Способ приготовления тотальных препаратов трематод Советский патент 1989 года по МПК A01N1/00 

(aii СД 4

00 00

00

1

Изобретение относится к области ельминтологии, а именно к способа Фкраски препаратов трематод.

Целью изобретения является обес Чение дифференциальной диагностики консервированных материалов.

П р и м е р I . В качестве конт jjiH используют способ приготовления препаратов, согласно которому окра пивагот взрослых трематод, фиксиро- liaHHbix спиртом- (70) и скомпрессир цанных между стеклами, после кратк лременной промывки в дистиллирован

ной воде, помещают в молочнокисльй 1:армин -0,6%-ной концентрации на 2,5 ч и затем промьшают в дистиллированной иоде. После этого окрашенные тремато Лы проводят через спирты возрастающей крепости 60, 70,80, 90, 96, 100° с1атем объект просветляют в гвоздичном масле и заключают в бальзам. Таной метод используют при окраске рематод рыб. ,

При Окраске трематод птиц по это- способу без длительной мацерации Не все трематоды разных родов впитывают в себя краску. Так, более неж- ifeie прокрашиваются лучше, более круп Цые (эхиностомы, циклоцелиды) окра- пинаются хуже. Поэтому перед окраской мацерируют трематод до белого налета.

I Приготовленные по этой методике г репараты имеют однотонную оранжево-желтую окраску всех органов, что з атрудняет дифференциальнзто диагно- dTmcy.

; Пример 2, Консервированный Цатериал мацерируют в дистиллирован- вбдз со сменой, ее в первые сут- к1и. После этого воду больше не меняют до появления белого налета. В воде при такой мацерации трематод ощущается запах сероводорода.

При появлении налета трематод ополаскивают в сменной дистиллированной воде налет удаляют мягкими кисточками, дополнительно прессуют между предме±ными стеклами, сжимают и фиксируют нитками, сменяя обвязку через каждые cyтkи, Мелких и нежных трематод прессуют 10-15 мин, толстых сем. Dicrocoeliidae, Fasciolidae, Echiiiostiomatidae, Cicloceliidae, Pfosthogonimidae, Notocotilidae,- несколько суток, поместив в чашки Петр и залив свежей дистиллированной водой (22-24°С), :

5

5 0

5 О

После этого трематод подвергают окраи иванию молочнокислым кармином 0,6%-ной концентрации. Окраску контролируют путем просмотра трематод в микроскопе МБР-1, МБР-6. Время окрашивания - от нескольких часов до нескольких суток при комнатной температуре (22-24 с)

Как только цвет желточников, семенников и присосок становится оранжевым, окраску прекращают, трематод вынимают и промьшают в воде.

После кратковременной промывки водой (в течение 1-2 мин) препарат помещают в квасцовый кармин 3%-ной концентрации и вьздерживают до выявления темно-фиолетовой окраски внутренних органов под контролем бинокуляра.При окраске семенников в темно-фиолетовый цвет трематод вынимают и промывают в воде. Затем пропускают через спирты возрастающей концентрации 50, 60, 70, 90, 96, ЮО. Далее про- светляют трематод в диметилзстере фталевой кислоты, при помощи фильтровальной бумаги удаляют остаток просветляющего раствора, переносят на предметное стекло н заливают канадским бальзамом.

Пример 3. Консервированный материал мацерируют в дистиллированной воде со сменой ее в первые сутки. После этого воду больше не меняют до появления белого налета. В воде при такой мацерации трематод ощущается запах сероводорода.

При появлении налета трематод опо- ласкивают в сменной дистиллированной воде, налет удаляют мягкими кисточками, дополнительно прессуют между предметными стеклами, сжимают и фиксируют нитками, сменяя обвязку через каждые сутки. Мелких и нежных трематод прессуют 10-15 мин, толстых сем. Dic- rocoeliidae, Fasciolidae, Echinosto- matidae, Cicloceli.idae, Prosthogoni- midae, Notocotilidae - несколько суток, поместив в чашки Петри и залив свежей дистиллированной водой (22- 24 С). После этого трематод подвергают окрашиванию молочнокислым кармином О,8%-ной концентрации. Окраску контролируют путем просмотра трематод в микроскопе МБР-, МБР-6. Время окрашивания - от нескольких часов до нескольких суток при комнатной температуре (22-24°С) .

145

Как только цвет желточников, семенников и присосок становится оранжевым, окраску прекращают, трематод вынимают и промьшают в воде.

После кратковременной промьшки водой (в течение 1-2 мин) объект помещают в квасцовьй кармин 3,5%-ной концентрации, и выдерживают до выявления темно-фиолетовой окраски внут- ренних органов под контролем биноку- ляра. При окраске семенников в темно-фиолетовый цвет трематод вьшимают и промьгоают в воде, затем пропускают через спирты возрастающей концентра- ции 50, 60, 70, 90, 96, 100. При помощи фильтровальной бумаги удаляют остаток просветляющего раствора, переносят на предметное стекло и заливают канадским бальзамом.

Препараты, приготовленные предлагаемым способом имеют окраску, которая проявляется в нескольких тонах: тело трематод оранжево-желтое;

половые органы мужской и женской сие-25 фталевой кислоты.

В контроле наблюдается однотонность в окраске вьшеперечисленных органов. Таким образом, предлагаемый способ облегчает изучение анатомических и морфологических особенностей трематод, что способствует определению их до вида.

Формула изобретения

1. Способ приготовления тотальных препаратов трематод, включающий мацерирование трематод, прессование, окраску молочнокислым кармином и последующее просветление и заключение в канадский бальзам, о т л и - чающийся тем, что, с целью обеспечения дифференциальной диагностики, консервированных материалов, мацерирование ведут до появления белого налета, а после окрашивания молочнокисльм кармином осуществляют окраску квасцовым кармином, при этом просветление ведут в диметилэстере

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к гельминтологии. Цель изобретения - обеспечение дифференциальной диагносГики консервированных материалов. Мацерирова- ние трематод ведут до появления белого налета, а после окрашивания 0,6- 0,8%-ным водным раствором молочнокислого кармина осуществляют окрашивание 3-3,5%-ным водным раствором квасцового кармина. Просветление ведут в диметилэстере фталевой кислоты. 1 з;п. ф-лы. О)

тем (яичник,семенники) красновато- фиолетовые (могут быть фиолетовые); желточники на фоне оранжево-желтого тела имеют светло- и темно-коричневый цвет. Все системы органов про- сматриваются на препаратах полностью.

2. Способ по п. 1, о т л и ч а ю- щ и и с я тем, что для окращивания трематод используют 0,6-0,8%-ный вод- ньй раствор молочнокислого кармина и 3-3,5%-ный водный раствор квасцового кармина.