Способ получения сорбента-гидроксилапатита Советский патент 1989 года по МПК B01J20/00 

(21) 4199055/28-26 (22) 07.01.87 (46) 15.01 „89. Бюл. 2

(71)Ленинградский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови

(72)Ю.Л.Кацадзе, З.ДоФедорова, З.П.Глазкова и О„Го Головина

(53)661.183.12 (088о8)

(56) Подольский М.В. Высушивание препаратов крови и кровезаменителей. M.I Медицина, 1973, с.90-126.

Кочетов Г.А. Практическое руководство по энзимологии. М.: Медицина 1980, с.246-248о

(54)СПОСОБ ПОЛУЧКНИЯ СОРБЕНТА - ГИДРОКСШШ1АТИТА

(57) Изобретение относится к области получения сорбентов для биохимии и фармакохимии и позволяет синтезировать гидроксилапатит, обладаюцшЧ повышенным до двух лет сроком хранения при сохранности его сорбционной активности. Растворы хлорида кальция и двузамещенного фосфата натрия взаимодействуют в растворе хлорида натрия с последующим кипячением образовавшейся суспензии сначала в концентрированном растворе гидрокси- да натрия, затем в натрийфосфатном буфере. Затем суспензию замораживают в спирте до - (-36)-(-40)°С и высушивают в течение 38-40 ч до 40°С 1 3,п. ф-лы.SS

(Л

4 СЛ

О

00

Cri

РЬобретепне относится к получени сорбентов для биохимик и фармакологии,, которые могут быть использован в медицине при получении лечебных и диагностических препаратов фракци-о- нированием штазмы крови.

ГХпгроксилаиатит применяется з ка честке. сорбента дхш приготовления лечебного препарата протромбинового комплекса и антитр омбина--.

Целью изобретения является новгл- юенке сроков хранения гидроксипапати та при-сокранйнии его сорбдионной I активности.

I Н-- чертелсе представлен график температурного режима сушки,

К р и м е р 1„ в колбу, установ- JiejiHyio на аппарате для встряхивания 1ЛВУ--1), HajHiBaroT 200 мл 1М раствора I хлористого натрия, затем но каплям I постепенно добавляют в течение 4 ч I (по 250 мл/ч) 2 л 0,5 М хлористого кальдия и 2л 0,5 М двузамещенного I фосфата натрия при постоянном пере- I мешивании, чтобы суспензия бьша во ; взвеизенном состоянии Для постепенного капельного вливания растворов использ пот устройства для перелива- iuni ,, -кровезаменителей и кнфу- зионных растворов однократного применения ПК 11-05, имеющие вмонтиро- ванн--у1о капельницу. После добавления указанных растворов дают суспензии осасть и надосадо чную жидкость декантируют. Осадок промывают дваждь дистиллированной водой ПОР1У-1ЯМИ по 4 л- и калчдьв раз декантируют надосадоч- ную жидкость. Затем осадок заливают 4 л дистиллированной воды добавляют 100 мл 40%-ной щелочи (NaOH), кнпятя при легком помешивании в 1 ч, надо садочную жидкость декантир дот и осадок двалзды проьшвают дистиллированной водой (по 4 л). Затем осадок суспендируют в 2 л 10 мМ натрий-фосфатного буфера (рН 6,8) и доводят до- кипения,, После оседания осадка супернатинт декантируют и 3 раза заливают осадок 4 л того же натрийфосфатного буфера и кипятят по 15 мин, после декантирования надосадочной жидкогл н получают суспензию гидроксилапатита в натрийфосфатном буфере„

Полученную суспе нзшо разливают по

100 t-иг в стандартные флаконы для с уш- ки плазмы крови емкостью 250 мл, за4-0) С и лио

моражмвагат накатом при (

фял:-;,;о высу1 п вают в аппарате ТГ-50

(в течение 39 ч), температура в препарате доводится от (-40}°С до i-, ,(37-39) °С,

После лиофиньной сушки суспензии гидроксклапатит представляет собой бельм мелкодисперсный порошок, который при добавтгенки вода HJ-H-I физиологического раствора образует однородную суспензию При микроскопировании полученной суспензии при увеличении 9x10 видны прямоугольные прозрачные кристаллы размером от 1055x10,5 мкм до максимального размера кристаллов 35 110x25 мкмо

- П р и м е р 2е В колбу, установленную на а:7парате -для встряхрпзания., нал ивают 500 мп 1„0 М раствора jcHoppr- да натрия5 по каплям постепенно 20 добавляю- в течение 4 ч 5 л М хлорида кальция и 5 л М двузаме- шенпого фосфата натрия при постоянном перемешивании. Осуществляют де- кантандю суспензии: частички гщтро- 25 ксиланатита оседают, надосадочную жидкость удаляют. Затем к осадку добавляют 10 л дистш;„чированной воды и 250 мл -- ОХ-ного раствора щелочи, кипятят ггри лег;-ом помеи ивании 30 в течение 1 ч, содержимое декантируют- и осадок два;кды промывают водой - Затем осадок суспендируют в 5 л 10 мМ чатрийфосфатком буфера при рК 6,8 и доводят до кипен1Шо После оседания 3-5 стид супернатант дек антируют и еще тршсды повторяют эту П 5одедуру после xiero полу-чают суспензию гидроксилапатита в натрийфосфатком буфеве По-лученную суспензш:; разливают по 40 100 ivm во 4шаконы емкостью 250 мп. Лиофильную с т11ку осу1дег;твляют на установках КС-30 или йппарате Препарат наморажившот па стенки флакона путем накатки в занне со спир- 5 том охлаж.ца:ощего устройства сублимационного аппарата при температуре (™3/)(-40) и подверга2от субяш аци- онпой c njj-e, .Препарат (реактив) может фавкться в заморо; :ани:;м состоянии . в морозильном прллрзке до 0.,5 года, Гемпературный релсш сутики представлен иа графике5 изображе гном на чертеже. qepea 4-5 ч после начала сумки вклю-- ч-ают подогрев кассет., мри этом н ачаль- ная температура не превышает (-36) С, Через ч после нагрева температуру подогрева увеличивают таким образом,,, чтобы температура препарата через 20--23 ч ста-;ш положитель1450852

::; ,;r - «ос™.

Общая продолжительность сушки Ч в

Примерз. Проводят получение сорбента по способу-прототипу. По примеру 1 получяют суспензию гидрокси- лапатита, которую подвергают сушке при положительных температурах, наг- ш ревая ее постепенно в течение 20 - 25 ч до 40-С. В итоге, получают порошок белого с желтоватым оттенком пве- та Комки продукта имеют разную величину до 10x5 мм. При добавлении воды суспензия практически не образуется, при микроскопировании взвеси частиц порошка при увеличении 9x10 видны

частицы аморфного вещества белого „

цвета различной величины и формы- - осуществить;промьшленное п нимапьные частицы раз ером 20-15 м ° водство сорбента для обеспечения

ры ™ ™-- р-- ™ « --ния

: ... ° диаметре„ Таким

ков плазмы (протромбинового комп- лекса, антитромбина-Ш).

Сравнение сорбционных свойств 5 полученного по предлагаемому способ сорбента показало, что он обладает такими же свойствами, что и свежепр готовленная суспензия гидроксилапат Та

Применение лиофштьно высушенного гвдрокснпапатита при приготовлении препарата комплекса II, уп, X факторов свертывания крови дает выход Ь ед/мл, препарата IX фактора 15 4,2 ед/мл, препарата антитромбина-Х ijo ед/мл.

Срок годности сорбента составляет не менее двух лет. Это дает возможность осуществить:промьшленное произ

1ЧГ ПГ Тчэ/- -i,,

- - о X «ПЛИМ

веществом практически нельзя пользоваться для сорбции белков, поэтому необходимо его дополнительно размельчать, при этом сорбцион ные свойства его при хранении резко ухудшаются. Эффективность предложенного метода

POT nnTTOtTtJrT.r,с-

25

станций переливания крови. Формула изобретения

приготовления сорбента с применением .п Фосфата натрия в лиофильной сушки заключается в ° Р - ОР -хлорида натрия, кипячение

сорбционнь х ; . ..-« -ла в свойств гидроксилапатита, упрощении условий хранения и работы с сорбентом „ При этом сохраняется его мелко- /1исперсность, способность при добавлении физиологического раствора

35

. -J v-jicnjnii «-Начала i концентрированном растворе гидро- ксида натрия, затем в натрийфосфат- ном буфере и ее последующее высушивание при нагреве до 4Q°C, отличающийся тем, что, с целью повьшения сроков хранения гидрокси- лапатита при сохранении его сорбцион- нои активности к белкам, перед въг,. , и pdc j вора

образовывать суспензию, устойчивую при стерилизахщи в автоклаве при -- -1--ч

1,2 атм, обладающую высокой сорбцион- активности к белкам, перед вы ной активностью при вьщелении бел- ° Ушиванием суспензию замораживают ковых фракций из плазмы крови. при (-36)-(-40) С. , Иолученньш гидроксилапатит используют для избирательной сорбции бел2. Способ ПОП.1, отличающийся тем, что высумивание ве, дут в течение 38-40 ч.

.

„

осуществить;промьшленное п водство сорбента для обеспечения

ков плазмы (протромбинового комп- лекса, антитромбина-Ш).

Сравнение сорбционных свойств 5 полученного по предлагаемому способу сорбента показало, что он обладает такими же свойствами, что и свежеприготовленная суспензия гидроксилапати- Та

Применение лиофштьно высушенного гвдрокснпапатита при приготовлении препарата комплекса II, уп, X факторов свертывания крови дает выход Ь ед/мл, препарата IX фактора 5 4,2 ед/мл, препарата антитромбина-Х ijo ед/мл.

Срок годности сорбента составляет не менее двух лет. Это дает возможность осуществить:промьшленное произ1ЧГ ПГ Тчэ/- -i,,

™ « --ния

25

станций переливания крови. Формула изобретения

; . ..-« -ла в

. -J v-jicnjnii «-Начала i концентрированном растворе гидро- ксида натрия, затем в натрийфосфат- ном буфере и ее последующее высушивание при нагреве до 4Q°C, отличающийся тем, что, с целью повьшения сроков хранения гидрокси- лапатита при сохранении его сорбцион- нои активности к белкам, перед въг-- -1--ч

активности к белкам, перед вы Ушиванием суспензию замораживают при (-36)-(-40) С.

активности к белкам, перед вы Ушиванием суспензию замораживают при (-36)-(-40) С.

ю

447 гас