Способ получения циннолинкарбоксамидов или их фармацевтически приемлемых солей Советский патент 1990 года по МПК C07D237/28 A61K31/502 A61P37/02 

Изобретение относится к способу получения новых производных циннолинкарбоксамидов или их фармацевтически приемлемых солей, обладающих им- муномоделирующим действием.

Цель изобретения - способ получения новых производных циннолинкарбоксамидов, по иммуностимулирующей активности превосходящих структурные аналоги, обладающих той же активностью.

Пример 1. 4-окси-Циннолин-З- карбоновую кислоту (4 г) подвергают взаимодействию с SOClj (33 г) при температуре обратного флегмообразова- ния 2ч. После охлаждения реакционная

месь выпаривается досуха в вакууме, затем остаток (4-оксициннолин-З-кар- бонил-хлорид) суспензируют в дихлорэтане (700 мл) и подвергают взаимодействию с 3-аминопиридином (3,95 г) при перемешивании при комнатной температуре 2 ч. Осадок фильтруют и промывают дихлорэтаном и затем водой до нейтрального состояния. Полученный продукт очищают на колонке с SiO с использованием в качестве элю- ента смеси хлороформ:метанол:уксусная кислота в соотношении 95:5:1. После промывки кипящим метанолом получают 2,6 г чистого 4-окси-М-(3-пиридил)- ценнолин-3-карбоксамида, т.пл. 326- 328°С.

СП

Од СО СП

см

ЯКР-спектр (диметилсульфоксид, dfe), «Г, м.д.: 3,3 (м) (7Н, С-4 и С-6 пиридиловые протоны и фенильные протоны); 8,87 (д.) (1Н, пиридиловый протон); 11,95 (широкий с.) (1Н, CONH-).

Аналогичнь1М образом, получают следующие соединения: 4-окси-К-фенил- циннолин-3-карбоксамид, т.пл. 335- 337 С; 4 окси-Н-метил-№-фенил-цинно- лин-3-карбоксамид, т.пл. 264-266°С; 4-окси-1 -(4-метил-фенил)-циннолин-3- карбоксамид, т.пл. 335-337 С; 4-ок- си-N(2,6-диметил-фенил)-циннолин-3- карбоксамид, т.пл, 360-365е С (с разл

П р и м е р 2. Сложный метиловый эфир 4-окси-циниолин-З-карбоновой кислоты (6 г) подвергают взаимодействию с 2-аминопиридином (16,6 г, поэтапный ввод) в полифосфорной кислоте 300 г (160 г Н3РО и 140 г PjOj) при 150°С и одновременном перемешивании в течение 10 ч. После охлаждения раствора ледяной водой и нейтрализации 50%-ным NaOH осадок фильтруют и промывают водой. После кристаллизации из диметилформамида получают 4S9 г 4-окси-М--(2-пиридил)- циннолин-3-карбоксамида, т.пл. 341- 343°С.

Осуществляя процесс аналогичным образом, получают следующие соединения; 4-окси Ы-(4-пиридил)-циннолин- 3-карбоксамиД, т.пл. 358-360°С; 4-ок си-К(5-метил 2 пиридил)циннолин-3- карбоксамид, т.пл, 339-341 С„

П р и м е р 3. 4-окси-Циннолин 3- карбоновую кислоту (858 г) растворяют в дихлорметане (600 мл)в присут- ствий триэтиламина ( г). В этот раствор при перемешивании прикапываю этилхлорфо.рмат (6 г), разбавленный дихлорметаном (50 мл) при 0-5°С. Смесь реагирует при данной температу ре 1 ч, затем вводят 2-метиламино- пиридин (4,55 г). Реакционную смесь выдерживают при 0-5&С в течение 1 ч9 затем при комнатной температуре 2 ч с одновременным перемешиванием.

Органический раствор промывают 2,5%-ным NaHC03 и водой, затем выпаривают досуха в вакууме, Остаточньй продукт выпаривания очищают на колонке с SiO с использованием в ка- честве элюентов этилацетата, затем смеср этилацетат;метанол в соотношении 95;5, Получают 1,65 г 4-окси-М- метил-Ы-(2-пиридил)-циннолин-3-карбоксамида, т.пл, 237-239 С (из этанола) .

ЯКР-спектр (диметилсульфоксид, dj),J4 м.д.: 3,43 (с.) (ЗН, CHj); 7,0-8,3 (м.) (8Н, фенильные и пиридиловые протоны),

П р и м е р 4. Сложный метиловый эфир 4-окси-циннолин-3-карбоновой кислоты (0,6 г) подвергают взаимодействию с 2-аминопиридином (0,56 г) при перемешивании в ксилоле (120 мл) при температуре обратного флегмооб- разования 48 ч, В ходе данной реакци медленно отгоняется 60 мл ксилола. После охлаждения осадок фильтруют и промывают ксилолом. Получают 0,35 г 4-окси-М(2-пиридил)-циннолин-3 - карбоксамида, т.пл. 341-343°С (из диметилформамида) .

Осуществляя процесс аналогичным образом, получают следующие соединения : 4-окси-Ы-фенил-цинколин-3-карб- оксиамид, т.пл. 335-337°С; 4-окси-Н- (З-пиридил)-циннолин-З-карбоксамид, т.пл. 326-327°С; 4-окси-№-(4-пири- дил)-циннолин-3-карбоксамид, т.пл. 358-360°С.

П р и м е р 5. 4-окси-К -(3-Пири- дил)-циннолин-3-карбоксамид растворяют путем обработки эквивалентным количеством этилата натрия в этаноле.

Растворы выпариваются досуха и остаточный продукт выпаривания обрабатывают простым изопропиловым эфиром, затем фильтруют и в результате получают натриевую соль 4-окси-Н-(3- пиридил)-циннолин-3-карбоксамида, т.пл. 300°С. Осуществляя процесс аналогичным образом, получают следующие соединения: 4-окси М-(2-пири- дил)-циннолин-3-к арбоксамид, на три- евая соль, т.пл. 300°С и 4-окси-№- фенил-циннолин-3-карбоксамид, натриевая соль, т.пл. 300°С.

Биологические испытания.

Иммуномодулирующая активность соединений, полученных по предлагаемому способу доказана, например, на том факте, что эти соединения эффективны в усилении цитотоксического действия микрофагов по отношению к опухолевым клеткам в условиях ин витро.

Экспериментальная7процедура для оценки этого действия заключается в следующем: группы мышей по 4 шт. обрабатываются путем ввода в них внутр брюшинно испытываемых соединений, и затем, спустя 7 дней, перитониальные

клетки собираются и высеваются на чашки в течение 2 ч при 37°С. По прошествии этого периода времени стенки промываются с целью удаления не подвергнутых связыванию клеток, затем вводятся опухолевые клетки, служащие мишенью, и инкубация продолжается в течение 48 ч, В конце этого периода осуществляют оценку жизнеспособности клеток - мишеней колориметрическим методом и осуществляется количественная оценка при 570 нм.

В таблице суммированы данные иммуностимулирующей активности некоторых соединений, отвечающих данному изобретению, получаемых согласно описанной экспериментальной процедуре, по отношению к опухолевым клеткам TU5 (Eur. J. Itnmunol., 1982, v. 12, р 320),совместно с данными известного соединения 4-амино-№-фенил-цинно- лин-3-карбоксамид (внутренний код FCE-K) по ЕР 205272.

В таблице FCE 24089 - 4-гищюкси- N- (2-пиридин)-циннолин-3-карб:о.ксамид, FCE 25008 - 4-гидрокси-Ы-фенил-цинно- лин-3-карбоксамид, FCE 25051 - 4- гидрокси-М-метил-Ы-(2-пиридил)-цин- нолин-3-карбоксамид, FCE 25273 - 4- гидрокси-Ы-(5-метил-2-пиридшг)-цинно- лин-3-карбоксамид, FCE 25512 - 4-гидр окси-N-(2,6-диметил-фенил)-циннолин- 3-карбоксамид, FCE-K - 4-амино-И-фе- нил-циннолин-3-карбоксамид.

Цитотоксическая активность рассчитывается как процент ингибирова- ния роста опухолевых клеток TU5 с помощью следующей формулы:

% ингибирования

(O.D.A-O.D.B)-(O.C.C-O.D.D)

------------ , где

O.D.A - оптическая плотность от сов

0

5

0

5

0

5

0

5

0

5

местно выращенных TU5 и обработанных, эксципиентом макрофагов; O.D.B - оптическая плотность лишь от обработанных эксципиентом макрофагов; O.D.C - оптическая плотность от совместно выращенных TU5 и обработанных соединением FCE макрофагов; O.D.D - оптическая плотность лишь от обработанных соединением FCE макрофагов.

Тот же самый процент ингибирования был продемонстрирован соединениями /предлагаемого изобретения под кодом FCE 24089, FCE 25008, FCE 25051, FCE 25273 и FCE 25512 в форме натриевой соли. Данные по активности, приведенные в таблице, показывают, что отдельный класс соединений в соответствии с предлагаемым способом является более активным в качестве иммуномо- дулирующего агента по сравнению с известными структурными аналогами (4- амино-3-циннолинкарбоксамидами), раскрытыми в ЕР 205272.

В качестве предпочтительного примера предлагаемых соединений, обладающих иммуномодулирующим действием, можно назвать соединение 4-окси-И- (2-пиридил)-циннолин-3-карбоксамид (внутренний код FCE 24089).

Соединения, отвечаюаде предлагаемому изобретению, могут быть безопасно использованы в медицине.

Так, например, острая токсичность () у мышей, вызванная 4-окси-К-(2- пиридил)-циннолин-3-карбоксамидом, определяемая (при вводе через рот) при одиночном вводе с возрастающими дозами и измеряемая на седьмой день после дня обработки, составляет более 800 мг/кг. Аналогичные данные токсичности были установлены и для других соединений, полученных предлагаемым способом. Соответственно, соединения FCE 25008, FCE 25051, FCE 25273 и-FCE 25512 имеют мг/кг per OS.«

Таким образом, предлагаемые соединения обладают иммуномодулирующим действием и могут использоваться, в частности, как иммуностимуляторы, например, при лечении острых и хронических инфекционных заболеваний как бактериального, так и вирусного происхождения, и при лечении неопластичес- ких заболеваний у млекопитающих животных.

Формула изобретения

Способ получения циннолинкарбокс- амидов формулы

ОН

CON

Я

«2

или их фармацевтически приемлемых

солей,

где Rf - водород или С -С -алкил,

R - фенил или пиридильное кольцо, незамещенное или замещенное одной или двумя группами С1-С4-алкил5

отличающийся тем, что

соединение формулы

где Z - карбоксигруппа или его активное функциональное производное,

подвергают взаимодействию с соединением формулы

.

R

где Rf и R имеют указанные значения, с выделением целевого соединения в свободном виде или в виде фармацевтически приемлемой соли.

Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности получения циннолинкарбоксамидов общей ф-лы CH=CH-CH=CH-C=C-C(OH)=CK-N=N, где K-C(O)-NR₁R₂

R₁-H или C₁ - C₄-алкил

R₂-фенил, пиридил, не-, или моно-, или дизамещенный C₁-C₄-алкилом, или их фармацевтически приемлемых солей, обладающих иммуномоделирующей активностью, что может быть использовано в медицине. Цель - создание новых более активных веществ указанного класса. Синтез ведут реакцией циннолинкарбоновой кислоты или ее активного функционального производного с амином ф-лы NHR₁R₂, с последующим выделением в свободном виде или в виде соли целевого продукта. Новые вещества можно использовать для лечения острых и хронических инфекционных заболеваний как бактериального, так и вирусного происхождения, а также при лечении неопластических заболеваний у животных. 1 табл.

Составитель А.Свиридова Редактор Е.Папп Техред М.Дидык

Заказ 1069

Тираж 324

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„, д. 4/5

Производственно-издательский комбинат Патент, г.Ужгород, ул. Гагарина,101

Корректор М„Пожо

Подписное