Способ дифференциальной диагностики гломерулонефрита и пиелонефрита Советский патент 1988 года по МПК G01N33/68 

Изобретение относится к медицине, в частности, к лабораторной диагностике, и может быть использовано для диагностики болезней почек. с Целью изобретения является повьппе- ние точности способа.

На фиг. 1 и 2 схематически показано расположение мочи больных соответственно гломерулонефритом и пиелонефри-Ю- том после электрофореза в,полиаксил- амидном геле.

Способ осуществляют следующим образом.

10 мг ацетонового порошка тест-мик15 роба растирают в ступке с 1 мл воды, к суспензии добавляют 1 мл реактива , 1,5 мл реактива и 4 мл реактива Ь, Смесь перемешивают и заливают в трубки аппарата для электрофореза в 20 полиакриламидном геле (ПАГ). После полимеризации на поверхность гелей наслаивают 0,15 мл свежевыпущенной отцен- трифугированной моче, на нее до края трубок наслаивают электродный буфер и25 трубки помещают в аппарат. В сосуды аппарата заливают электродный буфер, верхним электродом служит анод (Ч-), а Н1СКНИМ катод (). Разделение проводят в течение 2,5 ч в холодильнике при JQ силе тока 2 мА на трубку. После окончания электрофореза гели, не вынимая из трубок, помещают в сухие пробирки и-инкубируют в термостате 1 ч при , после чего оценивают результат по расположению зоны лизиса тест-микробов, соответствующей положению лизо- хщма в геле. При расположении полосы лизоцима в области катода диагностируют гломерулонефрит, а при располо- . жении полосы лизоидима в области анода - пиелонефрит.

Используют следунлцие реактивы.

1. Реактивы для приготовления ПАГ, рН 4,3: .45

а. Раствор 1 н. гидроксида калия 48 мл; уксусная кислота ледяная 17,2 МЛ} N,N,N ,N -тетраметилэтилен- диамин 4 МП} вода до 100 мл.

35

-

5 0 5 Q .

5

5

5. Акриламил 60 г; N,N -метилен- бисакриламид 0,4 г; вода до 100 ют.

6г Персульфат аммония 0,28 г; вода до 100 мл.

2.Электродньй буфер, рН 4,0: глицин 28,1 г, уксусная кислота ледяная 3,06 мл; вода до 1000 мл.

3.Ацетоновый порошок тест-микроба. Перед использованием все реактивы

разводят в 10 раз.

Пример 1. Расположение лизоцима мочи больных гломерулонефритом после 2,5 ч электрофорез в 12%-ном полиакриламидном геле при рН геля 4,3 и рН электродного буфера 4,0. Зона лизиса тест-микробов, соответствующая положению лизоцима в геле, указана стрелкой (фиг. 1).

Пример 2. Расположение лизоцима мочи больных пиелонефритом после 2,5 ч электрофореза в 12%-ном полиакриламидном геле при рН геля 4,3 и рН электродного буфера 4,0. Зона лизиса тест-микробов, соответствующая положению лизоцима в геле, указана стрелкой (фиг. 2).

Использование предлагаемого способа позволяет повысить точность диагностики с 60-70 (известньй способ) до 97%.,

Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики гломерулонефрита и пиелонефрита путем электрофоретического исследования , лизоцима мочи, отличающий- с я тем, что, с целью повышения точности способа, электрофорез проводят в полиакриламидном геле при значениях рН геля и электродного буфера менее 7,0 и при расположении полрсы лизоцима в области катода диагностируют гломерулонефрит, а при расположении полосы лизоцима в области анода - пиелонефрит.

7lt«.f

Pwt.2

Изобретение относится к медицине,, касается лабораторной диагностики болезней почек. Цель изобретения - роввппение точности способа.-Для этого порцию ацетонового порошка тест-м1к- роба растирают в ступке с водой, к суспензии добавляют 1 т реактива рдя приготовления полиакриламидноЬо геля (ПАТ), рН 4,3 (раствор гидроокиси калия 1 н. 48 мл, уксусная кислота ле- дяная 17,2 мл, N,N,N ,N- -TeTpaMeTRn- зтилэтилендиамин 4 мл, вода до 100 мл), 1,5 мл реактива, содержащего акриламид 60 г, N,N -мeтилe Iбиc- акриламид 0,4 г, вода до 100 мл, и добавляют 4 мл реактива, содержащего персульфат аммония 0,28 г, вода до 100 МП. СГмесь перемешивают и заливают в трубки аппарата для электрофореза в ПАГ. После полимеризации на поверхность гелей наслаивают О,15 мл свежевзятой отцентрифугированной Мочи, на нее наслаивают злектродньй буфер (рН 4,0, глицин 28,1 г, уксусная кислота ледяная 3,06 мл, вода), верхним электродом служит анод (+), а нижним - g катод (-). Разделение проводят 2,5 ч в холодильнике при силе тока 2 мА на ГЛ трубку. Затем проводят инкубацию в термостате 1 ч при З7 с. Результат оценивают по расположению зоны лизиса тест-микробов, соответствующей положе- нию лизоцима в геле. При расположении полосы лизоцима в области катода диагностируют гломерулонефрит,. а при расположении полосы лизоцима в области анода - пиелонефрит, 2 ил.