Способ получения галоидводородных солей адриамицина Советский патент 1988 года по МПК C07H15/252 

(21)Д020680/23-04

(86) РСТ/ни 84/00037 (14.06.84)

(22)12.02.86

(46) 30.09.88. Сюл. 36

(71)Биогап ЦьЙдьсердьяр (HU)

(72)Янош Балинт, Саболч Борбели, Жужанна Эмри, Йожеф Фазекаш

и Дьёрдь Тот (ни)

(53) 547.455.07 (088.8)

(56)Патент ФРГ № 191787Aj

кл. С 07 Н 15/24, опублик. 1969.

Европейский патент 039060, кл. С 07 Н 15/24, опублик. 1981.

(5А) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГАЛОИДВОДОРОД- НЫХ СОЛЕЙ А.ДРИАМИЦИНА

(57)Изобретение относится к получению галоидводородных солей адриамйцина (AM) , которые используются для ле-; чения опухолевых заболеваний. Цель изобретения - увеличение выхода AM. Получение его ведут обработкой гидрохлорида дауномицина бромом при 6-10 С в течение 4,5-6 ч в среде безводного органического растворителя в присутствии эфира органической кислотьЛ В качестве эфира, способствукячего образованию кеталя, испольэуют тризтил- ортоформиат, метилформиат, зтилаце- тат, триэтилортоацетат. Образуняцееся 14-бромпроизводное подвергают взаимодействию с НВг в присутствии формиатв щелочного металла (формиата натрия) с последующей экстракцией реакционной смеси в 2 стадии хлороформом при рН 7,2-8,0.

СО

СП

Иэобретеннр относится к способу получения галоидводородных солей ад- риамицина, используемых для лечения опухолевых заболеваний.

Цель изобретения - увеличение выхода целевого продукта за счет проведения бромирования гидрохлорида дауномицина бромом в присутствии эфира органической кислоты, способст- вующего образованию кеталя, выбранного из группы тризтилортоформиат, ме- тилформиат, этилацетат, тризтилорто- ацетат, при в течение 4,5-6 ч и осуществления взаимодействия обра- зующегося 14-бромпроизводного с бромистым водородом в присутствии форми- ата щеллчного. металла, например фор- миата натрия, с последующей экстракцией реакционной смеси в две стадии хлороформом при рН 7,2-8,0.

Способ осуществляют следующим образом.

Пр им е р 1. 1,4 г. (2,48 ммоль) хлористоводородного дауномицина раст- воряют в смеси 20 мл безводного метилового спирта, 56 МП безводного диок- сана и 1,4 мл (8,47 ммоль) безводного триэтилортоформиата. К полученному раствору добавляют 0,5 г (3,16 ммоль) брома, растворенного в 5,4 мл безводного хлороформа, колбу закрывают и выдерживают при 8°С в течение 5 ч.

Затем реакционную смесь выливают в смесь 280 мл дизтилового зфира и 120 мл петролейного эфира, вьтадающий в осадок продукт отфильтровывают и для очистки от примесей трижды промывают дизтиловым эфиром порциями по 30 мл..

Полученное 14-бромпроизводное имеет следующие характеристики: величина R|-0,30 (на кизельгуре 60 при использовании смеси CHjCljjiMeOHzHCOOHtU O 88:15:2:1); в этих условиях Л| ад- риамиЦина 0,10; R дауномицина 0,22; R 14-бромдауномицина 0,26; RI агликонов 0,84.

,6° (,1; МеОН).

Приготовленный из 14-бромпроизводного 14-бромдауномицин имеет оптическую активность М 198,2° (,1; МеОН).

Затем полученное 14-бромпроизвод- вое растворяют в смеси 40 мл ацетона и 40 мл 0,25 н. водного раствора бромистого водорода и вьщерживают раствор при в течение 17ч, после

Q 5 20

25 зо

5

35

40

5

0

чего добавляют к нему раствор 2,0 г (29,4 ммоль) формиата натрия в 20 мл деионизированной воды и перемешивают в течение 48 ч при 25 С.

рН реакционной смеси устанавливают равным 3,7, добавляя к ней 1 н. раствор соляной кислоты, и пять раз проводят из нее зкстракцию хлороформом порциями по 50 мл. Затец рН водной фазы устанавливают равным 7,6, добавляя к ней 5%-ный раствор бикарбоната натрия, и экстрагируют из смеси основание адриамицина. Экстракцию проводят до тех пор, пока происходит окрашивание хлороформного экстракта. Хлороформные экстракты промывают 5% деионизированной воды в расчете на объем экстрактов и высушивают над безводным сульфатом натрия. После от- фильтровывания осушителя раствор концентрируют до объема 50 мл. Свободное основание переводят в хлористоводородную соль путем обработки расчетным количеством безводного метанольного раствора хлористого водорода. Образующуюся соль осаждают 500 мл диэтило- , вого эфира. Осадок продукта отфильт- i ровывают, промывают четыре раза ди- этиловым эфиром порциями по 30 мл и высушивают в вакууме при комнатной температуре. Выход 0,61 г (42,4%) хлористоводородной соли адриамицина.

Аналитические данные полученного продукта:

Вычислено, %: С 55,9; Н 5,21, N 2,42; С1 6,11

Cj HjgNO HCl (мол.в. 580,0) Найдено,%: С 55,52; Н 5,10; N 2,04; 01 6,24 .

Т.пл. 202-206 0 (с разложением); тонкослойная хроматография: адсорбент - силикагель 60 (Merck 5724), пропитанный 1%-ным раствором щавелевой кислоты;

элюент -. верхний слой смеси н-бу- танола, уксусной кислоты и воды в соотношении 4:1:5;

проявление: 10 см, . Инфракрасный спектр: (прибор фирмы Perkin-Elmer, тип 397, КВг) Идентификация 0-Н-линия (водородная связь)

и С-Н-связь (водородная связь) кетой

-, см- 3420

2980-2920

1725

1615 и 1580 (внутриводородная связь, хинон)

1280 С-О-С (эфир) 1115 С-0 третичный спирт 1070 С-0 вторичный спирт 1010 С-0 первичный спирт ЯМР: (импульсный прибор WP 200 YET фирмы Bruker; 1-ЯМР, .ЦМСО-6, омнатная температура, дельта м.д., 50 МГц)

Идентификация ЗН , д, СН5-5 2Н, м, СН2-2 2Н, м, СН5-9 2Н, АВ, 1Н, м, Н-4 ЗН, с, OCHj 1Н, м, Н-5 2Н, АВ, CH2-U 1Н, м, Н-10 Ш, м, Н-1 1Н, м, Н-3 5Н, м, Н-4, Н-4

Дельта (м.д.)

1,17

1,6/1,9

2,15

2,9/3,00

3,7

4,0 .

4 2

4158/4,61

5,3

7,65

7,9

СН2-7

13,25 14,05

Н-2 NH

1Н, бс, ОН-6

1Н, с, ОН-11

С-ЯМР (50,3 МГц DtO, 310°К) Дельта (м.д.) Углерйд 13

(12), (5) 1

11 6

217,1 188,1 10 163,0 158,2 156,6 139,2 13,4

15 122,0 121.3 113,1 101,5 78,5 20 71,1 69,8 68,9 67,1 59,1 25 49,6 37,9 34,8

30 Изменяемые значения.

П р и м е р 2. 1,4 г (2,48ммоль) лористоводородной соли дауномицина астворяют в смеси 40 мл безводного етилового спирта и 0,55 мл (8,7 ммоль) езводного метилформиата. К полученому раствору добавляют 0,5 г 3,16 ммоль) брома, растворенного 5,4 мл безводного хлороформа, колJ

(10а), С4а), (6а)

(4), (2) .

(12а)

(5а), (На)

1

8

10

(4)

(5)

14

OCHj

З

9

7

0

бу закрывают и вьщерживают в течение 4,5 ч при .

Затем реакционную смесь выливают в смесь 280 мл дизтилового эфира и 120 мл петролейного эфира, выпадающий в осадок продукт отфильтровывают и трижды отмывают от примесей диэти- ловым эфиром порциями по 30 мл. Полу Q ченный продукт растворяют в смеси

40 мл ацетона и 40 мл 0,25 и. водного раствора бромистого водорода и выдерживают полученный раствор при в течение 17 ч. Затем к нему добавля15 ют раствор г (29,4 ммоль) формиа- та натрия в 20 мл деионизированной воды и перемешивают в течение 48 ч при 25°С.

Далее полученную реакционную смесь обрабатывают как в примере 1.

Вькод: 0,55 г (38,6%). Полученный продукт имеет те же характеристики, что и продукт, полученный по примеРУ 1 .

25 Пример 3. 0,70 г (1,24 ммоль) хлористоводородной цоли дауномцдина растворяют в смеси 10 мл безводного метилового спирта, 30 мл безводного диоксана и 0,42 мл (4,30 ммоль) этилацетата. К полученному раствору добавляют 0,25 г (1,58 ммоль) брома, растворенного в 2,7 мл безводного хлороформа, колбу закрывают и выдерживают в течение 6 ч при .

Затем реакционную смесь выливают в смесь 140 мл диэтилового эфира и 60 мл петролейного эфира, выпадающий в осадок -продукт отфильтровывают и очищают от примесей, трижды промывая диэтиловым эфиром порциями .по 15 мл. Полученный продукт растворяют в смеси 20 мл ацетона и 20 мл 0,25 н. водного раствора бромистого водорода

и вьщерживают раствор при в течение 17 ч. После этого к нему добавляют раствор 1,0 г (14,7 ммоль).фор- миата натрия, растворенного в 10 мл деионизированной воды, и перемешивают реакционную смесь в течение 48 ч при 25 с.

рН реакционной смеси устанавливают равным 3,7, добавляя к ней 1 н. раствор соляной кислоты, и пять раэ проводят из нее экстракцию хлорофор- 5 мом. Затем рН водного слоя устанавливают равным 7,6 путем добавления к нему 5%-ного раствора бикарбоната натрия и выделяют адриамицин в виде основания путем экстракции. Зкстрак-

0

5

0

5

Ь

цию продолжают до тех пор, пока хлороформный эк(тракт не перестанет окрашиваться. Хлороформные экстракты промьшают 5% деионизированной воды в расчете на объем экстрактов, высушивают над безводным сульфатом натри и после отфильтровывания осушителя концентрируют в вакууме до объема .25 мл. Свободное основание переводят в хлористоводородную соль путем обработки его расчетным количеством 0,6 н. безводного метанольного раствора хлористого водорода, после чего образующуюся соль осаждают 250 мл диэтилового эфира. Выпадающий в осадок продукт отфильтровывают, четыре раза промывают диэтиловым эфиром порциями по 15 мл и высушивают в вакуум при комнатной температуре.

Выход: 0,29 г (40,3%), Полученный продукт имеет те же характеристики, что и продукт, полученный по приме- РУ 1 .

П р им е р 4, 0,70 г (1,24 ммоль) 25 равным 3,7 с помощью добавления 1 н.

хлористоводородной соли дауномицина растворяют в смеси 10 мл безводного метилового спирта, 30 мл диоксана и 0,8 мл (4,35 ммоль) триэтилортоаце- тата. К полученной смеси добавляют 0,25 г (1,58 ммоль) брома, растворенного -в 2,7 мл безводного хлороформа, колбу закрывают и вьщерживают при в течение 6 ч.

Затем реакционную смесь выливают в смесь 140 мл диэтилового эфира и 60 мл петролейного эфира, выпадающий в осадок продукт отфильтровывают и удаляют примеси, трижды промывая его диэтиловым эфиром порциями по 15 мл. Полученный продукт растворяют в смес 20 мл ацетона и 20 мл 0,25 н, водного раствора бромистого водорода и выдерживают раствор при 25°С в течение 17 ч. Затем к нему добавляют раствор 1,0 г (14,7 ммоль) формиата натрия в 10 мл деиоИизированной воды и перемешивают при 25°С в течение 48 ч, - .

Дальнейшую обработку полученной

реакционной смеси проводят, как в примере 3,

Выход: 0,30 г (41,7%), Полученный продукт имеет такие же характеристиПримере, Растворяют 0,7 г (1,24 ммоль) соляно-кислого дауном цина в смеси 10 МП безводного мети вого спирта, 30 мл безводного диок сана и 0,7 мл (4,23 ммоль) безводн триэтилформиата, К полученному рас вору прибавляют 0,25 г (1,58 ммоль

ки, как и продукт, полученный по при- 55 брома, растворенного в 2,7 мл без- меру 1,

Пример 5, Растворяют 1,13 г (2,0 ммоль) солянокислого дауномицина

водного хлороформа, колбу закрываю и выдерживают, 6 ч при 7 с,,

Реакционную смесь выливают в см 140 мл диэтилового эфира и 60 мл

в смеси 16 мл безводного метилового

10

282076

спирта, 45 мл безводного диоксана и 1,1 мл (7,0 ммоль) безводного три- этилортоформиата, К полученному раствору прибавляют 0,3516 г (2,2 ммоль) брома, растворенного в 50 мл безводного хлороформа, колбу закрывают и реакционную смесь перемешивают 4,5 ч при 7-9 С.

Реакционную смесь вьшивают в смесь 220 мл диэтилового эфира и 100 мл петролейного эфира, отфильтровывают . выпавший в осадок продукт, промывают трижды 25 мл диэтилового эфира для 15 удаления примесей. Затем его растворяют в смеси 32 мл ацетона и 32 мл 0,25 н, водного бромистого водорода и выдерживают при 28 С в течение 16 ч. После этого прибавляют раствор 1,3 г формиата натрия в 13 мл деионизированной воды к раствору и перемешивают 48 ч при 26-28 С,

После разбавления 115 мл воды устанавливают рН реакционной смеси -20

0

35

раствора .соляной кислоты и экстрагируют несколькими порциями хлороформа. Затем устанавливают рН водной фазы равным 8,0 путем добавления 5%-ного раствора бикарбоната натрия и проводят экстракцию до тех пор, пока хлороформный экстракт не будет окрашен. Хлороформные экстракты промывают 5% деионизированной водой, считая на объем экстрактов, и сушат над безводным сульфатом натрия. После фильтрования высушивающего агента раствор концентрируют до объема 20 мл. Свободное основание переводят в его со- ляно-кислую.соль путем обработки рассчитанным количеством 0,5 н. раствора безводной соляной кислоты в этаноле. Выпавший в осадок продукт отфильтровывают, промывают диэтиловым эфиром и сушат. Выход: 0,48 г 5 (41,9%),

Аналитические данные продукта идентичны приведенным в примере 1.

Примере, Растворяют 0,7 г (1,24 ммоль) соляно-кислого дауномицина в смеси 10 МП безводного метилового спирта, 30 мл безводного диоксана и 0,7 мл (4,23 ммоль) безводногр триэтилформиата, К полученному раствору прибавляют 0,25 г (1,58 ммоль)

0

0

55 брома, растворенного в 2,7 мл без-

брома, растворенного в 2,7 мл без-

водного хлороформа, колбу закрывают и выдерживают, 6 ч при 7 с,,

Реакционную смесь выливают в смесь 140 мл диэтилового эфира и 60 мл

петролейного эфира, выпавший в осадок продукт отфильтровывают, промывают трижды 15 мл диэтилового эфира для удаления примесей. Затем растворяют его в смеси 20 мл ацетона и 20 мл 0,24 н. водного бромистого водорода и выдерживают 20 ч при ,

Устанавливают рН реакционной сме- си равным 3.7 путем добавления 1 н. раствора соляной кислоты и экстрагируют несколькими порциями хлороформа. Затем устанавливают рН водной фазы равным 7,2 путем добавления 5%-ного раствора бикарбоната натрия и осуществляют экстракцию до тех пор, пока хлороформный экстракт не будет окрашен. Хлороформные экстракты промывают водой и сушат над безводным сульфатом натрия. После фильтрации осушивающего агента раствор концентрируют до объема 20-25 мл. Свободное основание превращают в его соляно-кислую соль путем обработки рассчитанным количест- вом 0,5 н. раствора безводно соляной кислоты в этаноле. Отфильтровывают выпавший в осадок продукт, промывают диэтиловым эфиром и сушат. Выход 0,28 г (39,5%).

Аналитические данные продукта идентичны приведенным в примере 1.

Формула изоб, ретений

Способ получения г поидводородных солей адриамицина путем обработки гидрохлорида дауномицина бромом в среде безводного органического ворителя в присутствии эфира органической кислоты, способствующего образованию кеталя, гидролиза образующегося 14-бромпроизводного и ввде ления целевого продукта известными приемами, отличающий ся тем, что, с целью увеличения выхода. целевого продукта, обработку бромом проводят при в течение 4,5- 6 ч, в качестве эфира органической . кислоты, способствзпощего образованию кеталя, используют триэтилортоформи- ат, метилформиат, этилацетат, три- этилортоацетат, образующееся 14-бромпроизводное подвергают взаимодействию с бромистым водородом в присутствии формиаГа щелочного металла, например формиата натрия, Q последующей экстракцией реакционной смеси в 2 стадии хлороформом при рН 7,2-8,0.