Способ получения метилового эфира @ -L-аспартил-L-фенилаланина или его гидрохлорида Советский патент 1990 года по МПК C07K5/75 

Изобретение относится к усовершенствованному способу получения метилового эфира о(-Ь-аспартил-Ь-фенилалани на («J.-APM, аспартам) или его гидрохлорида, используемого в качестве диетического подслащивающего средства.

Целью изобретения является упрощение процесса и повышение содержания а -изомера в целевом продукте.

ПримерКВббг воды растворяют 5,0 г твердого гидрата окиси натрия, затем 19,8 г (0,12 моль) L-фе- нилаланина и полученный раствор охлаждают до ОС. К раствору постепенно добавляют 18,8 г (0,13 моль) ангидрида М-формил -аспарагиновой кис- -{лоты при в течение 30 мин. Во время добавления к реакционной жидкости прибавляют каплями 45%-ный водный раствор гидроокиси натрия с таким расчетом, чтобы выдерживать при рН . Далее проводят реакцию при этой температуре 1 ч.

Часть реакционной жидкости анализируют методом высокоскоростной жидкостной хроматографии. Результатом служит отношение образования N-фор- мил-о6 -аспартил-1,-фенилаланина к N-формил | г -аспартил-Ы-фенилаланину 75,4:24,6, причем общий выход двух

СП СП

С5 СП

Ј ND

Cri

соединений составляет 96,8%, считая на L-фенилаланин.

К реакционной смеси добавляют 14,4 г метанола и после этого вводят 26,8 г хлористого водорода при температуре ниже 55ЙС.

Получаемую реакционную смесь подвергают реакции при 1 м. Далее реакционную смесь охлаждают до , 25°С и подвергают дальнейшей реакции при 20-25°С 4 дня.

Вслед за этим реакционную смесь охлаждают ниже 5°С и перемешивают при 0-5°С 3 ч. -АРМ-гидрохлорид, осаж- . денный при этих условиях, отфильтровывают и промывают холодной водой, что дает отжатую на фильтре плотную влажную массу белого ьЈ -АРМ-гидрохлорида . Влажную массу анализируют высО- коскоростной жидкостной хроматографией. Результат анализа: содержание oi- АРМ 19,3 г при выходе 54,7%, считая на исходный L-фенилаланин.

П р и м е р 2. Отжатый на фильтре 2 плотный влажный й-дрм-гидрохлорид, полученный по примеру 1, суспендируют в 200 мл воды°и нейтрализуют при 20-25 С 20%-ным водным раствором карбоната натрия (рН 5,0). Полученную суспензию охлаждают до 5 °С и перемешивают при той же самой температуре 1 ч. Выпав- Шие при этом в осадок кристаллы отфильтровывают, промывают холодной водой и высушивают в вакууме, что дает 17,4 г свободного -АРМ. Его анализ, 3 проведенный высокоскоростной жидкостной хроматографией, показал отсутствие загрязнений в -АРМ. Удельное вращение было следующим l0 16,07 (с 4, 15 н. муравьиная кислота).

ПримерЗ. В 101 г воды растворяют 7,0 г хлопьевидной гидроокиси калия, затем 19,8 г (0Л12 моль) L-фенил- аланина и полученный раствор охлаждают до 0°С. К полученному водному раствору при 0-5°С постепенно добавляют 18,9 г (0,13 моль) ангидрида М-фор- мил-аспарагиновой кислоты в течение 30 мин. Во время добавления 16,0 50%-ного водного раствора гидроокиси калия одновременно прибавляют каплями к реакционной жидкости, поддерживая при рН 8-11. Затем реакционную жидкость перемешивают 1 ч при той же температуре.

Часть реакционной жидкости анализируют высокоскоростной жидкостной хро3

- 0

5 5

5

0

матографией. Результат показал, что отношение образования М-формил-с -Ь-ас- партил-Ь-фенилаланина к М-формил-р - -Ь-аспартил-Ь-фенилаланину составляет 77:23, в то время как общий выход двух соединений составляет 98,9%.

К реакционной смеси добавляют 19,2 г метанола, затем вводят 40,2 г хлористого водорода при температуре ниже 55°С. Полученную реакционную смесь затем подвергают реакции при 30 мин .Далее реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и дополнительно подвергают реакции при комнатной температуре 5 дней.

После реакции реакционную смесь охлаждают ниже 5 ° и перемешивают при 3 ч. -АРМ-гидрохлорид выпавший при этих условиях в осадок отфильтровывают и промывают холодной водой для получения белого Ы-АРМ-гидрохло- рида. Его анализ высокоскоростной жидкостной хроматографией показал содержание 17,4 г при выходе 49,3%, считая на исходный L-фенилаланин.

П р и м е р 4. В 66 г воды растворяют 5,0 г гидроокиси натрия, затем

19.8г (0,12 моль) L-фенилаланина и полученный водный раствор охлаждают до минус 5°С. Далее к водному раствору добавляют 18,8 г (0,13 моль) ангидрида Ы-формил -аспарагиновой кислоты при температуре ниже 10СС примерно за 1 ч.

В это же время к реакционной жидкости прибавляют каплями 19,0 г 30%- ного водного раствора гидроокиси натрия, выдерживая рН среды 8-11. Затем реакцию проводят 1 ч при той же температуре.

Часть реакционной жидкости анализируют высокоскоростной жидкостной хроматографией. Результат показал, что отношение образования М-формил-с(,- -аспартил -фенилаланина к N-фор- мил-В аспартил-фенилаланину составило 76,1:2,9 при общем выходе соединений 97)4%, считая на исходный L-фенилаланин.

К реакционной смеси добавляют 8,3 г метанола и после этого вводят

35.9г хлористого водорода при температуре менее 55°С. Полученную реакционную смесь подвергают реакции, при 50-55°С 1 ч и охлаждают до 30°С. Реакцию продолжают далее 7 дней при той же температуре.

515565 2

После реакции реакционную смесьАнализ высокоскоростной жидкостной

обрабатывают таким же образом, какхроматографией показал, что в

описано в примере 1, мто дает а -АРМ-никаких загрязнений не обнаружено,

-гидрохлорид, содержащий 20,5 г о -АРМУдельное вращение п/ -АРМ: 16,0

с выходом 58,1%, считая на исходный- 5(, 15 н. муравьиная кислота), фенилаланин.Пример. В смешанном раствоПримерБ. В 66 г воды раство-рителе, состоящем из 115 г воды и

ряют Ц,Ц г метанола; 5,1 г твердой18,2 г метанола растворяют 7,0 г хло- гидроокиси натрия и еще 19,8 г (0,12 моль) - фенилаланина, затем полученный раствор охлаждают до 0°С. К

10

раствору постепенно добавляют 19,8 г

пьевидного гидрата окиси калия и 19,8 г (0,12 моль) L-фенилаланина, после чего полученный водный раствор охлаждают до 0°С. К водному раствору

(0,13 моль) ангидрида N-формил-Ь-аспа- постепенно добавляют 18,8 г (0,13 моль} рагиновой кислоты при за 30 мин.(г ангидрида Ы-формил-Ь-аспарагиновой К реакционной жидкости прибавляют каплями водный раствор гидроокиси натрия так, чтобы рН был в пределах . Далее реакцию проводят 1 ч при той же температуре.

Часть реакционной жидкости аналикислоты при температуре 0-5 С в течение 30 мин. Во время добавления одновременно к реакционной жидкости прибавляют каплями 15,5 г 50%-ного водно- 20 го раствора гидроокиси калия, выдерживая рН среды 8-11. Далее реакцион10

постепенно добавляют 18,8 г (0,13 моль} ангидрида Ы-формил-Ь-аспарагиновой

кислоты при температуре 0-5 С в течение 30 мин. Во время добавления одновременно к реакционной жидкости прибавляют каплями 15,5 г 50%-ного водно- го раствора гидроокиси калия, выдерживая рН среды 8-11. Далее реакцион

Изобретение относится к химии пептидов, в частности к получению метилового эфира α-L-аспартил-L-фенилаланина или его гидрохлорида, используемого в качестве диетического подслащивающего средства. Цель - упрощение процесса и повышение содержания α-изомера в целевом продукте. Получение ведут конденсацией ангидрида N-формиласпарагиновой кислоты и L-фенилаланина при PH 8 - 12 в присутствии или в отсутствии метанола 4 - 6 моль на 1 моль L-фенилаланина в водной среде. Воду берут в 3 - 10-кратном количестве по отношению к L-фенилаланину. Процесс ведут с последующими деформилированием и этерификацией образовавшегося N-формил-α-L-аспартил-L-фенилаланина обработкой хлористоводородной кислотой (15 - 25 мас.%) в присутствии метанола - 4 - 6 моль на 1 моль L-фенилаланина. Полученный метиловый эфир α-L-аспартил-L-фенилаланина гидрохлорид выпадает в осадок, его отделяют и при необходимости нейтрализуют.

зируют высокоскоростной жидкостной НуЮ жидкость перемешивают 1 ч при той хроматографией. Результат показал, что же температуре.

отношение образования М-формил-ot-L- Долю реакционной жидкости анализи- -аспартил-Ь-фенилаланина к М-формил- 25 руют высокоскоростной жидкостной хро- -р-Ь-аспартил-Ь-фенилаланину состав- матографией. Результат: отношение об- ляет 7,3:25,7, причем общий выход разования М-формил- Ь -тспартил-Ь-фе- двух соединений 98,4% считая на исход- нилаланина к М-формил-р-Ь-аспартил- ный L-фенилаланин.-L-фенилаланину составило 75,7:24,3

29,5 г хлористого водорода вводят зо ПРИ общем выходе двух соединений

98,6%.

ч5,0 г хлористого водорода вводят в реакционную смесь при температуре ниже 55 °С, после чего реакционную смесь подвергают реакции при 50-55 С. 1 ч. После этого реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и

в реакционную смесь при температуре менее 60°С и полученную реакционную смесь подвергают реакции при 50-60°С 1 ч. Образованную реакционную смесь охлаждают до 25°С и подвергают дополнительной реакции при. А дня. Затем реакционную смесь охлаждают ниже 5°С и перемешивают при 0-5 °С 3 ч.

гидрохлорид, выпавший при этих условиях в осадок, отфильтровывают и промывают холодной водой, что дает влажную плотную массу отжатого на фильтре белого ci-APM-гидро- хлорида. Анализ влажного, обжатого на фильтре осадка высокоскоростной жидкостной хроматографией показал содержание 19,8 г oi-APM. Выход 56,1%, считая на исходный L-фенилаланин.

П р и м е р 6. Влажный, отжатый на

35

40

подвергают дополнительной реакции при комнатной температуре 6 дней.

После реакции реакционную смесь охлаждают ниже 5°С и перемешивают при

2 ч. -АРМ-гидрохлорид при этом выпавший в осадок отфильтровывают и промывают холодной водой, что да- 45 ет белый с -АРМ-гидрохлорид. Анализ -АРМ-гидрохло рида высокоскоростной жидкостной хроматографией показал, что он содержит 17,6 г ui-APM при выходе 9}9%, считая на исходный L-фефильтре осадок, полученный по примеру 50 нилаланин.

5, суспендируют в 200 мл воды и нейт- Пример 8. В смеси растворите- рэлизуют при 20-25°С 20%-ным водным раствором гидроокиси натрия (рН 5,0). Далее суспензию охлаждают до 5СС и перемешивают 1 ч при той же температуре. Выпавшие при этом кристаллы от- фильтровывают, промывают холодной водой и высушивают в вакууме, что дает

55

лей, состоящей из 66 г воды и 7,7 г метанола, растворяют 5,0 г гидроокиси натрия и 19,8 (0,12 моль) L-фенилаланина и полученный раствор охлаждают до 5°С,К раствору постепенно добавляют 18,8 г (0,13 моль) ангидрида17,5 г свободного .

-М-формил -асларагиновой кислоты при температуре ниже 10°С примерно 1 ч.

35

подвергают дополнительной реакции при комнатной температуре 6 дней.

После реакции реакционную смесь охлаждают ниже 5°С и перемешивают при

2 ч. -АРМ-гидрохлорид при этом выпавший в осадок отфильтровывают и промывают холодной водой, что да- ет белый с -АРМ-гидрохлорид. Анализ -АРМ-гидрохло рида высокоскоростной жидкостной хроматографией показал, что он содержит 17,6 г ui-APM при выходе 9}9%, считая на исходный L-фе Пример 8. В смеси растворите-

лей, состоящей из 66 г воды и 7,7 г метанола, растворяют 5,0 г гидроокиси натрия и 19,8 (0,12 моль) L-фенилаланина и полученный раствор охлаждают до 5°С,К раствору постепенно добавляют 18,8 г (0,13 моль) ангидрида Пример 8. В смеси растворите-

-М-формил -асларагиновой кислоты при температуре ниже 10°С примерно 1 ч.

715

К реакционной жидкости прибавляют каплями 30%-ный водный раствор гидроокиси натрия ( г), выдерживая рН среды при 8-12. Реакцию продолжают 1 ч при той же температуре.

Часть реакционной жидкости анализируют высокоскоростной жидкостной .хроматографией. Результат показал: отношение образования N-формил- -Ь- -аспартил-Ь-фенилаланина к М-формил- - -Ъ-аспартил-Ъ -фенилаланину составило ,2 при общем выходе двух соединений 97,8%.

25

15

В реакционную смесь вводят 31,0 г хлористого водорода при температуре ниже 60°С и полученную реакционную смесь подвергают реакции при 50-60°С 1 ц. Выпавший в осадок хлорид натрия 20 отфильтровывают и промывают небольшим количеством 20%-ной хлористоводородной кислоты. Фильтрат и промывные жидкости объединяют и подвергают реакции при 30°С 7 дней.

После реакции реакционную смесь . обрабатывают, как указано в примере 1 Таким путем получают ьЈ-ЛРМ гидрохлорид, содержащий 19} г сУ-АРМ при выходе 55,0%, считая на исходный L-фенилаланин.

П р и м е р 9. В 33 г воды добавляют 330 г (0,2 моль L-фенилаланина, а затем каплями добавляют 21,3 г 50%- ного водного раствора КОН. В раствор медленно загружают 3,3 г (0,2 моль) ангидрида N-формил-Ь-аспарагиновой ,кислоты в течение 1 ч при и реакцию проводят при той же температу30

35

После охлаждения до 5 С или ниж перемешивания в течение 3 ч при 0 осажденный таким путем 5(-АРМ гид хлорид отфильтровывают и промывают лодной водой с получением влажного осадка на фильтре ОС-АРМ гидрохлор белого цвета. Влажный осадок на фи ре анализируют высокоскоростной жи костной хроматографией, что указыв на содержание 27,8 г Ч-АРМ.

Пример 10. Процедуру приме повторяют, но с тем исключением что 38, (1,2 моль) метанола испол ют вместо 30,5 г метанола для пров дения реакции. Влажный остаток на фильтре представляет собой гидрохл «/-АРМ, содержащий 18,4 г -АРМ.

Пример11.В190г воды ра воряют 5,0 г твердого гидроксида н рия, а затем 19,8 г (0,12 моль) Lнилаланина и полученный раствор ох лаждают до 0°С. К раствору медленн добавляют 18,8 г (0,13 моль) ангид да N-формил-Ь-аспарагиновой кислот при . После этого реакцию про водят при той же температуре в теч ние 1 ч. К реакционной жидкости пр капывают 5%-ный водный раствор ги роксида натрия для сохранения его на уровне 1 .

После завершения реакции к реак онной смеси добавляют 19,2 г метан

в течение 2 ч. На протяжении этой 40 ла. К этой смеси добавляют 58,8 г

процедуры рН реакционного раствора выдерживают в диапазоне 8-12 добавлением 50%-ного водного раствора КОН каплями в раствор. (Общая масса раствора КОН составляет 32,6 г).45

Порцию реакционной жидкости анализируют с помощью высокоскоростной жидкостной хроматографии, в результате чего соотношение между образующимся Ы-формил-о(-1,-аспартил-Ь-фенилаланином и N-формил-ргЬ-аспартил-Ъ-фенилалани- ном составляет 73,5:26,5, а общий выход двух соединений составляет 97,8% в пересчете на L-фенилаланин.

К этой реакционной смеси добавляют 30,5 г метанола. Смесь нагревают при 50°С и к этой смеси медленно каплями добавляют 173,3 г 35%-ной хлористоводородной кислоты при 50-60°С, после

50

55

хлористого водорода после нагрева смеси до 50°С и реакцию проводят п той же температуре в течение 1 ч. ле этого смесь охлаждают до 30°С и дальнейшую реакцию ведут при 30°С течение 5 сут.

Затем реакционную смесь охлажда ниже 5АС и перемешивают при 0-5СС течение 3 ч. Осажденный таким путе с -АРМ-гидрохлорид отфильтровывают промывают холодной водой с получени влажного остатка на фильтре в виде кристаллического -АРМ-гидрохлори белого цвета, который содержит 16, ci-APM.

П р и м е р 12. Реакцию конденс ции L-фенилаланина с ангидридом N-ф мил-1-.-аспарагиновой кислоты привод по методике примера 9« После этого

5

5

0

0

5

чего смесь перемешивают в течение I ч при той же температуре.

Результирующую смесь охлаждают до 30°С и проводят реакцию дальше при той же температуре в течение ч ч.

После охлаждения до 5 С или ниже и перемешивания в течение 3 ч при осажденный таким путем 5(-АРМ гидрохлорид отфильтровывают и промывают холодной водой с получением влажного осадка на фильтре ОС-АРМ гидрохлорида белого цвета. Влажный осадок на фильтре анализируют высокоскоростной жидкостной хроматографией, что указывает на содержание 27,8 г Ч-АРМ.

Пример 10. Процедуру примера 9 , повторяют, но с тем исключением, : что 38, (1,2 моль) метанола используют вместо 30,5 г метанола для проведения реакции. Влажный остаток на фильтре представляет собой гидрохлорид «/-АРМ, содержащий 18,4 г -АРМ.

Пример11.В190г воды раст- ,. воряют 5,0 г твердого гидроксида натрия, а затем 19,8 г (0,12 моль) Lфенилаланина и полученный раствор охлаждают до 0°С. К раствору медленно добавляют 18,8 г (0,13 моль) ангидрида N-формил-Ь-аспарагиновой кислоты при . После этого реакцию проводят при той же температуре в течение 1 ч. К реакционной жидкости прикапывают 5%-ный водный раствор гидроксида натрия для сохранения его рН на уровне 1 .

После завершения реакции к реакционной смеси добавляют 19,2 г метано5

0

5

хлористого водорода после нагрева смеси до 50°С и реакцию проводят при той же температуре в течение 1 ч. После этого смесь охлаждают до 30°С и дальнейшую реакцию ведут при 30°С в течение 5 сут.

Затем реакционную смесь охлаждают ниже 5АС и перемешивают при 0-5СС в течение 3 ч. Осажденный таким путем с -АРМ-гидрохлорид отфильтровывают и промывают холодной водой с получением влажного остатка на фильтре в виде кристаллического -АРМ-гидрохлорида белого цвета, который содержит 16,5 г ci-APM.

П р и м е р 12. Реакцию конденсации L-фенилаланина с ангидридом N-фор- мил-1-.-аспарагиновой кислоты приводят по методике примера 9« После этого

915565 2

реакционной смеси добавляют 7,0 г

р г L о в 18 ми эт ко в 12 ро ос са

метанола и 30,7 г хлористого водорода при 50-60°С и при той же температуре выдерживают.

После этого смесь охлаждают до 30СП и выдерживают при 30°С в течени 6 сут. Повторяют методику примера 1 для получения влажного остатка на фильтре белых кристаллов о/-АРМ-гид- рохлорида, которые содержат 23,3 г -АРМ.

Пример 13. В 66 г воды растворяют lk,k г метанола, 5,1 г твердого гидроксида натрия и 19,8 г (0,12 моль) L-фенилаланина и образующийся раствор охлаждают до О°С. К раствору при в течение 30 мин медленно добавляют 18,8 г (0,13 моль ангидрида N-формил-Ь-аспаратиповой кислоты. В ходе этого добавления к реакционной жидкости для поддержания ее значения рН в диапазоне по каплям добавляют 12,8 г водного раствора гидроксида натрия.После 25 соединений составил 98,6/J по отношению к исходному L-фенилаланину.

3,3 г хлористого водорода вводят в реакционную смесь при температуре ниже 60°С, и полученную реакционную

этого реакцию осуществляют в течение 1 ч при той же температуре,

Часть реакционной жидкости подвергают анализу при помощи скоростной

жидкостной хроматографии,по результа- зп смесь подвергают взаимодействию при

...

там которой соотношение между образо- ванием Ы-формил- -Ь-аспартил-Ь-фенилаланина и Ы-формил-р-Ь-аспартил-Ь- -фенилаланина составило 7,2:25,8, в то время как суммарный выход двух соединений составил 98,6% по отношению к исходному L-фенилаланину.

23,7 г хлористого водорода вводят в реакционную смесь при температуре ниже 6()°С и полученную реакционную смесь подвергают взаимодействию при 50-60°С в течение 1 ч. Образующуюся реакционную смесь охлаждают до 25°С и подвергают дальнейшему взаимодействию

35

40

50-60°С в течение 1 ч. Образующуюся реакционную смесь охлаждают до 25°С и подвергают дальнейшему взаимодейс вию при 20-25°С в течение 6 дней. Ре акционную смесь затем охлаждают до температуры ниже 5°С и перемешивают при 0-5°С в течение 3 ч.

Выпавший в результате в осадок -АРМ-гидрохлорид подвергают фильтрованию и промывают холодной водой с получением мокрого осадка на фильтре с(-АРМ-гидрохлорида белого цвета. Ана лиз мокрого осадка при помощи скорос ной жидкостной хроматографии обнарупри 20-25°С в течение 6 дней. Реакци-д5 жил,что в нем содержалось 17,0 г

о(-АРМ с выходом 8,2% по отношени исходному L-фенилаланину.

,онную смесь затем охлаждают до температуры ниже 5ЛС и перемешивают при в течение 3 ч.

Выпавший в результате в осадок tf-APM-гидрохлорид подвергают фильтро-5 ванию и промывают холодной водой с получением мокрого осадка на фильтре tf-APM-гидрохлорида белого цвета. Анализ мокрого осадка при помощи скоростной жидкостной хроматографии обнару- жил, что в нем содержалось г -АРМ с выходом 45% по отношению к исходному L-фенилаланину.

10

0

5

0

Пример 1. В 66 г воды растворяют 1, г метанола, 5,1 г твердого гидроксида натрия и 19,8 г (0,12 моль) L-фенилаланина,и образующийся раствор охлаждают до 0°С. К раствору при 0-5°С в течение 30 мин медленно добавляют 18,8 г (0,12 моль) ангидрида N-фор- мил-Ь-аспаратиновой кислоты. В ходе этого добавления к реакционной жидкости для поддержания ее знамения рН в диапазоне по каплям добавляют 12,8 г 45%-ного водного раствора гидроксида натрия. После этого реакцию осуществляют в течение 1 ч при той же самой температуре.

Часть реакционной жидкости подвер- гают анализу при помощи скоростной жидкостной хроматографии, по результатам которой соотношение между образованием М-формил-itf-L -а спартил -L-фенилаланина и М-формил-р-Ь-аспартил- -L-фенилаланина составило 7,2:26,8, в то время как суммарный выход двух

смесь подвергают взаимодействию при

.

50-60°С в течение 1 ч. Образующуюся реакционную смесь охлаждают до 25°С и подвергают дальнейшему взаимодействию при 20-25°С в течение 6 дней. Реакционную смесь затем охлаждают до температуры ниже 5°С и перемешивают при 0-5°С в течение 3 ч.

Выпавший в результате в осадок -АРМ-гидрохлорид подвергают фильтрованию и промывают холодной водой с получением мокрого осадка на фильтре с(-АРМ-гидрохлорида белого цвета. Анализ мокрого осадка при помощи скоростной жидкостной хроматографии обнаружил,что в нем содержалось 17,0 г

о(-АРМ с выходом 8,2% по отношению к исходному L-фенилаланину.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет избирательно получать метиловый эфир (у -аспартил -фенил- аланина высокого качества из сложной смеси более простым путем.

Формула изобр е тения

Способ получения метилового эфира о -аспартил -фенилаланина или его гидрохлорида конденсацией ангидрида N-формиласпарагиновой кислоты и L-фенилаланина в растворителе собразова--,

HVieM Н-формил- -Ь-аспартил-Ь-фенилала- нина,который деформилируют и этерифи- цируют с использованием хлористоводородной кислоты и метанола, отличающийся тем, что, с целью упрощения процесса и повышения содержания е -изомера в целевом продукте, в качестве растворителя используют во- JQ йу, взятую в 3 10-кратном количестве по отношению к L-фенилаланину и конденсацию проводят при рН 8-12 в присутствии или отсутствии метанола в количестве k-б молей на 1 моль L-фенилаланина, а деформилирование и этери- фикацию ведут одновременно путем непосредственной обработки реакционной массы хлористоводородной кислотой в присутствии метанола, причем концентрация хлористоводородной кислоты составляет мас.%, а метанол используют в количестве -6 молей на 1 моль L-фенилаланина, полученный метиловый эфир t -L-аспартил-Ь-фенилаланин гидрохлорид выпадает в осадок, его отделяют и, при необходимости, нейтрализуют.