Изобретение относится к новому химическому азосоедипению, а именно - 2-(3 -хлор-1 ,2 ,4 -триазолйл-5 .-азо)- 1 ,-8-диоксинафталин-3,6-дисульф6кислЬ- ты динатриевой соли формулы
-р. .ОН ОН
- tix NI I(I)
ll N-ISIH V,, NaOjSSOjNa
в качестве реагента для обнаружения белков.
Целью изобретения является поиск новых реагентов для обнаружения белков в ряду азосоединений, обладающих улучшенными свойствами, как то: упрощение техники проведения анализ а обнаружения белков, сокращение стадии отмывки реагента.
Пример 1. 3,1 г (0,02 моль) 3-хлор-5-амино-1,2,4-триазола растворяют в16млНС1(1:1)и1,4г : (0,02. моль) NaNG растворяют в 3,0 мл воды. Растворы охлаждают до 0-2°С. Затем к раствору 3-хлор-5-амино-1,2,4- триазола приливают при интенсивном перемешивании раствор NaNO. Полученное диазосоединение отделяют на воронке Бюхнера, на воздухе. Выход продукта 0,8 г. Получившийся в ходе З-хлор-5-диазо- 1,2,4-триазол представляет собой порошок бледно-желтого цвета, легкий, рыхлый, обладает взрывчатой способностью.
Для реакции азосоединения 1,820 г (0,005 моль) динатриевой соли хромо- троповой кислоты растворяют в 10 мл
СП KJ
со
воды при нагревании. Раствор охлаждают смесью льда и соли до и приливают к нему при перемешивании 0,840 г (0,005 моль) 3-хлор-5 диазо- 1,2,4-триазола в 15 мл воды, следя за тем, чтобы температура реакционной сМеси Не превышала . После прибавления диазосое инения переме- шивание продолжают в течение часа. Выпадает осадок ярко-красного цвета. Смесь оставляют на 16-18 ч. Затем выпавший осадок отделяют. Продукт сушат на воздухе. Выход 1,5 г, (61,1%) Для анализа вещество перекристаллизовывают из смеси этанол :вода ;2:1.
Результаты элементного анализа:
Найдено,%: С 24,03; Н 3,25.
Вычислено, %: С 23,94; Н 3,02.
Результаты.неоднократно проведен- ных анализов показывают, что азосое- динение выделяется в виде кристаллогидрата с шестью молекулами воды и отвечает общей формуле
Na CtjH S ClNsOgi eHiO.
П р и м е р 2. Электрофорез бедков (рибонуклеазы, гиСтона) в подиакрил- амидном геле (ПЛАТ) проводят в труб- .ках диаметром 5 мм и высотой 100 мм.
После электрофореза гели окрашива- ют 0,2%-ным раствором динатриевой соли 2-(3 -хлор-1 ,2,4 -триазолил- 5 -азо)-1,8-диоксинафталин-3,6-ди- сульфокислоты в смеси этанол - вода - «уксусная кислота (5:5:1). Параллельно
для сравнения гели окрашивают 0,2%-ными растворами амидового черного 10Б и кумасси голубого R-250 в смеси этанол - вода - уксусная кислота (5:5:1).
Время отмывания красителей с гелей и расход растворителя даны в таблице.
Применение реагента (I) для окрашивания белков в полиакриламидных гелях позволяет определять белки при концентрации и не требует отмывки геля от избытка красителя, что очень удобно при серийном анализе белков.
В случае известных красителей: амидового черного 10Б и кумасси голубого R-250, необходимо длительное время для отмывания красителя с поли- акриламидного геля и большой расход уксусной кислоты, что значительно удлиняет время анализа белков.
Формула изобретения
2-(3 -Хлор-1 ,2,4 -триазолш1-5 - азо)-1,8-диоксинафталин-З,6-дисуль- фокислоты динатриевая соль формулы
Р1 ..., ОНОН
vjlsjJN
fV-N-N-f N-NH /Ц. ,„
№0з8ЗОзНа
в качестве, реагента для обнаружения белков.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| Ди-натриевая соль 2-(1,2,4-триазолил-3-азо)-1,8-диоксинафталин-3,6-дисульфокислоты в качестве реагента для обнаружения белков при электрофорезе в полиакриламидном геле | 1980 |
|
SU935506A1 |
| 2,7-Бис-(3 @ -карбокси-1 @ ,2 @ ,4 @ -триазол-5 @ -азо)-1-окси-8-аминонафталин-3,6-дисульфокислота в качестве реагента для обнаружения белков в полиакриламидных гелях | 1989 |
|
SU1675308A1 |
| 2-(5-Нитротиазолил-2-азо)фенолсульфокислота в качестве реагента для обнаружения белков в полиакриламидном геле | 1985 |
|
SU1286598A1 |
| 5-(3-Диэтиламино-2-оксифенилазо) -3-хлор-1,2,4-триазол в качестве реагента для фотометрического определения кобальта | 1978 |
|
SU697512A1 |
| СПОСОБ ПРОВЕДЕНИЯ АЗОСОЧЕТАНИЯ ПРИ СИНТЕЗЕ БИСАЗОСОЕДИНЕНИЙ ХРОМОТРОПОВОЙ КИСЛОТЫ | 1969 |
|
SU239472A1 |
| Способ получения нерастворимых в воде азокрасителей | 1926 |
|
SU11019A1 |
| О П И С А Н И ИЗОБРЕТЕНИЯ | 1973 |
|
SU405071A1 |
| КРАСИТЕЛИ НА ОСНОВЕ 3,5-ДИНИТРОАНИЛИНА И 2-АМИНО-4,6-ДИНИТРОТОЛУОЛА | 2004 |
|
RU2273652C1 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АКТИВНЫХ АЗОКРАСИТЕЛ^Й::,^.:i;.;- и:}-I ;J ' ->&'f ' .| '" • ' л ' | 1965 |
|
SU167915A1 |
| Способ получения орто-окси-азокрасителей | 1927 |
|
SU13989A1 |
Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности ди-NA-соли 2-(31-хлор-11,21,41-триазолил-51-азо)-1,8-диоксинафталин-3,6-дисульфокислоты, применяемой в качестве реагента для обнаружения белков. Цель - создание нового более эффективного реагента для указанного назначения. Синтез ведут диазотированием 3-хлор-5-амино-1,2,4-триазола NANO2 в среде воды в присутствии HCL с последующей обработкой выделенного диазосоединения ди-NA-солью хромотроповой кислоты при 0-2°С. Выход 61,1%, брутто-ф-ла NA2C12H6S2CLN5O8.6H2O. Этот реагент для окрашивания белков в полиакриламидных гелях обеспечивает необходимое окрашивание при концентрации белков 10-5 - 10-6 М и не требует отмывки геля от избытка красителя, как в известном случае. 1 табл.
Редактор И.Горная
Составитель Г.Коннова
Техред А.Кравчук Корректор э.Лончакова
Заказ 6036/24
Тираж 352
ВНИШ1И Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Подписное
| Raymand S,, Wang V.J | |||
| Preparation and properties of acrylamide gel for use electrophoresis | |||
| - Anal | |||
| Biochem | |||
| Пробочный кран | 1925 |
|
SU1960A1 |
| Печь для непрерывного получения сернистого натрия | 1921 |
|
SU1A1 |
| Ситценабивная машина | 1922 |
|
SU391A1 |
