Способ неспецифической профилактики кишечных инфекций Советский патент 1989 года по МПК A61K35/74 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в профилактике кишечных инфекций бактериальными препаратами

Цель изобретения - снижение побочных эффектов за счет уменьшения токсичности бактериального препарата

Дпя осуществления способа используют штамм Streptococcus faecium УДCgg, депонированный под номером ВКПМ № В-4054, или Streptococcus fae- calis депонированный под номером ВКПМ С В-4053, которые характеризуются следующими признаками

Штамм Streptococcus faeciiun УДСд выделен из кишечника здорового человека

Культурально-морфологические признаки

Клетки кокковидной формы, располагаются в мазке попарно или короткими цепочками, грамположительны, спор и капсул не образуют о При росте в жидкой среде дают равномерное помутнение и осадок. На плотной среде растут в виде непрозрачных сероватых колоний с ровными краями диаметром 1-2 мм„ Колонии легко снимаются с агара, равномерно эмульгируются физиологическим раствором хлористого натрия На среде Калины растет в виде голубых непрозрачных колоний с ровными краями.

Физиолого-биохимические признаки.

Аэроб при культивировании в жидкой среде при через 18-20 ч после посева в 1 мл среды вырастает 5x10 - 1x1 о жипих клеток о По мере

4 Jiii

:о

314

роста культуры снижается рН среды, кислотность по Тернеру за 24 ч культивирования достигает 250 - 27П Т„ Сбраживает мальтозу, целлобиозу.са- харозу, лактозу, маннит, салицин, маннозу, L-арабинозу; не сбраживает D-арабинозу, сорбит, рафииозу,рамно- зу, глицерин, ксилозу, инозит,дуль- цит. Штамм хорошо растет на средах с добавлением желчи о Не дает гемолиза при росте на кровяном агаре Антагонистические свойства Штамм обладает антагонистической активностью по отношению к стафило- кокку Klebsiella, Escherichia coli О,,, , Salmonella dublin, zonnae, .Proteus mirabilis,,

Лабораторная проверка показала

непатогенность штамма S faecium УДС.

. 6

для экспериментальных животных мы- гаей, крыс, морских свинок), а также для людей

Штамм Streptococcus faecalis Н вьщелен из китечника здорового человека

Культурально-морфологические признаки о

Клетки кокковидной формы, в мазке расположены попарно или короткими цепочками, грамположительны, спор и капсул не образуют При росте в жидкой среде образует рыхлый осадок и помутнение На плотной среде растет в виде сероватых колоний с ровными краями диаметром 0,5-2,0 мм„ Колонии легко снимаются с агара, равномерно эмульгируются в физиологическом растворе хлористого натрия. На среде Калины растет в виде темно-красных колоний с ровными краями о

1-

Физиолого-биохимические признаки Аэроб при культивировании в жидкой среде при 37°С через 18-20 ч пос ле посева в 1 мл среды вырастает 5x10 - 1,0x1 о живых клеток. По мере роста культуры снижается рН среды, кислотность по Тернеру за 24 ч культивирования достигает 250 - 260 Т, Штамм Hji сбраживает мальтозу, цеяп1 1лозу, сорбит, сахарозу, лактозу, маннит, салицин; не сбраживает арабинояу, рафинозу, рамнозу,

глицерин, ксилозу, инозит, ДУЛЬПИТ.

Не дает гемолиза при росте на кровяном агаре с Чтамм хорошо растет на средах с добавлением жетии,, Антагонисптческие свойства „

Q 15

, 20

30 35е 40

25

с-45 ч Q ее

Штамм обладает антагонической активностью по отношению к стафилококку Q , Rodublin, Sh,zonnae, P,inirabilis,

Лабораторная проверка показала непатогенность штамма В faecalis Н 2 для экспериментальных животных (мьпией, крыс, морских свинок), а также для людей.

Пример 1, Профилактика саль- монеллезной инфекции.

Беспородным мышам весом 18-20 г вводят перорально убитые нагреванием энтерококки S,faecium YACgg в дозе 3x10 микротел {2,5 х Ю микр тел/кг массы) на мышь в сутки. Контрольной группе мьппей вводят стерильный физиологический раствор. На 10-й день от начала эксперимента обе группы мышей заражают 10DCL Salmonella dublin перорально„ Об эффективности защиты судят по выживаемости опытных и контрольных мышей в течение 25 дн после заражения штаммом сальмонелл

В контрольной группе гибель 100% мышей наблюдалась на 9-й день после заражения, в опытной группе выживаемость животных на этот срок 25%,Данные эксперимента показывают, что пе- роральное введение убитых энтерококков перед заражением мьш1ей 10DCL Sodublin увеличивает процент выживаемости мьш1ей при экспериментальной сальмонеллезной инфекции

Л р и м е р 2, Влияние препарата убитых S,faecium УДСд на фагоцитарную активность лейкоцитов периферической крови человека.

Практически здоровому -человеку вводят препарат убитых энтерококков S,faecium УДС В виде взвеси в физиологическом растворе ежедневно, 1 раз в сутки, за 30 мин до еды в течение 6 дн, в дозе 5x10 микр, тел/кг массы тела, В ходе эксперимента параллельно оценивают токсичность препарата: наличие диспептических расстройств, аллергических или токсических проявлений, лихорадки Показатели оценивают на О- и 10-й день от начала эксперимента AkTHBHOCTb фагоцитов периферической крови оценивают методом люминолзависимой хеми- люминесценции, отмечено статически достоверное (,0l) увеличение активности фагоцитов при приеме препарата убитых энтерококков на 10-й

день от начала эксперимента по сравнению с фоновым уровнем. Прием препарата не сопровождается аллергическими, диспептическими или токсическими проявлениями; температура тела и общее самочувствие остается нормальным на всем протяжении эксперимента „

Таким образом, препарат убитых энтерококков S.faecium УДСд обладет выраженным стимулирующим эффектом на фагоцитарную активность лейкоцитов периферической крови человека Прием препарата не сопровождается токсическими и другими нежелателными проявлениями

ПримерЗ. Способ осуществляют в соответствии с примером 1, но в качестве бактериологического препарата используют взвесь убитых стрептококков S.faecalis Е в дозе 2,5x1 о микротел/кг массы

Гибель 100% мышей в контрольной группе - на 9-й день после заражения, в опытной группе выживаемость мьппей на этот срок 41,7%„

Таким образом, перорально введение убитых энтерококков штамма S. faecalis Н увеличивает процен выживаемости мышей.

При сравнительных исследовании препаратов убитых энтерококков S.faecium YACgg и липополисахари- да (ЛПС) Eocoli 055:В5 (прототип) установлено: среднее содержание им- муноглобулинсинтезирующих клеток в 1 мм lamina propria тонкой кипжи мышей, получавших препарат yбиtыx энтерококков, равно 3472i 81, в группе мышей, получавших препарат ЛПС 055:В5, - 2626 il54, в контрольной группе животных - 21244 101 клеток в 1 мм.

При анализе достоверности различий в содержании иммуноглобулинсин- тезирующих клеток между группами животных выявлены следующие закономерности: уровень иммуноглобулинпро- дуцентов в тонкой кишке мьшгей,получавших энтерококки, достоверно выше (р 0,01) аналогично показателя в группе мьш1ей, получавших ЛПС E.coli 055:В5 и животных контрольной группы (Р 0,ОП1 ).

Аналогичные результаты получены при исследовании препарата убитых

энтерококков P. aecaliR Н

гг

опытная

группа - 3I22i249 иммуноглобулинсин- тезирующих клеток в 1 мм тонкой кийки, группа, получавшая ЛПС, 2533,2f125 клеток, контрольная группа клеток 1

Полученные данные подтверждают более высокий защитный эффект исполь- 0 зуемьгх препаратов по сравнению с известным

П р и м е р 4о Изучение стимулирующего действия препарата убитых

5 энтерококков S faecalis Н,, проводят в соответствии с примером 2,

Отмечено статистически достоверное увеличение активности фагоцитов периферической крови при приеме пре0 парата Повышение температуры тела, диспептические, аллергические или другие нежелательные проявления ие наблюдаются

Таким образом, использование спо-

5 соба позволяет эффективно стимулировать общую антиинфекционную резис- тентность, местный иммунитет и фагоцитоз, не оказывая при этом токсического воздействия на организм в от0 личие от прототипа - ЛПС E.coli 055:В5.

35

Использование способа позволит снизить заболеваемость этой распространенной группой заболеваний и улучшить прогноз кишечных инфекций. Возможно применение препарата убитых энтерококков у широкого круга амбулаторных больных из групп риска забо дд левания кишечными инфекциями

Формула изобретеиия

Способ неспецифической профнпакс тики кишечных инфекций путем перо4Ь

рапьного введения бактериального препарата, отличающийся тем, что, с целью снижения побочных эффектов за счет уменьшения токсич-

5Q ности бактериального препарата, в качестве бактериального препарата используют инактивированный штамм Streptococcus faecium ВКПМ № В-А05А или Streptococcus faecalis ВКПМ

,с № В-4053, препарат вводят один раз в сутки в течение 5-7 дней в дозе 2х10 - 5х10 микр.тел/кг массы.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в профилактике кишечных инфекций бактериальными препаратами. Цель изобретения - снижение побочных эффектов за счет уменьшения токсичности бактериального препарата. Для осуществления способа используют штамм энтерококка STREPTOCOCCUS FAECIUM УДС₈₆ (ВКПМ N В-4054) или S. FAECALIS Н₂₂ (ВКПМ N В-4053). Для профилактики используют убитые культуры. Препарат вводят перорально по схеме: 1 раз в сутки в течение 5-7 дней в дозе 2^.10¹¹-5^.10¹¹ микр.тел / кг массы. Токсических и других нежелательных проявлений при приеме препарата не выявлено, в то же время отмечено увеличение активности фагоцитов периферической крови.