Способ диагностики гнойно-воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области Советский патент 1989 года по МПК G01N33/53 

1

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для диагностики воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области.

Цель изобретения - повышение точности диагностики гнойно-воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области.

Способ осуществляют следующим образом.

У больных с подозрением на гнойно-воспалительный процесс челюстно- лицевой области (переост челюстей одонтогенный абсцесс и флегмоны, абсцедирующий фурункул и карбункул, одонтогенный остеомиелит, одонтогенный остеомиелит, осложненный флегмоной) ежедневно в сыворотке крови определяют противомозговые антитела.

Сыворотку крови получают путем отделения свернувшегося сгустка центрифугированием при 1500 об./мин в.

течение 10 мин, добавляют к ней тио- мерсалат натрия до конечной концентрации 1:100 тыс. и хранят в герметически закупоренных пенициллиновых флаконах при -30°С до момента титрования на противомозговые антитела (ПМА).

Мозговые антигены. Материалом для получения мозговых антигенов служит головной мозг случайно погибших здоровых людей (от травмы, не связанной с повреждением головного мозга), Ткань берут не менее, чем от 3-4 лиц. Мозговую ткань тщательно промывают физиологическим раствором, максимально освобождают от мозговых оболочек и сосудов, измельчают и вновь отмывают от остатков крови стерильной дистиллированной водой. Затем к одной объемной части ткани мозга добавляют 3 части стерильного физиологического раствора и гомогенизируют на дезин Ј

О СО ОС СЛ

3U

теграторе при 10 тыс. об./мин до получения гомогенной массы.

Растворимую фракцию мозговых антигенов отделяют от гомогената путем многоступенчатого центрифугирования (с 3 до 18 тыс. об./мин). Полученный водно-солевой экстракт мозговых антигенов представляет собой прозрачный опалесцирующий раствор. К нему в качестве консерванта добавляют тиомер- салат натрия до конечной концентрации 1:100 тыс. Во фракции измеряют содержание белка по Лоури, разливают антигенный материал в стерильные ампулы, запаивают их и хранят антиген в замороженном виде при -30°С.

Эритроцитарный индикатор противо- мозговых антител получают путем конъюгации формализированных эритроцитов овец с мозговым антигеном, выделенным из мозга.

Использование в качестве носителя антигенов формализирован ые эритр

циты овец получены из Уфимского НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова и соответствуют техническим условиям КВС № 228-81.

В качестве сшивающего агента мозговых антигенов с эритроцитами служит хлорный хром: к 0,5 мл 50%-ных формализированных эритроцитов овец прибавляют 1,0 мл антигена (1 мг белка) и 1,0 мл 0,1%-ного хлорного хрома .

Реакционную смесь тщательно перемешивают в течение 4 мин, переносят в охлажденную емкость и добавляют 10-кратный объем холодного стерильного физиологического раствора для остановки реакции. Эритроциты отделяют центрифугированием при 1500 об./мин в течение 7 мин, трижды отмывают холодным стерильным физиологическим раствором с центрифугированием при этих, же условиях. Из полученного осадка сенсибилизированных мозговыми антигенами эритроцитов готовят на стерильном физиологическом растворе (с тиомерсалатом натрия) 2%-ную рабочую взвесь индикатора.

Специфичность и чувствительность индикатора контролируют в реакции непрямой гемагглютинации (РИГА) по Бойдену с кроличьими антисыворотками против названного антигена. Индика- | тор вступал в реакцию с соответствующей иммуногывороткой и не реагиро

5

0

5

вал с антисыворотками к человеческим сывороточным белкам.

Противомозговые антитела определяют с помощью РИГА по Бойдену (Boyden, 1951).

Титрование проводят в планшетах микротитратора Таккачи. Разведения исследуемых и контрольных сывороток начинают с 1:2 и так далее (до 1:256). В лунки разведений сывороток вносят по 0,025 мл 2%-ной рабочей взвеси индикатора. Планшеты тщательно встряхивают и оставляют при комнатной температуре.

За искомый титр принимают то последнее разведение сыворотки, в котором заканчивается агглютинация индикаторных эритроцитов.

Для удобства статистической обработки эти разведения логарифмируются по основанию 2. Таким образом, разведения сыворотки 1:2, 1:4, 1:8 и т.д. соответствовали 16§г(равны 1,2,3 и т.д.).

5

0

5

0

5

0

При повышении титра противомозго- вых антител по сравнению с исходным уровнем на 1 log и более диагностируют гнойно-воспалительное заболевание челюстно-лицевой области.

Приме р 1. Больной К. обратился с жалобами на боль в области 4 яуба верхней челюсти справа. При рентгенографии выявилось расширение периодонтальной щели, при объективном осмотре - гиперемия слизистой оболочки в области пораженного зуба с вестибулярной стороны. Исследована кровь на ПМА, титр ПМА составил 1. На второй день исследования отмечалось повышение титра ПМА до 3. Диагностировано гнойно-воспалительное заболевание (переостит), что подтвердилось на 3 день клиническими проявлениями переостита: усиление локальной болезненности, отек окружающих тканей, гипертермия до 37,7 С, повышение СОЭ и количества лейкоцитов крови в динамике.

В данном случае регистрация ПМА раньше клинических симптомов позволила прогнозировать возникновение воспалительного заболевания.

Предлагаемый способ повышает точ- 5 ность диагностики гнойно-воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области на ранних стадиях до 98%, что позволяет своевременно и рационально

,514763856

проводить лечебно-профилактическиеотличающийся тем, что,

мероприятия,с целью повышения точности способа,

в сыворотке кроэи больных определяют

Формула изобретенияв динамике противомозговые антитела

и при повышении их титра по сравнеСпособ диагностики гнойно-воспали- ним с исходным уровнем на 1 1о§ги тельных заболеваний челюстно-лицевойболее диагностируют гнойно воспали.области путем исследования крови,тельное заболевание.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для диагностики гнойно-воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области. Целью способа является повышение точности диагностики. Поставленная цель достигается регистрацией в динамике противомозговых антител в сыворотке крови: заболевание диагностируется в случае повышения титра противомозговых антител по сравнению с исходным уровнем на 1LOG2 и более. Применение способа позволяет повысить точность диагностики гнойно-воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области в ранних стадиях до 98%.