Способ получения антрациклиновых гликозидов Советский патент 1990 года по МПК C07H15/24 A61K31/704 

см

Изобретение относится к способу получения новых производных антрациклн- новых гликозидов общей формулы

О Р.,

он

HCJ

I

где R1 - водород; один из

КгиК3 - гидроксильная группа; а другой из RJ и R, - нитрогруппа; R4 - водород или гидроксильная

группа,

обладающих противоопухолевой актив - ностью.

Цель изобретения - получение новых антрацинлиновьгх. гликозидов, обладающих бопьшей противовирусной активностью, чем структурные аналоги - доксорубицин и даунолицин, и меньшей

токсичностью путем синтеза указанных соединений.

35

Приме р 1. Получение (+)А-де- метокси-6-деокси-6-нитродауномицинона (соединение 5).

а) Получение 4-цеметокси-6-деокси- 7,9,11-триаде тил-дауномицинона(промежуточного соединения 2).

4-деметокси-6-деокси-дауномициной 4д (соединение 1), (1,7 г 4,8 ммоль) нагревают при 90°С при перемешивании вместе с уксусным ангидридом (25 мл) и пиридином (25 мл). После 2-часового нагревания реакционную смесь выли-.,

вают в смесь льда с водой и оставляют стоять в течение 30 с при перемешивании. Твердое вещество отфильтровывают, промывают водой и кристаллизуют из метанола, получая названное соединение - 2 (выход 2,19 г (.94%), т.пл. 225- 226°С).

ИК (KBZ), см : 1770 (ароматический сложный эфир), 1740 (алифатический слолс- ный эфир), 1720 (алифатический кетон), 1675 (ароматический кетон), 1590 (Ат).

УФ (МеОН), XWOIKC, нм: 210,258,334.

Маес-спектрометрия гысокого разрешения: т/7. 478 (100, М).

55

0

5

0

5

0

5

д .,

5

I1MP (200 МГц, CDC13): 2,11 и 2,01 (синглеты, 61), ОСОСН3), 2,22 (спи глет, ЗН, СОСИ,), 2,52 (синпгет, 311, Аг - ОС:ОСН3), 2,4-3,3 (.мупьтиплет, 4Н) , 6,17 (расширенный пик, 1Н, /-Н) , 7,7- 8,25 (мультиплет, 511).

) Получение 4-деметокси-6-деокси- 7 , 9-диацетил-дауномицинона (сое;;- - пение 3).

Полученное соединение 2 (2,1 г

4.5ммоль) растворяют в метаноле (220 мл) и метилене (110 мл). Раствор 1 и. морфолина в метаноле (18 мл,

4эквивалента) добавляют и pacisop оставляют стоять при 40°С в течение

5ч. После нейтрализации водным

1 и. раствором НС1 растворитель удаляют под вакуумом и остаток кристаллизуют из метанола, получая названнное соединение 3 (выход 1,7 г (90%), т.пч. 265°С с разложением).

ИК (КВг), см- : 3440 (фенольный ОН); 1745, 1720, 1670 (нехелатирован- ный хинон), 1630 (хелатированный хи- нон), 1590.

Масс-спектромегрия высокого разрешения: m/Z 436 (М + ).

УФ и видимый спектры поглощения (МеОН), хмакг, нм : 204,220,258,336, 386,404.

ПМР (200 МГц, CUClj): f 2,09 и 2,04 (синглеты, 6Н, OCOCHj), 2,25 (синглет, ЗН, СОСН3), 2,54 3-40 (мулынплет, АН), 6,19 (двойной дуСлет, ,1 и

5.6Гц, 1Н, 7-Н), 7,77-8,35 (мульги- плет, 5Н), 13,11 (сингле т, 1Н, 11-ОН).

в) Получение 4-деметокси-6-деокси- 6-нитро-7,9-диацстнл-дауноминцинона (промежуточное соединение 4).

К смеси полученно о соединения 3 (1,6 г, 3,66 ммоль), (1,6 г, 20 ммоль) и (CF3CO).jO (18 мл) добавляют безводный (300 мл) в атмосфере азота и при энергичном перемешивании при комнатной температуре. По истечении 90 с добавляют метанол (Зл), получая желтый осадок, который отфильтровывают, промывают свежеперегнанным метанолом и этиловым эфиром. После высушивания получают названное соединение 4 (выход 1,23 г (70%), т.пл. 263-2Ь4°С).

ИК (КВг), см-1: 347D, 1745, 1720, 1675, 1635, 1585, 1540 (Лг - N0).

Mace-спектрометрия высокого разрешения: m/Z 481 (М ).

УФ и видимый спектры (М(Ч)Н) , хмакс , нм: 216, 260, 338, 400.

515

Г1МР (200 МГц, СГ)С1Э): 2,04 и 2,00 (синглеты, 611, OCOCHj), 2,24 (сингле т, ЗН, СОСНэ), 2,43-3,51 (мульти- плет, 4Н), 6,22 (двойной дублет, J 2,3 и 5,4 Гц, HI, 7-H), 7,8-8,4

(мультиплет 4Н), 13,59 (синглет, 1Н, 11-ОН).

Полученное выше на стадии b соединение 4 (1,1 г, 2,3 ммопь) растворяют в ТГФ (220 мл).

К раствору добавляют 0,1 н. NaOH (220 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота и при перемешивании. После 1 ч раствор доводят до рН примерно 7 с помощью 1 к. раствора НС1 и растворитель удаляют под вакуумом. Остаток растворяют с помощью СНгС1з, раствор промывают водой до тех пор, пока смесь не нейтрализуется высушивают над Ь аг504 и растворитель выпаривают. После хроматографирования на силикагеле получают названный продукт реакции - соединение 5 (выход 0,77 г (90%), т.пл. 233-234°С с раз- ложением).

ИК (КВг), см-1: 3570, 3470, 1710, 1680, 1630, 1585, 1535.

Mace-спектрометрия высокого разрешения: m/Z 398 (МН + ), 397 (Mf).

УФ и видимый спектры (МеОН), , нм: 216, 260, 341, 384, 401.

ПМР (200 МГц, CDC13); d 2,23-3,22 (мультиплет, 4Н), 2,41 (синглет, ЗН, СОСИ,), 4,02 (дублет, ,4 Гц, , 7-ОН), 4,67 (синглет, 1Н, 9-ОН), 5,02 (три дублета, ,3,4,3 и 8,4 Гц, 1Н, 7-Н), 7,8-8,4 (мультиплет, 4Н), 13,51 (синглет, 1Н, 11-ОН).

П р и м е р 2. Получение 4-деметок си-11-дезокси-11-нитродауномицинона (соединение 10).

«) Получение 4-деметокси-6,7,9- триацетил-11-деоксидауномицинона (промежуточного соединения 7).

4-Деметокси-11тдеокси-дауномицинон (соединение 6).(О,7 г, 2 ммоль) перемешивают вместе с уксусным ангидридом (10 мл) и пиридином (10 мл) при

комнатной температуре. Спустя 24 ч реакционную смесь обрабатывают так, как описано в примере 1а, получая названное выше соединение 7 (выход 0,88 г (93%), т.пл. 220-222°С).

ИК (КВг), см 1: 1780, 1730, 1720, 1675, 1590.

УФ (МеОН), хмакс, нм: 210, 258, 334.

156

Mace-спектрометрия высокого разрешения: m/Z 479 (МН), 478 (М4).

ПМР (200 МГц, CDCb, ): с/1 2,03 (синглет, 6Н , ОСОСНу ) , 2,23 (синглет, ЗН, СОСНЭ), 2,44 (счнглет, ЗН, Лг - ОСОСН,), 2,44 - 3,39 (мультиплет, 4Н), 6,46 (уширенный пик, 1Н 7-Н), 7,75-8,3 (мультиплет, 5Н).

6) Получение 4-деметокги-7 , 9-ди- ацетил-11-деокси-дауномицинона (промежуточного соединения 8).

Полученное соединение 7 (0,83 г, 1,74 ммоль) обрабатывают способом, описанным в примере 16, получая названное соединение 8 (выход 0,67 г (88/О, т.пл. 244°С).

ИК (КВг), см-1: 3430, 1730, 1665, 1640, 1590.

УФ и видимый спектры (МеОН),Л мякс нм: 208, 226, 254, 334, 384, 400.

Mace-спектрометрия высокого разрешения: m/Z 436 (М ).

ГМР (200 МГц, СПС1Э): f 2,04 (синглет, 6Н, OCOCHj), 2,24 (синглет ЗН, СОСН3), 2,40-3,30 (мультиплет, 4Н), 6,47 (двойной дублет, ,0 и 5,5 Гц, 1Н, 7-Н), 7,8-8,3 (мультиплет, 5Н), 13,06 (синглет, 1Н, 6-ОН)

в). Получение 4-деметокси-7,9-ди- ацетил-11-деокси-11-нитродауномицино на (промежуточного соединения 9).

Полученное гоединение 8 (0,62 г, 1,42 ммоль) обрабатывают с NH4NOj (0,57 г, 7,1 ммоль), (CF3CO)20 (4мл) в безводном СНгС17 (90 мл). Используя методику, идентичную примеру 16 получают соединение 9, (выход 0,5 г (73%), т.пл. с разложением) .

ИК (КВг), 3450, 1740, 1710, 1680, 1635, 1590, 1545 (Аг - М02).

УФ и видимый спектры (МеОН),

,KC НМ 208 254 334, 40°Mace-спектрометрия высокого разрешения: m/Z 481 (М).

ПМР (200 МГц, CDC13): d 2,06 и 2,04 (синглет, 6Н, ОСОСН 3), 2,2 (синглет, ЗН, СОСН3), 2,42-3,03 (мультиплет, 4Н), 6,50 (двойной дублет, ,7 и 5,5 Гц, 1Н, 7-Н), 7,8-8,4 (мультиплет, 4Н), 13,50 (синглет, 1Н, 6-ОН).

Полученное на стадии Ь соединение 9 (0,45 г, 0,94 ммоль) обрабатывают 0,1 н. раствором NaOH так, как это описано в примере 1 г, получая продукт реакции - названное выше соеднмение 10 (выход 0,34 г (91%), т.пл. 231-233°С).

ИК (КВг), см 1: 3550, 1710, 1675, 1630, 1540.

УФ и видимый спектры (МеОН), л„акс, им: 210, 214, 218, 250, 326, 336, 400.

Mace-спектрометрия высокого разрешения: m/Z 397 (М + ).

Вычислено для 5NO g 397,Г7У8, найдено 397,0808.

ПМР (200МГц, CDC13): rf 2,18-3,1 (мультиплет, 4Н); 2,38 (синглет, ЗН, СОСН3), 3,85 (дублет, ,2 Гц, 1Н, 7-ОН), 4,55 (синглет, 1Н, 9-ОН), 5,36 (три дублета), ,8, 4,8 и 6,2 Гц, 1Н, 7Н), 7,8-8,4 (мультиплет, 4Н) , 13,7 (синглет, 1Н, 6-ОН).

II р им е р 3. Получение 4-деме- токси-6-дезокси-6-нитро-1 -трифтораце- тил-даунорубицина (соединение 11).

К охлажденному раствору (15°С) рацемического 4-деметокси-6-дезокси- 6-нитродауномицинона 5 (0,7 г, 1,76 ммоль) в безводном хлористом метилене (140 мл) одновременно и быстро добавляют при энергичном перемешивании и пропускании азота 1-хлор, N,0- ди-(трифторацетил)-даунозамин (1,88 г, 5,28 ммоль) в безводном (40 мл) и трифторметансульфонат cepeb- ра (1,4 г, 5,28 ммоль) в безводном этиловом эфире (40 мл). После 20 с добавляют насыщенный водный раствор NaHC03 (100 мл) и смесь оставляют стоять при перемешивании в течение 10 с. Смесь фильтруют через цеолит, органический слой отделяют, промывают водой, высушивают над и растворитель удаляют под вакуумом.

Желтое вещество растворяют в МеОН (300 мл) и оставляют стоять в течение ночи при комнатной температуре, чтобы удалить 0-трифторацетильную группу.

Остаток, получающийся при выпаривании растворителя, хроматографируют на силикягелр пюирующей системой: CH.jCl.j-EtOAC-CH COOH (90:10:1) v/v) получая о(-гликозиды 7(5): 9(8) с выходом 0,43 г (39%) «и 7(R):9(R) с выходом 0,43 г (39%)

Для 7(S):9(S):

Т.пл. 245-246°С.

ИК (КВг), 3470,3450, 1720, 1700 (N-трифторацетил), 1680,1635, 1590,1535.

Масс-споктрометрия высокого разрешения: т/7. 023 (МП4).

0

5

0

5

0

5

0

5

0

5

УФ и видимый гпектры (МеОН), , м: 208,260,341,384,401.

и, ° (0 0,05541 в МеОН).

КД (МеОН): Of226 ,31, df270 ,94, uf 292 ,67, /if 340 ,68.

ПМР (200 МГц, CDC1,): 1,24 (дублет, ,8 Гц, ЗН, 5 -СИ.,); 1,82 (тройной дублет, ,1; 12,4 и 12,4 Гц, 1Н, 2 акс - И), 1,94 (дублет, ,2 Гц, 1Н, 4 - ОН), 1 ,95 (двойной дублет, ,0 и 12,4 Гц, 1Н, 2 экв - Н), 2,15 (двойной дублет, ,3 и 15,1 Гц, 1Н, 8 акв-Н), 2,34 (синглет, ЗН, СОСНЭ), 2,48 (тройной дублет, ,8; 2,3 и 15,1 Гц, 1Н, 8 экв Н), 3,10 (дублет, ,7 Гц, 1Н, 10 акс-Н), 3,27 (двойной дублет, J 1,8 и 18,7 Гц, 1Н, 10 экв-Н), 3,65 (двойной дублет, ,7 и 8,2 Гц, 1Н, 4 -Н), 4,1-4,3 (мультиплет, 1Н, З -н), 4,30 (квартет, ,8 Гц, 1Н, 5 -Н), 5,00 (дублет, ,1 Гц, 1Н, 1 -Н) , 5,11 (двойной дублет, ,3 и 4,3 Гц, 1Н, 7-Н), 6,61 (дублет, ,0 Гц, 1Н, NHCOCFj), 7,8-7,9 (мультиплет, 2Н, 3-Н), 8,2-8,4 (мультиплет, 2Н, 1-Н, 4-Н), 13,55 (синглет, 1Н, 11-ОН).

Для 7(R):9(R):

Т.пл. 145-14б°С.

Mace-спектрометрия высокого разрешения: m/Z 623/10, (МН), 579(100).

КД (МеОН): df 226 ,9, &Е 271 нм +7,26, дЈ 292 нм -0,27, ЙЈ 300 ,56, л Ј 340 нм -5,1, ГоП -293° (,0635 и МеОН).

ПМР (200 МГц, CDC13): / 5 ,1 4 (триплет, ,0 Гц, 1Н, 7-Н), 5,27 (мультиплет, 1Н, 1-Н).

П р и м е р 4. Получение хлоргидрата 4-деметокси-6-дезокси-6-нитро- даунорубицина (соединение 12).

4-Деметокси-6-дезокси-6-нитро-К- трифторацетил-даунорубицин (0,130 г, ммоль) растворяют в ацетоне (6 мл). При О С в атмосфере азота и перемешивании добавляют 0,1 н. раствора NaOH (60 мл). После 2 ч ацетон удаляют под вакуумом и рН доводят до 4,5 с помощью 0,1 н. НС1.

Водный раствор экстрагируют с помощью , доводят рН до примерно 6,5-7,0 с помощью 0,1 н. NaOH и экстрагируют с помощью (Л1;С1. Органический слой промывают подои, высушивают над Na,jS04 и pan оритель выпаривают. Остаток растворяют в МеОН (5 мл), подкисляют ш т ппькими. каплями раствора НС1 в МеОН и при добавлении ДИЭТШЮВ01О эфира и н-гексана выпадает в осадок хлоргидрат. Твердое вещество фильтруют, промывают диэти- ловым эфиром до нейтрализации среды и высушивают, чтобы получить названное соединение 12 (выход 0,080 г (68%), т.пл. 173°С с разложением).

ИК (КВг), см : 3400,1710,1675, 1630,1590,1540.

Mace-спектрометрия высокого разрешения: m/Z 527 (МН4).

Приме р 5. Получение 4-деметок си-11-дезокси-11-нитро-К-трифгораце- тил-даунорубицина (соединение 13).

Рацемический аглюкон 11 (0,290 г, 0,73 ммоль) превращают в соответствующий гликозид, как это описано в примере 3, Названный продукт реакции 7(S):9(S)c выходом 0,1 г (24%) и его диастереомер 7(R);9(R)J с выходом 0,1 г (24% получают после хрома- то графического разделения.

Для 7(S):9(S):

Т.пл. 237-240°С с разложением.

ИК (КВг), 3500,3400,1720, 1675,1640,1540.

Масс-спектрометрня высокого разрешения: m/Z 579М -СООНЭ).

УФ и видимый спектры (МеОН), 207,259,335,400.

КД (МеОН): йе 221 ,1, ДЈ250 ,0, ,1, ЛЈ330 нм + 3, 1, йЈ400 ,0. (,0623 в МеОН).

ПМР (200 МГц, CDC13): of 1,30 (дублет, ,5 Гц, ЗН, 5, -СН3), 1,86 (тройной дублет, ,0; 13,0 и 13,0 Гц, 1Н, 2 акс-Н), 2,03 (двойной дублет, ,4 и 13,0 Гц, 1Н, 2 экв-Н), 2,13 (двойной дублет, ,3 и 14,9 Ги, 1Н, 8 акс-К), 2,36 (три дублета, ,6, 2,2 и 14,9 Гц, 1Н, 8 экв -Н), 2,37 (синглет, ЗН, СОСН3), 2,89 (двойной дублет, J 1,6n18,2 Гц, 1Н, 10 экв - Н), 3,12 (дублет, J 18,2 Гц, 1Н, 10 акс - Н), 3,68 (двои рой дублет, ,0 и 8,0 Гц, 1Н, 4 -К)

4,15-4,30 (мультиплет, 1Н, З -Н), 4,25 (квартет, ,5 Гц, 1Н, 5 -Н, синглет, 1Н, 9-ОН), 5,30 (двойной дублет, ,2 и 4,3 Гц, 1Н, 7-Н), 5,47 (дублет, ,5 Гц, 1Н, -Н), 6,70 (дублет, ,0 Гц, 1Н, NHCOCF3), 7,8-7,9 (мультиплет, 2Н, 2-Н, 3-Н), 8,2-8,4 (мультиплет, 2Н, 1-Н, 4-Н), 13,72 (синглет, 1Н, 6-ОН). Для 7(R):9(R):

0

5

0

5

0

5

0

5

0

5

Масс-спектрометрия высокого разрешения: m/Z 579 (100, М -СОСН3).

ПМР (200 МГц, CDC13): S 5,35 (мультиплет, 1Н, 1(-Н), 5,59 (двойной дублет, ,0 и 3,5 Гц, 1Н, 7-Н).

Приме р 6. Получение хлоргидра- та 4-деметокси-11-дезокси- 1-нитро- дауноруб щина (соединение 14).

Соединение, полученное по примеру 5 (0,090 г, 0,145 ммоль), обрабатывают так, как это описано в примере 4, получая названное соединение 14 (выход 0,061 г (75%), т.пл. с разложением) .

ИК (КВг), см- :3400,2900,1710, 1670,1635,1590,1540.

Масс-спектрометрия высокого разрешения: m/Z 527 (МН4).

УФ и видимый спектры (МеОН) , awo,c , м: 208, 222, 256, 402.

Пример. 4-Деметокси-6-деок- си-6-нитро-доксорубицин (соединение 15).

4-Деметокси-6-деокси-6-нитро-дауно- рубицингидрохлорид из примера 4 (0,86 г, 1,52 ммоль) растворяют в 50 мл метанола и 50 мл диоксана. К перемешиваемому раствору добавляют трн- этилортофтормиата (1,5 мл) и 0,92 мл раствора брома в хлористом метипене (30 мас.% объема).

После выдерживания в течение 4 ч при комнатной температуре раствор выливают в смесь диэтилового эфира (300 мл) и н-гексана (500 мл) и осажденный 4-деметокси-6-деокси-6-нитро- 1З-диэтилкеталь-14-бром-даунорубицин собирают и промывают эфиром.

Твердый материал растворяют 6 120 мл 0,25 н. бромистоводородной кислоты и 120 мл ацетона. После выдерживания в течение 16 ч при комнатной температуре добавляют 4,8 г формиата натрия, растворенного в 50 мл воды, и спустя 24 ч при 50°С раствор обрабатывают насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия до щелочного рН среды.

При встряхивании с хлористым метиленом реакционная смесь дает красноватый осадок 4-деметокси-6-деокси- 6-нитро-14-броми-даунорубицина, который отфильтровывают и промывают водой. Маточный раствор экстрагируют несколько раз хлористым метиленом, и растворитель удаляют в вакууме, получая вторую порцию неочищенного продукта.

И15

Эти две порции объединяют и растворяют в метаноле, содержащем 10% уксусной кислоты, 20 г силикателя, добавляют в этот раствор и растворитель осторожно удаляют в вакууме. Твердый материал загружают на верх колонки (5x30), приготовленной из си- ликагеля и хлористого метилена, а- тем элюируют смесью (80:10 об/об) хлористый метилен - 95%-ный этиловый спирт. Чистые фракции собирают, и растворитель удаляют в вакууме. Остаток растворяют в метаноле, охлаждают при ОвС, подкисляют 0,5 н. раствором НС1 в метано.ле до значения рН около 3.

При добавлении диэтилового эфира образуется желтый осадок, который отфильтровывают и промывают эфиром. После высушивания в вакууме получают 0,45 г (суммарный выход 51%) гидрохлорида 4-деметокси-6-деокси-6-нитро- доксорубицина.

ИК-спектр (КВг), 3400, 1710, М675, 1630, 1590, 1540.

ФД-масс-спектр: м/е543 (МН+).

УФ видимый спектр (МеОН), мс,с. нм 208,260,341,384,401.

RЈ (пластина с кизельгелем F 254 дихлорметан/метанол/уксусная кислота/вода 80:20:7:3)0,37.

Примерв. 4-Деметокси-11-деок- си-11-нитро-доксорубицин (соединение 16).

4-Деметокси-11-деокси-11-нитро- даунорубицингидрохлорид из Примера 6 (0,35 г 0,62 ммоль) растворяют в 15 мл метанола и 15 мл диоксана. К перемешиваемому раствору добавляют 0,5 мл триэтилортоформиата и 0,34 мл раствора брома в хлористом метилене (30 мас.%).

Спустя 4 ч реакционную смесь выливают в смесь из 150 мл диэтилового эфира и 300 мл н-гексана, образовавшийся осадок 4-деметокси-11-деокси- 11-нитро-1З-диэтилкеталь-14-бром- даунорубицина отфильтровывают и промывают эфиром.

Твердый материал растворяют в 25 мл 0,25 н. бромистоводородной кислоты и 25 мл ацетона и выдерживают в течение ночи при комнатной температуре. Добавляют 1,5 г (формиата натт рия, растворенного в 15 мл воды и температуру повышают до 50 С в течение 24 ч.

301512

Добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия до щелочной среды н смесь экстрагируют хлористым метиленом.

Органический слой сушат над сульфатом натрия и растворитель 4-деметокси- 11-деокси-11-нитро-14-бромо-даунору- бицина удаляют в вакууме. Неочищ н- Ю ный материал очищают на хроматог,мафической колонке с кизельгелем, которую элюируют смесью хлористый метилен/ /метанол/уксусная кислота 160:20:8. Чистые фракции собирают, промывают 15 насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и водой до нейтральности, затем продукт экстрагируют, промывая его раствором воды и 0,1 н. соляной кислоты при рН около 3.

2Q Водный раствор подвергают лиофиль- ной сушке, получая 0,17 г (общий выход 47%) гидрохлорида-4-деметокси- 11-деокси-11-нитро-доксорубицина.

ИК-спектр (КВг), : 3400,2900, 25 1710,1670,1635,1590,1540.

ФД масс-спектр: м/е543 (MHf).

УФ и видимый спектр (МеОН), MnKC: нм: 208, 222, 256, 402.

Rf (пластина с кизельгелем F 254 30 хлористый метилен/метанол/ /уксусная кислота/вода 80:20:7:3) 0,407.

Биологическая активность соединений по примерам 6 и 4.

Соединения испытывали по сравнению с даунорубицином (ДНР) против клеток Hela и Р 388 ин витро. Соединения испытывают путем растворения их в виде хлоргидратов в воде.

35

Ин виво действие соединения против

Р 388 асцитной лейкемии представлено в табл. 1.

Активность указанных соединений испытывают против диссеминированной (распространенной) лейкемии Кросса. Результаты представлены в табл. 2. В этой системе два новых соединения при максимальной испытанной дозе (22,5 мг/кг и 50 мк/кг для соединений по примерам 6 и 4 соответственно) были более активными, чем ДНР при максимальной переносимой дозе ПО мг/кг).

Данные по токсичности, приведенные в табл. 5, для соединения 15(пример 7) относительно лейкемии Гросса являются исключительно благоприятными. Никакой гибели от токсичности при дозировке 29,6 мг/кг по сравнению с 4/10 факта

ми гибели от токсичности исходного лекарства доксоруГпгцина гтри дозиропке 16,9 мг/кг для обоих лекарств.

Следует также отметить более высокую активность соединения 16 (пример 8) относительно рассеянной Гросс- лейкемии: 275/233 при использовании почти эквивалентных доз испытуемого Соединения и контрольного лекарства.

Формула изобретения

Способ получения антрациклино- вых гликозидов общей формулы

О В-,

ГХШ2Р4 ЧОН

HCJ

НО NH2

где R., - водород;

один из R и R, - гидроксильная

группа, а другой из RJ и RJ - нит- рогрутта;

R4 - водород или гидроксильная

группа,

отличающийся тем, что аг ликон общей формулы

° °(II)

где R,,R, и R3 имеют указанные значения,

подвергают конденсации с 1-хлор-М,О- ди(трифторацетил)-даунозамином формулы

5

Н3С

С1

h4

сг,.со

i

COCF5

R безводном хлористом метилене в атмосфере азота при ч°С п присутствии трифторметансульфоната серебра с получением диастереомерной смеси 7(8), 9(S) и 7(R), 9(R) антрациклиновых гликозидов формулы

А 1 - 1

CHj

I-

ая

аг-

аО-/-r-J (IV)

.CF5OCO И

M ,COCFj

где R1,R,R3 имеют указанные значения, затем удаляют защитную 0-трифтор-аце- тильную группу взаимодействием с метанолом в течение; ночи при комнатной

температуре, отделяют 7(S), 9(S) N- трифторацетильный антрадиклиновый гликозид от 7(R), 9(R) антрациклиново- го гликозида хроматографией на колонке с силикагелем, элюируя смесью ме30 тилендихлорид - этилацетат - уксусная кислота в соотношении 90:10:1 (v/v), удаляют N-трифторацетильную защитную, группу из полученного 7(5), 9(5) антрациклинового гликозида сред35 ним щелочным гидролизом 0,1 н, гидроокисью натрия с выделением целевого продукта формулы (1), где R4- водород, в виде его гидрохлорида путем взаимодействия свободного основания

40 с метанольным раствором хлористого водорода и в случае необходимости бромируют полученное соединение в 14 - положении с последующей обработкой полученного таким образом 14-бром45 производного водным раствором формиа- та натрия) с получением целевого продукта формулы (1), где R - гидроксильная группа, и выделением его в виде его гидрохлорида.

Таблица 1 Действие против асцитной лейкемии Р 388

Изобретение касается антрациклиновых гликозидов, в частности соединений общей ф-лы: @ где R₁=H

один из R₂ и R₃=OH, другой NO₂, @ где K=-CH-CH₂-CH(NH₂)-CH(OH)--CH(CH₃)-O

R₄=H,OH. ОНИ ОБЛАДАЮТ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТЬЮ, ЧТО МОЖЕТ БЫТЬ ИСПОЛЬЗОВАНО В МЕДИЦИНЕ. ЦЕЛЬ - СОЗДАНИЕ НОВЫХ, БОЛЕЕ АКТИВНЫХ И МЕНЕЕ ТОКСИЧНЫХ ВЕЩЕСТВ УКАЗАННОГО КЛАССА. СИНТЕЗ ВЕДУТ РЕАКЦИЕЙ АГЛИКОНА (ВМЕСТО ГРУППЫ CH₂R₄ в соединении ф-лы I находится метил) с I-хлор-N, 0-ди(трифторацетил)даунозамином в среде безводного CH₂CL₂ в атмосфере азота при 15°С в присутствии трифторметансульфоната серебра. Затем удаляют защитную группу: CF₃-C(O)-O, обработкой метанолом в течение ночи при комнатной температуре, проводят отделение 7 (S), 9(S), N-трифторацетильного антрациклонового гликозида от 7 (R), 9(R)-антрациклинового гликозида хроматографией на колонке с силикагелем с элюированием смесью CH₂CL₂-CH₃C(O)OC₂H₅-CH₃C(O)OH (соотношение объемов 90:10:1). Далее удаляют с NH группу CH₃-C(O)-щелочным гидролизом с помощью 0,1 N NAOH. Выделяют целевой продукт в виде хлоргидрата путем обработки основания раствором HC1 в метаноле. При необходимости полученное соединение бромируют в положение 14 с последующей обработкой водным раствором формиата натрия, получением соединения ф-лы I с R₄ = OH и выделением его в виде гидрохлорида. Новые соединения более активны, чем известный даунорубицин, в отношении асцитной лейкомии Р388 и рассеянной Грос-лейкомии. 5 табл.

2,9 4,4 4 6 9 13,5

15 157 132 162 17 124

0пыты были осуществлены на мышах вида СДГ, зараженных 10 клетками лейкемии внутрибрю- шинно.

Лечение внутрибрюшинно один раз в день после опухолевого инокулята.

Среднее время выживания вылечиваемых мышей/среднее время выживания контрольных мышей хЮО.

0ценивается на основе аутентических заключений.

Таблица2 Действие против лейкемии Гросса

0пыты были осуществлены на мышах вида СЗН, зараженных 2x10 клетками лейкемии внутривенно. Лечение внутривенно один раз в день после

инокулирования опухоли.

Средняя продолжительность выживания вылечиваемых мышей/средняя продолжительность выживания контрольных мышей хЮО.

0ценивается на основе аутентических (путем вскрытия трупа) заключений.

1/10 5/10 0/10 0/10 1/10 9/10

1715510151Я

ТаблнцаЗ Активность прппш клеток Не la и 10 v0 вне организма

Испытание ингибирсгеания колонии проводили после 24 ч обработки ИДу0- доза, вызывающая ингибирова- ние.

ТаблицаА Активность Е организме против асцитичной Р 388 и рассеянной Гросс-лейкемии

Р 388 - лейкемия инокулирована внутриорюштшо в день 0. Обработка внтрибрюшинно в 1-й день.

Гросс-лейкемию инокулировали внутривенно в день 0. Обработка - внутривенно в 1-й день. 0тношение среднего времени выживания обработанных мышеи к среднему

времени выживания контрольных животных х100. 0ценена на основании данных вскрытия.

ТаблицаЗ Активность в организме против Гросс-лейкемии и рака молочной железы

Гросс-лейкемию инокулировали внутривенно в день 0. Обработка внутривенно в 1-й день. 0бработка внутривенно, количество 7с/х4, начиная с момента, когда

опухоль прощупывается пальцами. 0тношение среднего времени выживания обработанных мышей к среднему

времени выживания контрольных животных хЮО . 0ценена на основании данных.