Питательная среда для выделения гонококков Советский патент 1989 года по МПК C12Q1/04 C12Q1/04 C12R1/36 

СП

Изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности к диагностике гонореи. Цель изобретения - повьшение чувствительно,сти среды. Для приготовления среды в колбу с 1 л дистиллированной воды вносят, -г: пептон 8-12, аргинин 0,07-0,3; цистин 0,007-0,03; глута- миновую кислоту 1-1,8i ЭКД 4-7i тиамин-бромид О,002-0,007i азотно-кислое железо 0,002-0,01; хлористый калий 0,07-0,2; хлористый натрий 5-8; хлористый аммоний 0,9-2; серно-кис- лый магний О,4-0,9j глюкозу 4-7; крахмал 0,5-2; трис-буфер 1-2,5 и агар 13-17. Среду доводят до кипения и кипятят 1-2 мин,а затем стерилизуют. Затем вносят 153-255 г бычьей сыворотки, полимиксин М сульфат 15000-25000 Ед., линколицин гидрохлорид 0,001- , 0,003о Среду взбалтывают для полного перемешивания. При посеве исследуемого материала процент выросших колоний возрастает. I табл. i (Л

а vi

20

25

Изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности к агностике гонореи.

Цель изобретения - повышение чувст- вительности среды.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами

Пример 1. Дпя приготовления среды с минимальным содержанием ингре-|д диентов в колбу с 1 л дистиллированной воды вносят следукяцие ингредиенты, г: пептон 8,О, аргинин 0,07, цистин 0,007, глутаминовая кислота 1,0, экстракт кормовых .дрожжей 4,0, J5 тиамин бромид 0,002, нитрат железа 0,002, хпористый калий 0,07, хлористый натрий 5,0, хлористый,аммогшй 0,9, серногкислый магний 0,4, глюкоза 4,0, крахмал 0,5, трисбуфер 1,0, агар 13,0,

Среду взбалтывают,, доводят до кипения и кипятят в течение 1-2 мин. Среду стерилизуют при 115°С в течение 30 мин, .

После стерилизации в охлажденную до 45-50 С среду вносят 153 г сыворотки крупного рогатого скота, поли- миксин М сульфат 15000 Ед. и линко- мицина гидрохлорид 0,001 г. Среду взбалтывают для полного перемедшва- ьшя ингредиентов и разливают в .стерильные чашки Петри, Готовая среда имеет рН 7,4-7,6,

Пример 2, Для приготовления среды с оптимальным содержанием .ингредиентов в колбу с .1 л дистиллированной воды вносят следунщие ингредиенты, г: пептон 10,0, аргинин 0,1, цистин 0,012, глутаминовая кислота 1,3, экстракт кормовых дрожжей 5,0, тиамин бромид 0,005, нитрат железа 0,005, хлористый калий 0,09, хлористый натрий 6,0, хлористый аммоний 1,25, серно-кислый магний 0,6, глюкоза 5,0, крахмал 1,0, трисбуфер 1,9, агар 15,0. ..

Среду взбалтывают, доводят, до кипения и кипятят в течение 1-2 юн. Среду стериУшзуют при 115°С в тече- ние 30 мино После стерилизации в охлажденную до 45-50 С среду вносят сыворотку .крупного рогатого скота 240 г, полимиксин М сульфат 20000 Кц. линкомицин гидрохлорид 0,002 г, Сре- ду взбалтывают для полного перемешивания ингредиентов и разливают в стерильные чашки Петри.

30

35

40

45

0

5

д 5

0

П р.и М е р 3. Для приготовления среды с максимальным содержанием ин1- редиентов . в кол,бу с 1 л дистиллированной воды вносят следующие ингредиенты, г: пептои 12,0, аргинин 0,3, цистин 0,03, глутаминовая кислота 1,8, экстракт кормовых дрожжей 7,0, тиамии бромид 0,007, нитрат железа 0,01, хлористый калий 0,2, хлористый натрий 8,0, хлористый аммоний, 2,0, серно-кисяый магний 0,9, глюкоза 7,0, крахмал 2,0, трис-буфер 2,5, агар 17,0,

Среду взбалтывают, доводят до кипения и кипятят в течение 1-2 мин. Среду стерилизуют при 115°С в течение 30 мин. После стерилизации в охлажденную до 45-50 с среду вносят сыворотку крупного рогатого скота 255 г, полимиксин М сульфат 25000 Ед, лиикомицин гидрохлорид 0,003 г. Среду взбалтывают для полного перемешивания ингредиентов и разливают в стерильные чашки Петри,

Сравнительная высеваемость гонококков из клинического материала на. предлагаемой и известной средах че рез 24-48 ч роста представлена в.. таблице.

Из таблицы видно, что предлагае- мая среда превосходит известную по показателям чувствительности, С увеличением посевной дозы гонококков на предлагаемой среде возрастает число выросших колоний значительно больше, чем на известной среде.

Формула изобретения

Питательная среда для выделения гонококков, содержащая источник азота, пептон, стимулятор роста, глюкозу, агар, бьгаью сыворотку, полимик

син М сульфат, линкомицин гидрохлорид, хлористый натрий и дистиллированную воду, отличающаяс тем, что, с целью повышения чувствительности среды, оно дополнительно содержит азотно-кислое желеэо, хлористый калий, хлористый аммоний, серно-кислый магний, крахмал, трис- буфер, в качестве источника азота она содержит аргинин, цистин, глута миновую кислоту, в качестве стимулятора роста она содержит экстракт кормовых дрожжей и тиамин-бромид пр следующем количественном соотношении компонентов, г/л:

Пептон Аргинин Цистин Глутаминовая кислота Экстракт кормовых -Дрожжей

8,0-12,0 0,07-0,3 .0,007-0,03

1 ,0-1,8 4,0-7,0

10

15

0

Тиамин-бромид Азотно-кнслое железо Хлористый калий

Хлористый натрий Хлористый аммоний

Серно-кислый магни й Глюкоз а Крахмал Трис-буфер Агар

Бычья сыворотка

Полимиксин М сульфат Линкомицин гидрохлорид Дистиллирован-, ная вода

0,002-0,007. 0,002-0,01

0,07-0,2 5,0-8,0

0,9-2,0

0,4-0,9 4,0-7,0 0,5-2,0 1,0.-2,5 13,0-17,0

153,0-255,0 15000-25000 Ед,

0,001-0,003 1 л