Способ получения 5-пиперидино-7- @ N-(н-пентил)-N-( @ -оксиэтил)-амино @ -S-триазоло (1,5- @ ) пиримидина Советский патент 1989 года по МПК C07D487/04 A61K31/51 A61P9/06 A61P9/08 A61P9/10 

1

Изобретение относится к способу получения нового производного три- азолопиримидина, конкретно к способу получения 5-пиперидино-7-TN-(н- пентил)-N-(Л-оксиэтил)-амино)-S- триазоло(1,5-а)пиримидина, обладающего сосудорасширяющим, инотропным, антиаритмическим действием.

Цель изобретения - получение нового производного триазолопиримидина, обладающего большей активностью, чем структурньй аналог подобного действия - трапидил.

Пример 1. 18,9 г 5,7-дихлор- 3-триазол(1,5-а)пиримидина растворяют или суспендируют в 50 мп этанола и при 278-283 К медленно (при пер ремешивании) смешивают с раствором 26,1 г н-амилэтаноламина в 25 мл этанола. После окончания добавления смесь вьщерживают в течение 1 ч при 10-15 С и затем добавляют к образующейся суспензии при 20-25 с раствор 17,0 г пиперидина в 20 мл этанола. Смесь выдерживают в течение 3 ч при 40-50 с, упаривают, растворяют в 100 мл метнпенхлорида, трилзды промывают водой порциями по 75 мл и отделяют воду. Метиленхлорид отгоняют, а остаток подвергают кристаллизации. После перекристаллизации из бензина получают 26,5 г 5-пи- передино-7-ГН-(н-пентил)-Ы-СЯ-окси- этил)-aминoJ S-тpиaзoл(1,5-а)пиримидина - соединение В (80% от теоретического выхода) с т. пл. 117-118 с.

Следующие примеры иллюстрируют биологическое действие полученного соединения.

Пример 2, Агрегация кровяных пластинок человека арахидоновой ки- слртой (АА) или и-46619.

9 объемов крови доноров, которые в течение 10 последних дней не принимали никаких медикаментов, обрабатывались 1 объемом 3,8%-ного раствора тринатрийцитрата и подвергались центрифугированию при 200 g при комнатной температуре в течение 10 мин. Обогащенная пластинками плазма (ОПП) отбиралась пипеткой, покрытой силиконом, и в течение эксперимента (максимум в течение 3 ч) хранилась при комнатной температуре.

Соединение В растворялось в смеси растворителей из этанола и хлороформ (1:1), одинаковые части вводились в измерительные кюветы и смесь органического растворителя вливалась в токе азота. После добавления 0,3 м ОПП и 0,1мл физиологического NaCl- раствора и предварительного вьщержи- вания в течение 2 мин при 37 С производилось разъединение агрегатов посредством арахидоната натрия (0,4- 0,7 ммоль/л) или посредством TXAg- агониста и-46619 (0,2-0,8 ммоль/л). Измерение хода агрегации произво- дилось в соответствии с методом БорнаСВот 9.V.R. U Cross, UI: I Physiol, 1963, 168, 178).

Получены необходимые для 50%-ного торможения агрегации концентрации . исследуемого соединения в непосредственном сравнении с трапидилом.

В табл. 1 показано воздействие на агрегацию тромбоцитов ОПП человека соединения В по сравнению с трапидилом (Р1С - равно отрицательному логарифму средней молярной концентрации торможения).

Как показывают результаты табл,1, производные о бладают значительно более сильным антиагрегативным действием по сравнению с трапидилом.

Пример 3. Торможение агрегаци тромбоцитов на кроликах и крысах.

0

5

0

5

0

5

0

5

0

5

Обогащенная пластинками плазма получена из цитратной крови кроликов и крыс посредством центрифугирования при 200 g при комнатной температуре. и в течение эксперимента хранилась в полимерных шприцах при комнатной температуре. При исследованиях на кроликах к 0,4 мл ОПП добавлялось к гомологичной плазме проверяемое вещество в 0,9%-ном растворе NaCl (50 мкл) и через 3 мин предварительной выдержки при 37 с вызывалась агрегация посредством арахидоновокисло- го натрия (75-210 ммоль/л).

Пластинки крыс подвергались сепарированию и суспендировались в буфере.Михаелиса (рН 7,4) и дефибри- нированной гомологичной плазме (1:1). К 1,2 мл этой суспензии пластинок добавлялись 10 мкл раствора препарата в этаноле и через 2 мин предварительной выдержки при начиналась агрегация путем добавления арахидоновой кислоты (2 ммоль/1 конечную концентрацию в кюветке). Измерение агрегации производилось нефелометрически по методу Борна (Вот 9. VR.U.Cross, UI.:I. Physiol, 1963, 168, 178),

В табл. 2 показано торможение агрегации тромбоцитов, вызываемое арахидоновой кислотой, на кроликах и крысах in vitro, -.

Сравнение средних молярных тормозящих концентраций (табл. 2) показывает также Б этих экспериментах существенно более сильно выраженное противоагрегационное действие нового соединения по сравнению с трапидилом. Пример4. Воздействие на агрегацию тромбоцитов in yivp.

. Интравенозная аппликация арахидоновой кислоты у кроликов вызывает агрегацию тромбоцитов, в особенности в сосудах легких,, симптомы удушья и . летальный эффект. Уже в низких бессимптомно протекающих концентрациях арахидоновой кислоты агрегационное действие на основании (transienten) непосредственно после инъекции доказуемого количества свободно циркулирующих тромбоцитов в периферийной крови может быть установлено капи- чественньЕ путем и доказана эффективность вводимых до этого лекарственных препаратов. У ненаркотизированных кроликов обоего попа после отбора пробы из ушной вены определялось количество кровяных пластин посредстBOM фазовоконтрастного микроскопа. Затем вводился арахидоновокислый натрий в дозе 0,1 мг/кг fi.v.) и количество тромбоцитов после этого определялось снова через 1/2, 1,2, 3, 5 и 10 мин. В качестве количественно го критерия для вызываемой арахидо- новой кислотой тромбоцитопении использовалась, площадь, ограниченная процентным снижением количества пластинок, и ее значение для животных ;контрольной группы принималось за 100%. Для проверки in vivo эффективности проверяемых препаратов последние после определения индивидуальной АА-реакции невозбудимости в виде суспензии в сверхбыстронабухающей целлюлозе вводились посредством мягкого зондд per oral и описанным порядком степень тромбоцитопении снова определялась после инъекции арахидо- новой кислоты через 21 , 2, 4, 6 и 24 ч после введения препарата.

В табл. 3 показано .воздействие на агрегацию инъецированием арахидоново кислоты у кроликов in vivo.

Результаты табл. 3 показывают в сравнений с трапидилом превосходящую эффективность по торможению агрегации нового соединения и одновременно доказывают также его.эффектив;. нрсть in vivo.

Примерз. Образование TXAj и ее воздействие на пластинки кроликов после вызывания агрегации исследовалось с помощью арахидоновой кислоты. Получение ОПП и вызывание агрегации проводилось в условиях примера 2. Через 90 с после введения АА равные части содержимого кюветок использовались для биологического определения содержания ТХА. Определение содержания тромбоксана А производит

лось на спирально вырезанной полоске сосуда А. Mesenterica кролика пос ред- ством суперфузионной техники. В качестве суперфузионной жидкости испо- льзовался раствор тирода, который для повышения селективности Blocker- substanzen веществ содержал пропра- нолол (5 мг/мл), пентояамин (1 мкг/мл), атропин (0,25 мкг/мл). Чувствитель- . ность полоски сосуда определялась посредством ЕМА (9,11-эпоксиметано- 15-Сз1-гидрокси-проста-5,33-динновая кислота и-4А069) в диапазоне доз 1- 25 мг, а сокращения регистрировались на самопишущем приборе посредством

684236

индуктивного преобразователя. По сравнению с- трапидилом новое производное отличается более интенсивным торможением боксов тромбов.

В табл. 4 показано образование ТХА2 в стимулированных арахидоновой кислотой кровяных пластинках кролика при воздействии нового соединения.

10 П р и м е р 6. Инотропное действие.

Влияние силы сокращения сердца исследовалось на изолированном предсердии морской свинки (Rechle). Спон15 танно действующие сердечные препараты суспендировались в 25-миллилитровых ванночках для органов с протекающим через тиродный раствор 0, а сокращения измерялись посредством механи20 ко-электрических преобразователей полуизометрически.

Новое соединение отличалось положительной изотропной эффективностью на изолированном препарате предсердия морской свинки.

Необходимые для 50%-ного усиления силы сокращения дозы в виде отрицательного логарифма соответствующих молярных концентраций показаны в 30 табл. 5 и подтверждают превосходящую по сравнению с трапидилом эффективность.

. Пример 7. Острая токсичность.

Острая токсичность нового соеди- 35 нения проверялась на самцах NMRI - мьпией после интраперитональный или интравенозных применений. Соединения суспендировались в быстро набухающей целлюлозе (i,p.) или растворялись в винной кислоте (i.y.) и вводились. Определение , производилось по способу Zitchfield .и Wilcoxon.

В табл. 6 показана острая токсичность на мышах LD .

25

40

45

Формула изобретения

Способ получения 5-пиперидино-7т LN-(н-пектил)-N-(/5-oкcиэтил)-aминoJ - 55 8-триазоло(1,5-а)пиримидина, отличающийся тем, что, 5,7-ди- хлор-З-триаэол(1,5-а)пиримидин подвергают взаимодействию с н-пентилэтано- ламином при 10-15 с, а затем с пипери- 55 Дином при 40-50 0, причем весь про-- цесс проводят в низщем спирте, предпочтительно в этаноле, с последующим вьщелением целевого продукта известным способом.

71468423

Таблица 1

Торможение агрегации

тромбоцитов (PICjyi) .

АА и-46619

Т

е

4,66 3,75

5,09

Таблица2 PIC,

10

Кролики

I

fo Крысы

--15

Таблица 4

Трапидил

Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности полу 5--пиперидино-7 (н-пентил)- N (-ОКСИЭТИЛ )-аминоЗ-8-триазоло

4,05 4,97

2,49 3,75

- -------. 20

Таблица 3

Доза, мг/кг

Торможение вызьгаае- мой АА-тромбоцитопе- нии, %, через, ч

1 I 2 I 4 16 i 24-.-----.------ «..,„..

1 JL--. Соединениеi.p,| i.v,

/.о/,(LПл 1,

Трапидил 20 14 24 6 О О

150(124-194) 115(104 230(193-274) 62(6225

Т. аблица 6

150(124-194) 115(104-127) 230(193-274) 62(6275)