Изобретение относится к получению новых производных дистамицина А, а именно поли-4-аминопиррол-2-карбокс- 1амидопроизводных общей формулы
I Н
,
N I I О
сн.
где п 0, 1 или 2
R4 - группа a) -CON(NO)R3, где
R з С,-С4-алкил, незамещенный или замещенный галогеном , или
б) -CO(CH2)mR4, где
R,j. - галоген, оке- , иранил,метилоксира- нил, азиридинил; m 0 или 2,
00
ел
см
- группа -(
x%
23 nv
(СН2)ГС
.№1
СИ,
или
MH.
при условии,
что, когда п 1, Кг - не мо
ЫН жет быть-(СН2)
NH2
в форме соли с хлористо-водородной кислотой, обладающих противовирусной и противоопухолевой активностями.
Целью изобретения является разра- « ботка на основе известных методов
способа получения новых соединений, обладающих ценными фармакологическими свойствами при низкой токсичности.
Пример 1. К охлаждаемому льдом раствору дигидрохлорида }-/N- -метил-4-/Н-метил-4-аминопиррол-2- -карбоксамидо/пиррол-2-карбоксамидо/ пропионамидина (0,404 г) в 5 мл ДМ и 320 мг 2.4,5-трихлорфенил-К-метил- -N-нитрозокарбамата добавляют по каплям раствор диизопропилэтиламина (0,164 мл) в 8 мл ДМФ., Полученный раствор перемешивают в течение 1 ч при О С. Реакционную смесь концентрируют в вакууме, остаток очищают методом колончатой хроматографии и получают 251 мг гидрохлорида /9 -/N- -метил-4-/Н-метил-4-/3-метил-3-нит- розоуреидо/пиррол-2-карбоксамидо/пиррол- 2-карбоксамидо/пропионамидина.
По аналогичной методике получены следующие соединения:
гидрохлорид -/N-метил 4 /Н-ме- тил-4-/3-/2-хлорэтил/-2 нитрозоуреи- до/пиррол-2-карбоксамидо/пиррол-2-- -карбоксамидо/пропионамидина;
гидрохлорид-3-/М-метил-4-/М-метил- -4-/З-метил-3-нитрозоуреидо/пиррол- -2-карбоксамидо/пиррол-2-карбоксами- до/пропилдиметиламина;
гидрохлорид 3-/К-метил-4 /N-метил- -4-/3-/2-хлорэтйл/-3 нитрозоуреидо/- пиррол-2-карбоксамидо/пиррол-2--карб- оксамидо/пропилдиметиламина
гидрохлорид 3-/М-метил-4 /№-метил- -4-/Н-метил-4-/3-метил-3-нитрозоуреи- до/пиррол-2-карбоксамидо/пиррол-2- -к рбоксамидо/пиррол-2-карбоксамидо/- пропилдиметиламина i
гидрохлорид 3-/Н-метил-4-/Ы-метил- -4-/М метил-4-/3-/2 -хлорэтил/-3-нит- розоуреидо/пиррол-2-карбоксамидо/пир0
0
с
0 5 5
0
5
рол-2-карбоксамидопиррол-2-карбоксами до / пр о п ил Д1 гме тил амин а ,
гидрохлорид-Н-/деформил-М-/М ме- тил-4-/3-метил-3-нитрозоуреидо/пир- рол-2-карбоксамидо дистамицина А ,
гидрох-лорид N-деформил-Ы-/М-метил- -4-/3-/2-хлорэтил/-3-нитрозоуреидо/- пиррол-2-карбоксамидо/дистамицина А ,
3-/Ы-метил-4-/М-метил-4-/М-метил- -4- /N-метил-Д-/З-метил-3-нитрозоуреи- до/пиррол-2-карбоксамидо/пиррол-2- -карбоксамидо/пиррол-2-карбоксамидо/- пиррол-2-карбоксамидопропилдиметил- амина
гидрохлорид 3-/N-M6гил-4-/Н-метил- -4-/Ы-метил-4-/М-метил-4-/3-/2-хлор- этил/-З-нитрояоуреидо/пиррол-2-карб- оксамидо/пиррол-2-карбоксамидо/пир- рол-2-карбоксамидо/пиррол-2-карбокс- амидо про пилдиме тиламин а.
Пример 2. К раствору (2R, ЗК)-3 метилоксиранкарбоновой кислоты (765 мг) в сухом ТТ« (20 мл), охлажденному до температуры -20°С, добавляют М-метилморфолин (0,825 мл) и затем пивалоилхлорид (0,920 мл). Полученную суспензию перемешивают при -20°С в течение 20 мин, затем смесь добавляют к охлажденному раствору 2,6 г дигидрохлорида 3-/№-метил-4-/ Ы-метил-4-М-метил-4-амино-пиррол- -2-карбоксамидо/пиррол-2-карбоксами- до/пиррол-2-карбоксамидо/пропилдиме- тиламина в ДМФ (50 мл) и бикарбоната натрия ( г). Смесь перемешивают в течение 30 мин при 0°С, затем в течение 4 ч при комнатной температуре. Растворители выпаривают в вакууме досуха, остаток хроматографируют на SiO (растворитель CHClj 100/CH OH 100/НС12н О и получают 1,4 г гидрохлорида 3-/М-метил-4-/№-метил-4-/Ы- -метил-4-/3-метил/2Н,ЗК/оксиранкарб- оксамидо/пиррол-2-карбоксамидо/пир- р ол- 2-к ар б ок с амид о /пир рол- 2- кар бок с- амидо/пропилдиметиламина.
По аналогичной методике получены следующие соединения:
гидрохлорид М-деформил-N-/N-метил- -4-/оксиранкарбоксамидо/пиррол-2- -карбоксамидо/дистамицина А ,
гидрохлорид 3-/Ы-метил-4-/Н-метил- -4-/Ы-метил-4-/Ы-метил-4-/оксиранкарб- оксамидо/пиррол-2-карбоксамидо /пир- рол-2-карбоксамидо/пиррол-2-карбокс- амидо/пиррол-2-карбоксамидо/пропилдиме тил амина .
51
гидрохлорид-3-/М-метил-4-/М-метил- -4-/М-метил-4-/циклопропилкарбоксами- до/ пиррол-2-карбоксамидо/пиррол-2- -карбоксамидо/пиррол-2-карбоксамидо/- пропилдиметиламина }
гидрохлорид Ы-деформил-Ы-/Ы-ме- тил-4/2-хлорэтилкарбоксамидо/ пиррол- -2-карбоксамидо/дистамицина А;
гидрохлорид 3-/М-метил-4-/N-метил- -4-/М-метил-4-/1-/азиридин/карбокс- амидо/пиррол-2-карбоксамидо/пиррол- -2-карбоксамидо/пиррол-2-карбоксами- до/ пропил диметила мина ,
гидрохлорид №-деформил-Ы/М-метил- -4-/1-/-азиридин/карбоксамидо/пиррол- -2-карбоксамидо/дистамицина AJ
гидрохлорид 3-/М-метил-4-/N-метил- -4-/М-метил-4-/М-метил-4-/1-а1Иридин/ карбоксамидо/пиррол-2ткарбоксамидо/- пиррол-2-карбоксамидо/пиррол-2-карб- оксамидо/пиррол-2-карбоксамидо/про- пилдиметиламина.
Сокращения ТГ№ и ДМФ означают соответственно тетрагидрофуран и диме- тилформамид.
Соединения согласно общей формуле проявляют значительную эффективность в подавлении репродуктивной активности патогенных вирусов и в защите кле- ток ткани от вирусной инфекции.
Например, они проявляют активность против ДНК-вирусов, например вирусов лишая, вирусов простого лишая и опоясывающего лишая, и аденовирусов, а также против ретровирусов, например вирусов саркомы и лейкемии. Вирусы лишая, респираторно-синцитиальные вирусы были испытаны в жидкой среде. Последовательные двукратные разбавле- ния соединений от 200 до 1,5 мкг/мл были распределены (по два) в количестве 0.1 мл/лунку в 96 микропластинках с лунками для культуры ткани.
Суспензии клеток (2 х 10 клеток/ /мл) незараженных для проверки цито- токсичности или зараженных в количестве приблизительно 5 х 10 ЭТС1В 0 вируса/клетку были сразу же добавлены в количестве 0,1 мл/лунку. После инкубации в течение 3-5 дней при температуре 37°С в атмосфере 5% С0й культуру клеток оценивали путем микроскопического наблюдения и определяли максимальную толерантную дозу (МксТД). а также минимальную подавляющую концентрацию (МПК). МксТД - максимальная концентрация соединения, допускающая рост монослоев, аналогич1856
ный контрольным по плотности и морфологии, МПК - минимальная концентрация, при которой наблюдается понижение цитопатического действия по сравнению с инцифированными контролными культурами.
Соединения считают активными, если их показатель активности, вычисленный отношением МксТД/МПК 2.
Предлагаемые соединения также проявляют цитостатические свойства по отношению к опухолевым клеткам, в результате чего их можно использовать для подавления роста различных опухолей.
Активность некоторых соединений общей формулы идентифицированных внуренним кодом в сравнении с дистами- цином А, который является ближайшим и наиболее изученным известным соединением, приведены в таблице.
Приведенные в таблице соединения оценивались по их цитотоксичности (что является выражением противоопухолевой активности) на лейкемичных клетках L 1210 мышей.
Клетки брали из опухолей in vivo и формиловали в клеточной культуре. Клетки использовались до десятого цикла размножения. Цитотоксичность определяли подсчетом выживших клеток после лечения в течение 4 и 48 ч выращивания в безлекарственной среде. Процент роста клеток в обработанных культурах сравнивали с аналогичным показателем для контроля. Используя кривые доза - ответная реакция, рассчитывали значение Ы)0(дозы, инги- бирующие 50% клеточного роста в сравнении с контролем).
Соединения
ЬП50(мг/мл), клетки лейкемии L1210
амицин-А 25289 24813 24707 24663 24599
180
0,045
8,8
70
16
7
25289: М-деформил-М-/К-метил- -4-/оксиранкарбоксами- до/пирр ол-2-карбок сами- до/дистамицин-А гидрохлорид
5
10
15
FCE 24663:
FCE 24813: А/М-метил-4-/N-метил- -4-/3-/2-хлорэтил/-3- -нитрозоуреидо /пиррол- -2-карбоксамидо/пиррол- -2-карбоксамидо/пропи- онамидина гидрохлорид FCE 24707: 3-/М-метил-4- /N-метил- -4-/М-метил 4-/3-метил- -3-нитрозоуреидо/пир- .рол-2-карбоксамидо/пир- рол-2-карбоксамидо/пир- рол-2-карбоксамидо /про- пил-диметиламина гидро- хлбрид.
3-/N-MeTHJi-4-/ N-метил- -4-/3-/2-хлорэтил/-3- , -нитр о з оуреидо/пирр ол- -2-карбоксамидо/пиррол/- -2-карбоксамидо/пропил- диметиламина гидрохло- рид
FCE 24599: 3 /М-метил-4-/М-метил- /М-метил--4-/Н-метил-4- -3-/2-хлорэтил/-3-нит- 25 Iрозоуреидо/пиррол-2I-карбоксамицо/пиррол-2-карбоксамидо/пиррол-2--карбоксамидо/пропил- -диметиламина гидрохло- 30 РИД.
ормула изобретения
Способ получения гидрохлоридов35
оли-4-аминопйррол-2-карбоксамидопро-
зводных обией Формулы
н
20
HN.
TV
гь
сн,
де п 0, 1
,Ъ
и
н
/N
О
СН3
или 2
N
Н
-КFU 40
П СН3
О
R. группа a) -CON(NO)R где
R3
С( Сл
-алкил, незамещенный или замещенный галогеном , или
б) -СОССН), где Rq. - галоген, окс- иранил, метилокс- иранил,азиридинил; m 0 или 2,
группа -(СН2)3
Ri
СИ
-(CH2) i6 CHi
или
15
-(
,NH NH
при условии, что, когда п. 1 , не может быть
Ra-(СН2)ГС
мн
NH2
отличающийся тем, что дигидрохлорид амина общей формулы
,N
I I
-Н
/N
N I
СН
о
N I
сн,
о
N
.п сн
н ы-я2
о
где п и R „ имеют указанные значения, подвергают взаимодействию с соединением общей формулы
Z - R,
где R,| - имеет, указанные значения ,
Z - трихлорфенокси или пивалоил- оксигруппа.
Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности получения гидрохлоридов поли-4-аминопиррол-2-карбоксамидопроизводных общей ф-лы @ где N=0 или 1, или 2
R1- а) -C(O)-N(N=O)R3 при R3-C1-C4-алкил или C1-C4-алкилгалоген
б) -C(O)-(CH2)M-R4 при R4-галоген, оксиранил, метилоксиранил, азиридинил и M=0 или 2
R2- а) -(CH2)3-N(CH3)2
б) -(CH2)2-C(NH2)=NH при условии, что когда N=1, то R2≠ "б", обладающих противовирусной и противоопухолевой активностью. Цель - создание новых и более активных при малой токсичности веществ указанного класса. Синтез ведут введением в соответствующий аминопиррол группы R1 с помощью ZR1, где Z-трихлорфенокси- или пивалоилоксигруппа. Новые соединения активны, например, в дозе ЕД50=0,045 мг/мл для N-деформил-N-[N-метил-4-(оксиранкарбоксамидо)пиррол-2-карбоксамидо]дистамицина-А гидрохлорида против 180 мг/мл для дистамицина-А. 1 табл.
| Nature, 203, 1064 (1964). |
