СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ ГЕМАДСОРБИРУЮЩИХ СВОЙСТ ВИРУСА ГРИППА Советский патент 1996 года по МПК C12N7/00 

Изобретение относится к вирусологии, в частности к лабораторному изучению вирусов гриппа.

Цель изобретения повышение чувствительности способа.

П р и м е р. 24-часовые монослойные культуры фибробластов эмбрионов кур (ФЭК), сформированные на дне пенициллиновых флаконов, отмывают от ростовой среды, инфицируют вирусом гриппа A/FPV/Rostock, проводя для этого в течение 1 ч контакта клеток с вируссодержащей жидкостью из расчета 0,0001 БОЕ/клетка вируса, дополняют объем жидкости до 2,0 мл средой 199, инкубируют 8 ч в термостате. Затем культуральную жидкость удаляют, монослой дважды промывают фосфатным буфером Дульбекко (рН 7,2), наносят на клетки 2,0 мл раствора ремантадина в конечной концентрации 2,3·10^-4 М и вслед за ним равный объем 0,8% -ной взвеси эритроцитов на этом же буфере. На контрольные культуры наносят 4,0 мл 0,4% -ной взвеси эритроцитов. После 20 мин инкубации при комнатной температуре взвесь эритроцитов сливают и монослой клеток трижды промывают фосфатным буфером, не содержащим ионы кальция и магния. Далее во флаконы вносят по 0,4 мл бидистиллированной воды и оставляют на холоде на 2 ч. Количество гемоглобина определяют хемилюминесцентным способом, используя в качестве регистрирующего прибора жидкостный сцинтилляционный спектрометр. В сцинтилляционные флаконы вносят 2,0 мл NaOH-фосфатного буфера (рH 12,0), добавляют 10^-3 М перекиси водорода в объеме 1,0 мл, замеряют фоновую интенсивность свечения, вводят исследуемую пробу и снова снимают показания.

Получают 1,7-кратный прирост интенсивности хемилюминесценции в сравнении с инфицированными культурами, не обработанными препаратом, соответствующей увеличению количества гемоглобина, вышедшего из прикрепившихся к ткани эритроцитов (см. таблицу). Использование способа позволяет повысить чувствительность способа за счет улучшения адсорбции эритроцитов на поверхности инфицированных клеток.

Изобретение относится к вирусологии, в частности к лабораторному изучению вирусов гриппа. Цель изобретения - повышение чувствительности способа. Клеточный пласт инфицируют вирусом, затем проводят предобработку инфицированного монослоя клеток раствором гидрохлорида α -метил-1-аминометиладамантана (ремантадина) в концентрации 2,3 х 10^- 4 - 4,5 х 10_- ⁴ М, после чего ставят реакцию гемадсорбации и результаты оценивают по хемилюминесценции гемоглобина. Чувствительность увеличивается в 1,7 раз. 1 табл.

СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ ГЕМАДСОРБИРУЮЩИХ СВОЙСТ ВИРУСА ГРИППА путем инфицирования клеточного пласта, инкубации, проведения реакции гемадсорбции и оценки результатов по хемилюминесценции гемоглобина, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности способа, на инфицированные клетки предварительно наносят раствор гидрохлорида α -метил-1-аминометиладамантана в концентрации 2,3 х 10^- 4 4,5 х 10^- 4 М.