Изобретение отиосится к области получения антибиотика адриамицина, обладающего цен1 ыми свойствами.
Известен микробиологический способ нолучения адриамицина с помощью микроорганизма Streptomyces peucetius var caesius.
Предлагаемый химический способ иолучения адриамицииа формулы
О ОН
СНеОН
Ш% о он о
где R имеет формулу
NX ОН I I
-СИ-СИг-СН-СН-СИ-СНз, О
где R имеет формулу
NHa ОН I I -СН-СИа-СИ-СН-СИ-СНз,
ОН
/
Xили
св-С
XOCF,
подвергают взаимодействию с йодом или бромом в среде инертного органического растворителя и на иолученное соответствующее 14-галогенпроизводное действуют ацетатом
щелочного металла в среде полярного органического растворителя с последующим щелочным гидролизом полученного 14-ацетокснпроизводного, отщеплением защитной группы и выделением целевого продукта известными приемами.
В случае галогенирования дуаномицина йодом желательно, чтобы реакция протекала в основной среде, например в присутствии окиси кальция. Указанная реакция идет преимущественно при комнатной температуре, по ее можно проводить и при нагревапии, лучше в среде инертного газа.
Найдено, что аминогруппу аминосахара дауномицина целесообразнее защищать соответствующей защитной группой, особенно когда в качестве галогепирующего агента выступает йод. С этой целью можно использовать одпу из известных групп, способных защищать аминогруппу, например ацилпроизводное либо основание Шиффа. Можно также защитить эту грунпу образовапием соединения трифторацетилпроизводного либо соответствующего основания Шиффа с салициловым альдегидом.
Трифторацетил производное даупомицииа получают известным снособом взаимодействием дауномицина в виде свободного основания с трифторуксусным ангидридом в присутствии органического растворителя, а основание Шиф|фа - взаимодействием хлоргидрата дауномицина с салициловым альдегидом.
При реакции галогенирования с бромом или йодом получают соответственно 14-бром- или йодпроизводное, которое взаимодействует с ацетатом щелочного металла, например ацетатом калия, в присутствии полярного растворителя такого, как ацетон. Реакция нротекает при нагревании в течение короткого промежутка времени либо на холоду, что удлиняет ее продолжительность. В результате образуется 14-ацетоксипроизводное дауномицина, которое после гидролиза в щелочной среде превращается в соответствующее 14-оксиироизводное.
В случае использования 14-бромпроизводного соответствующее 14-оксипроизводпое можно получить при неносредственном воздействии щелочи на это 14-бромпроизводное.
Когда берут дауномицин с аминогруппой аминосахара, защищенной соответствующей защитной группой, перед тем как отделить конечный продукт, эту защитную группу удаляют уже известпым способом.
Удалепие салицилиденовой группы происходит в результате гидролиза N-салицилиденадриамицина в кислой среде, а трифторацетильной группы - после обработки N-трифторацетиладриамицина этиловым о-муравьиным эфиром и п-толуолсульфокислотой для получения Ы-трифторацетиладриамицин-9,14этил-о-муравьиного эфира, из которого затем трифторацетильную группу удаляют гидролизом в щелочной среде.
муравьиного эфира в кислой среде получают свободный адриамицин.
Пример 1. 1,3 г хлоргидрата дауномицина в 30 мл метилового снирта и 100 мл безводного диэтилового эфира обрабатывают 3,3 мл раствора 10 г брома в 100 мл хлороформа. Получепную реакционную смесь выдерживают 4 час нри комнатной температуре, упаривают досуха при пониженном давлении,
полученный осадок растворяют в 5-10 мл хлороформа и добавляют к этому раствору трех-нятикратный объем этилового эфира. Хлоргидрат бромдауномицина выпадает в виде осадка с выходом 1,1 г. После перекристаллизации из смеси растворителей хлороформ-метанол он имеет т. пл. 177-178°С. Раствор 1 г хлоргидрата 14-бромдауномицина в 150 мл метилового спирта обрабатывают 70 мл дистиллированной воды, добавляют к этому раствору 0,1 и. раствор гидрата окиси натрия доводят рП до 10,3, и выдерживают его при таком рН 20 мин. Все процессы ведут в среде азота. Затем после разбавления нолученного раствора дистиллированиой водой его многократно экстрагируют хлороформом до тех пор, пока все окрашивающие вещества не будут извлечены растворителем. Объединенные хлороформные экстракты высушивают над безводным сульфатом натрия, упаривают при пониженном давлении до небольшого объема, смешивают с 1,8 мл 0,6 н. раствора соляной кислоты в безводном метаноле и обрабатывают десятикратным объемом этилового эфира.
Получают 0,72 г аморфного осадка, который выкристаллизовывается из смеси метанол - пропанол. При этом выход хлоргидрата адриамицина 0,45 гит. пл. 205-210°С
(с разл.).
Пример 2. Полученную по примеру 1 суспепзию 6,6 г хлоргидрата 14-бромдауномицина в 200 мл безводного ацетона смешивают с 1,8 г нлавленого и топкоизмельченного ацетата калия, фильтруют после нагревания ее с обратным холодильником в течение 45 мин и полученный раствор досуха упаривают при пониженном давлении. Осадок, растворенный в хлороформе, обрабатывают этиловым эфиром и очищают 0,45 г осадка фильтрацией его через колонку, наполненную салициловой кислотой (система растворителя включает хлористый метилен - метанол - воду, взятых в соотношении 120:20:2). В результате получают 150 мг 14-ацетоксидауномицина с т. пл. 196-198°С.
Раствор 0,1 г 14-ацетоксидауномицина в 30 мл смеси ацетон - метанол (2:1) смещивают с 10 мл 5%-ного раствора бикарбоната
натрия. Смесь выдерживают 3 час при комнатной температуре и затем после разбавления ее водой экстрагируют хлороформом. чения небольшого объема при пониженном давлении. Упаренный раствор смешивают с 0,15 мл 0,6 н. раствора соляной кислоты в безводном метаноле, а затем с трехкратным объемом этилового эфира. Аморфный осадок пропускают через колонку, наполненную 40 г порошка целлюлозы. Его элюируют системой растворителей пропанол - этилацетат - вода, находяшихся в соотношении 7:1:2 (по объему). Фракции, содержащие адриамицин, объединяют и упаривают досуха. Получают 43 мг хлоргидрата адриамицина с т. пл. 204-210°С (с разл.). Пример 3. 4,6 г свободного основания 15 дауномицина в 390 мл хлороформа и 155 мл безводного эфира обрабатывают 9,3 мл трифторуксусного ангидрида. Реакционную смесь выдерживают при комнатной температуре 30 мин, экстрагируют водой и органическую 20 фазу упаривают досуха под вакуумом. Осадок растворяют в 100 мл безводного метанола и нагревают с обратным холодильником 10 мин. Раствор метанола упаривают досуха, и осадок, выкристаллизованный из смеси раствори- 25 телей тетрагидрофуран - петролейный эфир, дает выход 4,5 г N-трифторацетилдауномицина с т. пл. 169-171 °С. 0,6 г N-трифторацетилдауномицина в 30 мл тетрагидрофурана и 20 мл безводного метано- 30 ла смешивают с 0,5 г йода и 0,5 г тонкоизмельченной окиси кальция. Смесь выдерживают в среде азота при одновременном встряхивании 5 час, затем ее фильтруют и раствор, разбавленный хлороформом, взбалтывают 35 вместе с водой при подкислении соляной кислотой до изменения окраски лакмусового индикатора. Органическую фазу упаривают досуха под вакуумом, осадок растворяют в небольшом количестве хлороформа и затем 40 подвергают хроматографическому разделению при элюировании хлороформом, содержащим повышенные количества этилацетата. Целевой продукт элюируют хлороформом. в котором концентрация этилацетата состав- 45 ляет примерно 10%. Получают 0,25 г 14-йодN-трифторацетилдауномицина с т. пл. 172- 175°С. 0,8 г этого соединения в течение 15 мин нагревают с обратным холодильником вместе 50 с .60 мл безводного ацетона в присутствии 1,5 г плавленого и тонкоизмельченного ацетата калия. После фильтрации этот раствор в хлороформе взбалтывают с водой при медленном подкислении разбавленной соляной 55 кислотой (до изменения цвета лакмусового индикатора). Органическую фазу упаривают почти досуха под вакуумом и к осадку добавляют нетролейный эфир. При осаждении получают 0,62 г 14-ацетокси-М-трифторацетил- 60 дауномицина с т. ПЛ: 150-153°С. 1,4 г этого продукта, растворенного в смеси 50 мл метанола и 100 мл ацетона, смешивают со 100 мл 5%-ного водного раствора бикарбоната натрия. Полученную смесь выдержи- 65 5 10 вают 3 час при комнатной температуре и в среде азота, затем смешивают с водой, подкисляют водным раствором винной кислоты до тех пор, пока рН не станет равным 5-6, и многократно экстрагируют хлороформом при обш,ем количестве используемого растворителя 350 мл. Органические фазы объединяют и упаривают при пониженном давлении. При этом образуется 0,95 г твердого осадка, который растворяют в хлороформе и разделяют в хроматографической колонке. Полученный таким образом N-трифторацетиладриамицин элюируют хлороформом, содержащим 15% этилацетата. При объединении элюатов и последующем их упаривании получаю 0,56 г целевого продукта с т. пл. 174-176°С. 0,45 г N-трифторацетиладриамиципа в 80 мл диэтилового эфира смещивают с 10 мл этилового о-муравьиного эфира и 3 мг п-толуолсульфокислоты. После выдержки в течение 48 час при комнатной температуре реакционную смесь разбавляют хлороформом и промывают водой прп интенсивном взбалтывании в делительной воронке. Органическая фаза, упаренная до небольшого объема, образует 35 г осадка при добавлении петролейного эфира. Полученный продукт разделяют в хроматографической колонке, заполненной 7 г салициловой кислоты, при элюировании хлороформом, содержащим 10% этилацетата. При упаривании элюата образуется 80 мг 9,14-N- трифторацетиладриамицинэтилхлормуравьиного эфира с т. пл. 162-164°С. 0,2 г этого соединения растворяют в смеси 10 мл ацетона и 40 мл 0,1 н. раствора гидроокиси натрия в среде чистого азота. После выдерживания раствора в течение 20 мин при комнатной температуре добавлением 1 н. раствора соляной кислоты доводят рН до 8,6 и этот раствор многократно экстрагируют 50 мл хлороформа до тех пор, пока все красящие вещества не перейдут в растворитель. Объединенные хлороформные экстракты упаривают, пока не останется небольшой объем, и подвергают хроматографическому разделению в колонке, заполненной 4 г салициловой кислоты. Элюирование осуществляют смесью растворителей хлористый метилен - метанол - вода в соотношении 50 : 10 : 1. При упаривании элюата получают 0,11 г адриамицин-9,14-этил-о-муравьиного эфира с т. пл. 203-206°С. Раствор 0,1 г этого соединения в 9 мл ацетона смешивают с 1 мл п. раствора соляной кислоты. Этот раствор выдерл ивают при комнатной температуре 20 час. Полученный осаДОк, выкристаллизованный из системы растворителей метанол - пропанол, дает 40 мг хлоргидрата адриамицина с т. пл. 204-210°С (с разл.). Пример 4. Раствор 1 г хлоргидрата даупомицина в 30 мл дистиллированной воды смешивают с ОД н. раствором гидроокиси натрия до рН 8,6, а затем его раствор обрабатывают 10 мл 10%-ного раствора салици
