Изобретение относится к новому химическому соединению, конкретно к 2-(5-нитротиазолил-2-азо)-фенол сульфокислоте, которая может быть использована в качестве реагента для обнаружения белков.
Цель изобретения - новые реагенты позволяющие снизить время обнаружения белков при их электрофорезе в по лйакриламидном геле.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1. Диазотирование 2-амино-5-нитротиазола.
В круглодонную колбу объемом на 500 мл, снабженную механической ме- иалкой, капельной воронкой и термометром, помещают 14,7 г (0,1 м) 2-амино-5 нитротиазола, растворенного в 100 мл концентрированной орто- фосфорной кислоты. К смеси приливают 80 мл концентрированной азотной кислоты, раствор охлаждают до (-2)-0°С и медленно в течение 15-20 мин, по каплям приливают 6,9 г (0,1 м) нитрита натрия, растворенного в минимальном количестве воды. После прибавления всего нитрита натрия раствор перемешивают 10 мин. Полученный диазораствор используют для сочета- Ния с п-фенолсульфокислотой. I Для проведения реакции азосочета- ния к 19,6 г (0,1 м) п-фенолсульфо- г :исло.ты, растворенной в 300 мл водного спирта (1:1), при охлаждении до (-2) и перемешивании приливают Небольшими порциями в теченце 30 мин диазораствор 2-амино-5-нитротиазола. При этом выпавший мелкодисперсный осадок красно-желтого цвета оставляют на ночь при охлаждении. Получен- ный продукт очищают переосаждением из этилового .спирта водой, сушат на воздухе. Выход 15 г (41,4%). Для анализа полученное вещество перекристал лизовывают из муравьиной кислоты. Найдено, %: С 29,62; Н 2,07. С HgS,jN Og H20
Вычислено, %: С 31,03; Н 2,29. И р и м е р 2. Электрофорез белко (рибонуклеазы, гистона) в полиакрил- амидном геле (ПААГ) проводили в трубках диаметром 5 мм высотой 100 мм. После электрофореза гели окрашивали 0,2%-ным раствором 2-(5-нитротиазо- лил-2-азо)-фенолсульфокислоты в смеВНИИПИ Заказ 7681/24
Произв.-полигр. пр-тие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4
си этанол - вода - уксусная кислота (5:5:1).
Параллельно для сравнения гели окрашивали 0,2%-ными растворами ами- до-черного 10Б и кумасси голубого R-250 в смеси этанол - вода - уксусная кислота . (5 :5 : 1). Затем гели, окрашенные растворами амидо-черного 10Б и кумасси голубого R-250 отмывали 7%-ным раствором уксусной кислоты. Во всех случаях белки определяли по появлению окрашенных зон.
Для гелей, окрашенных раствором 2-(5-нитротиазолил-2-азо) фенолсульфо- кислоты, не требуется дополнительная отмывка красителя, что делает удобным его применение при серийном анализе (см, таблицу).
2-(5-Нитро- тиазолил-2-азо)- фенолсульфо- кислота
Амидовый черный 10Б
Кумасси голубой R-250
15-20 200-300
15
200-300
Определяемая с помощью 2-(5-нитро- тиазолил-2-азо)-фенол сульфокислоты белков составляет
концентрация 10 моль/л.
ормула изо,брет-е1 ия
2-(5-Нитротиазолил-2-азо)-фенол- сульфокислота формулы
ОН
. - .
80зН -
в качестве реагента для обнаружения белков в полиакриламидном геле.
Тираж 371
Подпи сное
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| 2-(3 @ -Хлор-1 @ ,2 @ ,4 @ -триазолил-5 @ -азо)-1,8-диоксинафталин-3,6-дисульфокислоты динатриевая соль в качестве реагента для обнаружения белков | 1988 |
|
SU1512970A1 |
| 2,7-Бис-(3 @ -карбокси-1 @ ,2 @ ,4 @ -триазол-5 @ -азо)-1-окси-8-аминонафталин-3,6-дисульфокислота в качестве реагента для обнаружения белков в полиакриламидных гелях | 1989 |
|
SU1675308A1 |
| Ди-натриевая соль 2-(1,2,4-триазолил-3-азо)-1,8-диоксинафталин-3,6-дисульфокислоты в качестве реагента для обнаружения белков при электрофорезе в полиакриламидном геле | 1980 |
|
SU935506A1 |
| 2-(0-Оксифенилазо)-5-нитротиазол в качестве реагента для фотометрического определения палладия | 1978 |
|
SU771096A1 |
| Способ получения 3(или 5)-метил-1 @ -пиразол- @ 5(или 3)-азо-1 @ -2-нафтол-3,6-дисульфокислоты | 1984 |
|
SU1182036A1 |
| Проявляющий реагент для определения севина и @ -нафтола в тонкослойной хроматографии | 1988 |
|
SU1642374A1 |
| ГАЛОГЕНИДОСЕРЕБРЯНЫи ФОТОГРАФИЧЕСКИЙ МАТЕРИАЛ ДЛЯ СПОСОБА ОТБЕЛИВАНИЯ КРАСИТЕЛЕЙСЕРЕБРОМ | 1970 |
|
SU259741A1 |
| Способ определения танинофильности белков | 1988 |
|
SU1661182A1 |
| Способ получения 3(или 5)-метил-1Н-пиразол- @ 5-(или 3)-азо-1 @ -2-нафтола | 1986 |
|
SU1361145A1 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АЗОКРАСИТЕЛЕЙ | 1968 |
|
SU435615A1 |
Изобретение касается замещенных тиазолинов, в частности ,2-(5 нитро- тиазолш1-2-азо)-фенолсульфокислоты (ТФК), которая может быть реагентом для белков в полиамидном геле. Для выявления соединений указанного класса, позволяющих сократить время обнаружения белков при электрофорезе, в полиамидных гелях было получено новое замещенное тиазолина 1. Его получение ведут нитрозированием 2- амино-5-нитротиазола в среде концент- рировднной Н Р0 с помощью NaNOj в присутствии HNO с последующим азо- сочетанием с п-фенолсульфокислотой, растворенной в водно этаноле, при охлаждении до (-2)-0 С. ТФК очищают, переосаждением из этанола. Вькод 41,4%. При использовании ТФК для гелей, которые они окрашивают, не требуется время для отмывания фона красителя в противоположность известному - с красителем амидовым черным ЮБ нужно 15-20 ч при высоком расходе 7%-ного раствора -200-300 мл. Определяемая с помощью ТФК концентрация белков составляет 10 -10 моль/л. 1 табл. с 3 сл ьо 00 Од СП 00
| Raymand S., Wang I.-P | |||
| Preparations.and propertes of acrylamide gel for use in electrophoreses | |||
| - Anal | |||
| Biochem | |||
| Пробочный кран | 1925 |
|
SU1960A1 |
| Ситценабивная машина | 1922 |
|
SU391A1 |
