Способ выделения гемокультур сальмонелл брюшного тифа и паратифов Советский патент 1990 года по МПК C12Q1/04 C12Q1/04 C12R1/42 

Изобретение относится к медицинской микробиологии и касается выделения возбудителей брюшного тифа и пар атифов.

- изобретения - ускорение и упрощ-аГие способа.

Способ осуществляется следующим образом. Кровь, взятую из вены боль- ного в количестве 5-10 мл, стерильно вносят во флакон с 5-10 мл 6Z-Horo раствора цитрата-натрия и доставля- ют в лабораторию. К цитратной кропи добавляют 100 ют расплавленной и- .остуженной до 40-50 С среды .следующего состава, г/л:

Пздролизат .. . . Хоттингера 100,0-130,0 Маянит . 9,0-11,0 Сульфат натрия 0,03-0,05 Гипосульфат натрия 0,07-0,09 Сульфат железа 0,09-0,II Агар-агар4,8-5,2

Вода дистиллированная До 1 л. После добавления к крови расплавленной, и остуженной среды содержимое -({(лакона перемешивают и разлипают в 4 стерильные чашки Петри (по 25- 30 МП в каждую чашку) и закрывают юс крышками. После застывания среды

чашки помечают в термостат (крьипса- ж вверх) при ЗТ С на 3 сут и ежедневно просматривают посевы. При наличии в исследуемой крови возбудителей (брюшного тифа или паратифов . через 24 ч инкубации в глубине шш на поверхности среды в чашках tftipac- тают характерные колонии черного или темно-серого цвета диаметром Oj5-3,0 см. В процессе дальнейшей инкубации колонии увеличиваются в диаметре. Идентификацию выросших культур производят обычными методами.

среды с минимальным, оптимальным и максимальным содержанием компонентов обладают примерно одинаковой, достаточно 1 ысокой чувствительностью при обнаружении возбудителей бркшшого тифа и паратифов А и В,

Из таба, 2 видно что способ вы- УО деления гe loкyльтyp не уступает «о эффективности общепринятому. Все отрицательные результаты исследования при предлагаемом способе получе- иы на 6 дней, а положительные на

Результат определения представяе- 15 1-3 дня раньше, чем при общеприйяны в табл.I и 2.

Для осуществления способа используют питательную среду, приготовление-ко торой описывается в примерах 1-3.

Пример I. Готовят навеску среды, для этото берут.(г/л), гидро-. лизатаХоттингера 100,0; маннита 9,0; сульфата натрия 0,03; гипосульфита натрия 0,07;, супьфата железа 0,09; агар-агара 4,8; воды дистиллированной до 1000,0 МП. Среду разливают по 100 МП во флаконы, стерилизуют при 0,5 ати 30 мин, рН среды .7,2-7,4. Перед употреблением среду расплавляют на водяной бане..

П р и м е р 2. Готовят навеску среды,.которую готовят как ив примере 1, но берут (г/л) идpoлизaтa

том способе, что свидетельствует о существенном сокращении сроков-попу- чения результатов исследований а исюиочение стадии .накопления культур 20 сокращает число эталов способа, сокращает расход питательных сред.

Ф о р м у л а и 3 о б р е т е н и я

25 Способ выделения гемокультур саль монелл бркяпного тифа и паратифов, предусматривающий забор исследуемой крови, посев и ийкубирОвание с использованием питательной среды, с

30 последующим учетом выросших колоний отличающийся тем, что, с целью ускорения и упрощения способа, исследуемую кровь непосредственно смешивают с расплавленной и осту1 1Ч 1 ел ч .г fj J л ---- ---- -- - ----Хоттингера 115,0; маннита 10,6 ; суль- ,- женной питательной средой, содержа .ъ«ъ4 ./ЪЛОя - Х.

фата натрия 0,04; гипосульфита 0,08; сульфата железа ,0,10; агар - агара 5,0;.воды дистиллированной до 1000,0 МП.

Прим е р 3. Готовят навеску среды как в примере 1, но берут. .. (г/л) гидролизата Хоттингера 130,0; - маннита 11,0; сульфата натрия ..0,05; гипосульфита натрия 0,09; сульфата железа 0,11; агар - агара 5,2; до 1000,О.МП вода дистиллированной,

Данные табл.1 свидетельствуют о тон, что три варианта питательной

щей, г/л:

Гидролизат Хоттингера 100-130 Маннит9-11

Сульфат натрия 0,03-0,05 40 Гипосульфит натрия 0,07-0,09 Сульфат железа 0,09-0,11 Агар - агар4,8-5,2

Вода дистиллированнаяДо 1 л, . 45 полученную смесь разливают в чашки инкубируют в течение 1-3 дней и отбирают колонии чёрного или темно- серого цвета, выросшие на поверхности и в толще среды.

среды с минимальным, оптимальным и максимальным содержанием компонентов обладают примерно одинаковой, достаточно 1 ысокой чувствительностью при обнаружении возбудителей бркшшого тифа и паратифов А и В,

Из таба, 2 видно что способ вы- УО деления гe loкyльтyp не уступает «о эффективности общепринятому. Все отрицательные результаты исследования при предлагаемом способе получе- иы на 6 дней, а положительные на

15 1-3 дня раньше, чем при общеприйя1-3 дня раньше, чем при общеприйятом способе, что свидетельствует о существенном сокращении сроков-попу- чения результатов исследований а исюиочение стадии .накопления культуры сокращает число эталов способа, сокращает расход питательных сред.

Ф о р м у л а и 3 о б р е т е н и я

Способ выделения гемокультур сальмонелл бркяпного тифа и паратифов, предусматривающий забор исследуемой крови, посев и ийкубирОвание с использованием питательной среды, с последующим учетом выросших колоний, отличающийся тем, что, с целью ускорения и упрощения способа, исследуемую кровь непосредственно смешивают с расплавленной и осту--- -- - ----женной питательной средой, содержа - Х.

щей, г/л:

Гидролизат Хоттингера 100-130 Маннит9-11

Сульфат натрия 0,03-0,05 Гипосульфит натрия 0,07-0,09 Сульфат железа 0,09-0,11 Агар - агар4,8-5,2

Вода дистиллированнаяДо 1 л, . полученную смесь разливают в чашки инкубируют в течение 1-3 дней и отбирают колонии чёрного или темно- серого цвета, выросшие на поверхности и в толще среды.

Таблица

Изобретение относится к медицинской микробиологии, в часжности к микробиологической диагностике брюш- ноГо тифа и паратифов. Цель изобретения - ускорение и упрощение спосо- ба. Способ |9ключает взятие крови из вены больного в стерильный флакон с раствором цитрата натрия. К цитрат- ной крови добавляют 100 мп расплав-т ленной и остуженной до 40-50 0 nuTai тельной среды следующего состава, . г/л: гидролизат-Хоттингера 100,0- IЗO,Oi маннит.9, сульфат нат рия 0,03-0,05; гипрсульфат натрия 0,07-0,09; сульфат железа 0,09- 0,11; агар-агар 4,8-5,2; вода дистиллированная - остальное. Содержимое флакона перемешивают и разливают в стерильные чашки, посевы ..инкубируют при 37 С. При наличии в исследуемой крови возбудителей брюшного тифа или паратифов через 24 ч инкубации в глубине или на поверхности среды в чалхах вырастают колонии черного или темно-серого цвета диаметром 0,5-3,0 см. 2 тавп. (Л

12

0,90,7

11

1,10,6

12

1,00,6.

12

I,А0,8

13

1,50,9

12

1,30,7

1,30,9

10

1,50,7

10

1,,8

CnoeolS