Способ получения гидрохлоридов производных дистамицина А Советский патент 1990 года по МПК C07D207/34 

Н RHNL А

N п I О

сьц

Н

N

f& v &

сн., сьь

СН3

где R - группа a) -TON(NO)P1t где R, - С,-С4-алкил, незамещенный или (замещенный галогеном или б) -СО(СН) - R г, где Р-j - галоген, оксиранил, метилоксиранил, азиридинил, цикло- пропил, m 0,1 или 2, в форме соли с хлористоводородной кислотой, обладающих противовирусной и противоопуН

N

- v &

Н

.м-снг-см2-с

МНо

NH

сьь

СН3

холевой активностью. Цель - разработка способа получения новых соединений, обладающих указанньмисвойствами. Получение ведут реакцией хлористоводородной соли N-деформилдистамицина с соединением ф-лы Z-P, где Р указано выше, Z -трихлорфенокси- или пивалоилоксигруппа. 1 табл.

(Л

СЛ

со

СП

00

J

оо

Изобретение относится к гетероциклическим соединениям, в частности к получению новых производных дистамицина А ф-лы @ где R - группа а) -CON(NO)R₄, где R₁-C₁-C₄-алкил, незамещенный или замещенный галогеном или б)-CO(CH₂)_M-R₂, где R₂ - галоген, оксиранил, метилоксиранил, азиридинил, циклопропил

M=0,1 или 2, в форме соли с хлористоводородной кислотой, обладающих противовирусной и противоопухолевой активностью. Цель - разработка способа получения новых соединений, обладающих указанными свойствами. Получение ведут реакцией хлористоводородной соли N - деформил дистамицина с соединением ф-лы Z-R, где R - указано выше

Z - трихлорфенокси- или пивалоилоксигруппа. 1 табл.

Изобретение относится к получению новых производных дистамицина А общей Формулы

И

II

RUN

. N.NVi

V/ W v rN CHrCH cC

П1, СН, СИ т

кнг

NH

где R группа a) -CON(NO)R1t где R, - Ст-С -апкил, незамещенный или замещенный галогеном .

или б) -СО(СНЛ )т-Кг, где RA - галоген, оксиранил, метилоксиранил, азиридинил, циклопропил, m « 0,1 или 2,

в форме соли с хлористоводородной кислотой, обладающих противовирусной и противоопухолевой активностью.

см

10

15

20

Целью изобретения является разработка на основе известных приемов способа получения новых соединений, обладающих ценными фармакологическими свойствами при низкой токсичности.

Пример 1. В охлаждаемый льдом раствор N-деформилдистамицин А гидрохлорида (0,132 г) в 2 мл диме- тилформамида (ДМФ) и 78 мг 2,4,5- -трнхлорфенил-Н-метилнитрозокарба- мата по каплям добавляют раствор диизопропилэтиламина (0,041 мл) в 2 мл ДМФ. Полученный раствор перемешивают в течение 40 мин при 0°С. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и остаток очищают с помощью колоночной хроматографии, в результате получают 62 мг М-деформил-М-(Н - -метил-N-нитрозокарбамоилдистами- цин А гидрохлорида.

Аналогично получают N-деформил- (2-хлорэтил)- -нитрозокар- бамоил -дистамицин А гидрохлорид. Пример 2. В раствор (2Р, ЗК)-3-метилоксирана карбоновой кислоты (153 мг) в безводном тетрагид- рофуране (ТГФ) 4 мл, охлажденный до -20°С, добавляют N-метилморфолин (0,165 мл), а затем пивалоилхлорид (0,184 мл). Полученную суспензию перемешивают при -20°С в течение 20. мин и затем смесь вливают в охлажденный раствор N-деформилдистамици- на А (500 мг) в ДМФ (10 мл) и NaHCO} (80 мг). Смесь перемешивают в течение 30 мин при 0°С и затем в течение 4 ч при комнатной температуре. Растворители выпаривают в вакууме досуха и остаток хроматографируют на двуоки- си кремния (растворитель: СНС1Э(80)/ (20)) и получают 280 мг N-де- 4 формил-N- 3-метил-(2К,ЗЮ-окснран-1- -карбонил }-дистамицин А гидрохлорида

25

30

35

Н-деформил-М-(оксиранк -дистамицин А гидрохлорид

Предлагаемые соединени тельной степени подавляют тивную активность патоген и защищают клетки тканей инфекций. Например, они п тивность против ДНК-вирус как вирусы лишая и аденов пример простого и опоясыв шая j против ретровирусов, вирусы саркомы, и лейкеми

Так, например, вирусы пираторные синсициальные пытывали следующим образо среде. Серию двойных разв динений от 200 до 1,5 мкг деляют на 96 микропластин вой культуры по 0,1 мл/пл

Суспензии клеток(2105 неинфецировэнные для конт цитотоксичность или инфец 5 -10 JTC1D вирус/клетка, но добавляют в количестве тина .

Через 3-5 дней инкубир 37°С в 5% СОj культуры по микроскопическому исследо определили максимальную т дозу (МТД) и минимальную щую концентрацию (МИК). М ляет собой максимальную к соединения, которая допус монослоев, аналогичных ко по плотности и морфологии ставляет собой минимальну рацию, которая определят цитопатологического эффек нению с инфицированными к 1проба ми.

Соединения считают акт 1да их индекс активности р

Аналогично получают следуюшие сое- д, как отношение МТД/МИК , 2.

Предлагаемые соединени цитостатические свойства холевых клеток, в результ можно использовать для за роста различных опухолей.

динения:

и-деформил-И-(2-хлорэтилкарбонил) -дистамицин А гидрохлорид, т.пл.160 С (разложение);

К-деформил-К-(3-метилоксир(анкар- бонил)-дистамицин -А гидрохлорид,

N-деформил-К-(циклопропилкарбо- нил)-дистамицин А гидрохлорид;

Н-деформил -Ј)-(азиридин)карбонил дистамицин А гидрохлорид1,

К-деформил-И-(бромметилкарбонил)- -днстамицин А гидрохлорид;

М-деформил-N-(хлорметилкарбонил)- -дистамицин А гидрохлорид;

0

5

0

5

0

5

Н-деформил-М-(оксиранкарбонил)- -дистамицин А гидрохлорид.

Предлагаемые соединения в значительной степени подавляют репродукт тивную активность патогенных вирусов и защищают клетки тканей от вирусных инфекций. Например, они проявляют активность против ДНК-вирусов, таких как вирусы лишая и аденовирусы, например простого и опоясывающего лишая j против ретровирусов, таких как вирусы саркомы, и лейкемии.

Так, например, вирусы лишая и респираторные синсициальные вирусы испытывали следующим образом в жидкой среде. Серию двойных разведений соединений от 200 до 1,5 мкг - мл распределяют на 96 микропластин для тканевой культуры по 0,1 мл/пластину.

Суспензии клеток(2105 iлеток/мл), неинфецировэнные для контроля на цитотоксичность или инфецированные 5 -10 JTC1D вирус/клетка, немедленно добавляют в количестве 0,1 мл/пластина .

Через 3-5 дней инкубирования при 37°С в 5% СОj культуры подвергли микроскопическому исследованию и определили максимальную толерантную дозу (МТД) и минимальную ингибирую- щую концентрацию (МИК). МТД представляет собой максимальную концентрацию соединения, которая допускает рост монослоев, аналогичных контрольным по плотности и морфологии. МИК представляет собой минимальную концентрацию, которая определят снижение цитопатологического эффекта по сравнению с инфицированными контрольными 1проба ми.

Соединения считают активными, ког- 1да их индекс активности рассчитан

как отношение МТД/МИК , 2.

Предлагаемые соединения проявляют цитостатические свойства против опухолевых клеток, в результате чего их можно использовать для замедления роста различных опухолей.

В таблице показаны данные активности некоторых соединений предлагаемой формулы, идентифицированных внутренним кодом, в сравнении с наиболее изученным известным соединением дистамициномА.

Соединения, указанные в таблице, испытывались на цитотоксичность (что является выражением противоопухоле5,15

вой активности) на мышиных клетках, поврежденных лейкемией L 1210.

Использовали клетки из опухоли in vivo.- и помещали в клеточную культуру. Клетки использовали до десятого протока. Цитотоксичность определяли подсчетом выживших клеток после 4 ч обработки и 48 ч роста в среде, свободной от лекарственных препаратов.

Процент роста клеток в обработанной среде сравнивали с процентом контрольных клеток. Значения LD (дозы, ингибирующие 50% клеточного роста до отмеченного к контрольным) подсчитывали на кривой дозе-реакция.

где R-группа a) -CON(NO )Р1 где Р„ - С1-С4-алкил, незамещенный или замещенный галогеном40

метилоксиранил, азириди- нил, циклопропил,

.или

m « или 2.

отличающийся тем, что хло- б) -СО(СНа)т-Р 7, где ристо-водородную соль N-деформкпдиста- R г - галоген, оксиранил, мицина формулы

и

н

А

2N А Н

V/Wvv i. О I О

сн

з

CH-i

i О

сн.

Продолжение таблицы

,-сн2- Г

N JtNH

I О СН3

метилоксиранил, азириди- нил, циклопропил,

н

А

А

XH2-.

%н