кг (внутрибрюшинно), активная доза 25 мг/кг приводит к снижению холестерина в крови на 53,5% в сравнении с контролем. 3 табл.

Трис-(2-гидроксиэтил) аммониевая соль парахлорфенилсульфонилуксусной кислоты формулы

обладающая гипохолестеринемическим действием.