1
Изобретение относится к иммунологии и гематологии, а именно - к способам получения препаратов для экспериментальных и диагностических целей.
Целью изобретения является повышение специфичности целевого продукта к эритробластам селезенки.
Способ осуществляется путем введения животному-донору фенилгидрози- на вьщелеиия клеток его селезенки, введения этих клеток животному-ре- циниенту с последз щим забором кроки и вьщеленнем импульсной сыворотки.
Пример, Для приготовления антигемиого материала используют в качестзе доноров каплей (СВА x;C57BL)F,. Мышам вводят фенилгидраэин-гидрохло- рид (ФГ), например, по схеме 0,4% р-р по Oj25 мл пнутрибрюшинно в 17, 9 н 17 и следующего дня. Через 16 20 ч после последнего введения селезенки с индуцированным ФГ эр5ггропо- эзоы забирают, готовят клеточную . суспензию, которую эатем освобождают от популяции прнлипанндкх к пластику,, клеток инкубацией на пластиковых чашках при 37°С в течение 45 мин в среде 199 с добавлением 10% сыворотки крупного рогатого скота, с концентрацией клеток на чашках (10- 15)10 в мм. Далее суспензшо освобождают от зрелых эритроцитов S nanpH- мер, гемолитическим штоком с помощью дистиллированной воды с последующим
г восстановлением изотонии 3,5%-ным раствором NaCl.
В качестве реципиента выбирают животного другого вида, например кролика. Дпя получения и 1муногенной дозы (500«10 кл) необходимо 35 мышей-доноров (на одного кролика), Далее клеточную суспензию вводят внутривенно кролику двукратно с интервалом 2 недели. Через 7-10 дн забирают кровь, из которой получают сыворотку, осаждая форменные элементы центрифугированием. Далее сыворотку инакти- вируют в водяной бане при 56 С в течение 1 ч и абсорбируют треккратно эритроцитами перекрестного вида, например крысы, и вида, сингенного до- яору, например мыши. В этом случае плотный осадок эритроцитов после центрифугирования составляет 30% от объема сыворотки.Далее абсорбцию ведут гомогенатом печени вида, синген- ного донору (в данном случае взрослой мьнпи), встряхиванием в течение 1-1,5 ч, берется 0,1 мл осадка на t мл сыворотки. Далее абсорбцию ве- дут клетками тимуса и лимфоузлов мы- tmj (109 кл на 1 мл сыворотки) в течение 1ч,
Тестирование сыворотки проводят по цитоток.сическому эффекту па различные лимфо- и гемопоэтические популяции, клетки эмбриональной печени, клетки Селезенки новорожденных ьш- шей,, спленоциты животных после гипоксии, клетки эритропрэтической селезенки, индуцированной введением фенипгидразииа, клетки костного , мозга,лимфоцитов5 тимуса, интактной селезенки.
В результате проведения цитоток- сического анализа с полученной антисывороткой наблюдается цитотрксичности с клетками селезенки мьпзей, обработанных фенидгидрази- ном, 68t9% - с клетками эмбриональной печенк и 43tlO% с клетками селезенки мышей после гипоксии. Ци10 тотоксичность по отношению к клеткам костного мозга, лимфоузлов и тимуса составляет 0-3%,
Таким образом, в сравнении с известной антисывороткой и клеткам
t5 селезенки, наб/подается лишь незначи-- тельная активность в отношении лим- фоидных клеток и повышение специфич-г ности к эритробластам селезенки. Эта сыворотка может быть использована
0 при количественном анализе эритро- .-. бластов и в целях их специфического удаления.
Формула изобретения
5 Способ получения антисыворотки к клеткам селезенки, включающий выдвле5ше клеток селезенки у животного-донора, введение ик животному- реципиенту с последующим забором кро0 ви и выделении, иммунной сыворотки отличающийся тем, что, с целью повьяаения специфичности целевого продукта к эритробластам селезенки, перед внцелением клеток животному-донору вводят фенилгидраЗШ о
Изобретение относится к экспериментальной иммунологии, гематологии и онкогематологии, а именно к способам получения препаратов для экспериментальных, диагностических и лечебных целей. С целью повышения специфичности целевого продукта к эритробластам селезенки сначала получают антигенный материал из клеток селезенки донора, которую предварительно обогащают введением фенилгидразина. Затем антигенный материал вводят реципиенту другого вида и из его крови выделяют сыворотку, которую далее инактивируют, абсорбируют и тестируют.
