Способ получения вещества ЭПИ-F Советский патент 1962 года по МПК C12P33/00 

Известны микробиологические способы получения лекарственных препаратов, например способ получения дегидрокортизона (нреднизона).

Предлагаемый способ получения вещества ЭПИ-F микробиологическим путем открывает большие возможности для осуществления промышленного синтеза кортизона и его аналогов.

Отличительная особенность способа состоит в том, что вещество ЭПИ-F получают из легко доступного ацетата вещества «S РейхштеНпа одновременным его На-гидроксилированием и 21-дезацетилированием с помощью штамма Thiegemella hyalospora ЛЬ ЛС-1313 на промышленно доступной среде- содержащей глюкозу и кукурузный экстракт.

Штамм Thiegemella hyalo.spora Л1 ЛС-1313 способен осуществлять селективное Па-гидроксилирование и дезацетилирование 21-апетильной группы в ацетате вещества «S Рейхштейна с получением монопродукта удовлетворительной чистоты, что позволяет использовать его без дополнительной очистки для превращения в ацетат кортизона.

Для осуществления способа колбы со 150 мл среды, содержаще глюкозы 5%, пептона 2f/o, кукурузного экстракта 0,3%, засевают суспензией спор Thiegemella hyalospora Xg АС-1313, выращенных на суслоагаре или пшене из расчета 40-60- 10 спор на 1 л среды. После 24 - 48-часового выращивания при 27° посевной материал передают в ферментер с 16 ./г среды следующего состава: глюкозы - 2,5%, кукурузного экстракта-1% (на сухое вещество), рН-5,0-5,2. Через 24 час в ферментер вводят 8 г ацетата вещества «S Рейхштейна, растворенного в 500 мл ацетона. Процесс превращения-дезацетнлирования и гидроксилироаания протекает за 26-28 час.

№ 145573- 2 Методом контроля конца реакции служит хроматографическое разделение веществ на бумаге в системе формамид - бензол.

По окончании процесса мицелий отфильтровывают, промывают водой и ферментационную жидкость экстрагируют хлористым метиленом три раза цо 8 л. Объединенный экстракт упаривают без вакуума до 200 М.Л и оставляют в рефрижераторе на ночь. Отгон хлористого метилена используют для повторных экстракций. Выкристаллизовавшееся вещество ЭПИ-F в виде аддукта с хлористым метиленом отфильтровывают и промывают на фильтре охлажденным хлористым метиленом. Высушивают на воздухе, получают 5,65 г вещества ЭПИ-F с т. нл. 213-214°.

Выход вещества ЭПИ-F - до от теоретического количества, считая на ацетат вещества «S Рейхщтейна.

Предмет изобретения

Способ получения вещества ЭПИ-F .микробиологическим путем на среде, содержащей глюкозу и кукурузный экстракт, отличающийс я тем, что, с целью ускорения и упрощения процесса, ацетат вещества «S Рейхщтейна подвергают одновременному 11 а-гидроксилированию и 21-дезацетилированию с помощью штамма «Thiegemella hyalospora № ЛС-1313.