Способ прогнозирования течения гнойной язвы роговицы, обусловленной условно-патогенной микрофлорой Советский патент 1990 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии, и может быть использовано в качестве метода прогнозирования формы течения гнойного воспаления роговицы

Целью изобретения является повышение точности диагностики о

Способ осуществляется следующим образом.

Для изучения функционального состояния фагоцитируюрщх клеток получают 7-10 мл венозной крови, добавляют в пробирку с 25 ЕД гепартша, центрифугируют при 1500 об/мин, в течение 20 мин на двойном градиенте плотности фиколл - верографин (Г) - 1,077, Р4 - 1,094), клетки крови при этом разделяются на 2 фракции: белое кольцо, состоящее из мононулеарных клеток с примесью гранулоцитов, и осадок, содержащий эритроциты и гракуло- циты на дне пробирки Клетки белого кольца осторожно забирают пипеткой и дважды отмывают в растворе Хенкса .путем путем центрифугирования при 1500 об/мин в течение 10 мин. Взвесь клеток разливают по 1 мл в пробирки, на дне которых находятся покровные стекла Клетки инкубируют в термоста- те при 37 С в течение 60 мин. За это время моноциты и нейтрофилы вследствие выраженной адгезивности прикрепляются к прокровному стеклу, образуя монослой„ По окончании инкубации для удаления неприлипших клеток покровные стекла трехкратно отмывают раствором

Sn

sn ч У1

N0

Хенкса и добавляют срезу 199 и 20%-ную человеческую инактивированную сыворотку.

Для определения фагоцитарной актив- ности моноцитов и нейтрофилов в пробирки добавляют по 0,1 мл взвеси стандартных микросфер латекса диаметром 1,2 мкм в концентрации О частиц в 1 мл. Пробирки помещают на 1 ч в ю термостат, после чего монослой клеток трехкратно отмывают раствором Хенкса, высушивают, фиксируют смесью Никифорова и окрашивают по методу Романовского -, Гимза„ В монослое подсчитывают 5 количество поглощенных частиц латекса на 100 сосчитанных клеток - интенсивность фагоцитоза (И).

Для определения количества лизосом в цитоплазме моно- и полинуклеарных 20 фагоцитов в другие пробирки вносят 0,1 мл акридина оранжевого в разведении 2 мкг/мл. После часовой инкубации при 37 С монослой трехкратно отмывают и исследуют во влажном состоянии в 25 сине - фиолетовой области спектра,на люминесцентном микроскопе ЛМ-3„ При заполнении гранулами лизосом всей цитолпазмы их количество оценивается как , на половину заполненная 30 лизосомами цитоплазма клетки как ++, а наличие в цитоплазме единичных лизо35

При отсутствии лизосом в цитоплазме клетки считаются нулевыми. Для подсчета суммарной люминесценции вводятся индексы, которые составляют: для +++ 10; ++ -3; + -1. Полученные результаты складывают, определяют суммарный индекс люминесценции ,Q (СИЛ) и рассчитывают индекс лизосо- мальной активности (ИЛА) ИЛА СИЛ/ко- личество обследованных клеток.

Далее рассчитывают прогностический коэффициент (ПК): ПК ИЛА/ИФ.100 45

Обработка данных методами вариационной статистики показала, что существуют наиболее вероятные интервалы значений ПК (,01) для групп больных с различным течением гнойного воспа- сп ления роговицЫо При значениях ПК 1,95- 2,55 прогнозируют благоприятное течение, при 1,27-1,85 - хроническое, при 2,65-4,65 - прогрессирующее течение.

Пример 1 . Больная Н. 53 лет, ,-с поступила в клинику на 5-й день болезни с диагнозом: гнойная язва рогови- цы, гнойный ирит правого глаза, ОД - выражена смешанная инъекция. В центре

5

0 5 0

5

Q

5

п

с

роговицы гнойный инфильтрат мм в поверхностных и средних слоях с умеренным отеком роговицы вокруг. В зоне инфильтрата роговица окрашивается флюорссцентом, Гипопион 3 мм. Зрачок 3 мм, в его области нежная пленка судата. Радужка гиперомирована Рефлекс тусклый. Острота зрения - счет пальцев у лица. В посеве с язвы получен рост эпидермального стафилококка. Функциональные показатели интенсивности моноцитов: ИЛИ 3,6; ИФ 92; ПК 2,56. Величина ПК свидетельствует о возможности благоприятного течения заболевания. Прогноз подтвердился. В течение 7 дней произошло полное отторжение некроза с образованием неглубокого дефекта ткани. К 14-му дню наступило выздоровление: полная эпите- лизация роговицы с формированием руб- цового помутнения.

П р и м е р 2. Больная Б. 53 лет, поступила на 3-й день болезни с диагнозом: гнойная язва роговицы, гнойный ирит левого глаза. При поступлении: левый глаз - выражена смешанная инъекция с преобладанием перикорнеальной. Гнойный инфильтрат в центре роговицы мм в поверхностных и средних слоях с дефектом эпителия и поверхностных слоев стремы Умеренный отек роговицы вокруг язвы. Гипопион в 2 мм. Радужка гиперемирована. Зрачок узкий. Острота зрения счет пальцев у лица. В посеве получен эпидермальный стафилококк „ Иммунологические показатели моноцитов: ИЛА 4,16; ИФ ПО; ПК - 3,7, что свидетельствует о выраженном дисбалансе фагоцитоза в сторону избытка лизосомальных ферментов моноцитов. В данном случае подтвердился прогноз неблагоприятного течения заболевания: состояние глаза вопреки проводимому лечению ухудшалось, инфильтрат распространился почти до десцеметовой оболочки в глубину. Однако перфорации роговицы не произошло. Процесс закончился рубцеванием с формированием грубого рубца.

Пример 3„ Больная У. 75 лет, поступила на 7-й день заболевания с диагнозом: гнойная язва роговицы левого глаза. При поступлении: перикор- неальная инъекция0 В центре роговицы инфильтрат мм до глубоких слоев стромы. Язва окрашивается. Отсек стромы роговицы вокруг язвы слабо выражен. Влага передней камеры прозрач515575246

нал. Зрачок узкий. Острота зрения патогенетически ориентированную тесчет пальцев у лица. Внутриглазноерапию

давление в норме. В посеве - эпидер- Формула изобретения мальный стафилококк. Иммунологические Способ прогнозирования течения

показатели: ИЛА ИФ 90; ПК гнойной язвы роговицы, обусловленной

1,55. У больной течение заболеванияусловно-патогенной микрофлорой, путем

длительное, отмечалось постепенноеисследования биологического материала,

рубцевание инфильтрата без видимогоотличающийся тем, что, с

отторжения некроза. Эпителизация рого-,0целью повышения точности прогноза, опвицы наступила лишь на 31-й день ста-ределяют лизосомальную и фагоцитарционарного лечения.ную активность моноцитов периферичесТочность прогноза по предложенно-кой крови, рассчитывают отношение

му способу составляет 82%.первого показателя к второму.и при

15значении этого показателя 1,95-2,55

Способ отличается простотой иссле-прогнозируют благоприятное течение,

дования, позволяет осуществлять доста-при значениях 1,27-1,85 - хроническое

точно точное прогнозирование, а еле-и при 2,65-4,65 - прогрессирующее тедовательн, своевременно назначатьчение язвы роговицы.

Изобретение относится к медицине, точнее к офтальмологии, и может быть использовано для прогноза течения гнойной язвы роговицы, обусловленной условно-патогенной микрофлорой. Для этого определяют функциональные показатели моноцитов периферической крови - индекс лизосомальной активности (ИЛА) и интенсивность фагоцитоза (ИФ) и подсчитывают прогностический коэффициент (ПК) по формуле ПК = ИЛА/ИФ ^. 100, по величине которого прогнозируют форму течения гнойной язвы роговицы. Установлено, что при ПК=1,95 - 2,55 прогнозируется благоприятное течение, при ПК=2,65 - 4,65 - неблагоприятное течение с быстрым распространением, угрозой перфорации, при ПК=1,27 - 1,85 - хроническое течение с исходом в грубый рубец. Использование данного способа в прогнозе обеспечивает раннюю диагностику, дает выход для своевременной, патогенетически обоснованной терапии. Точность способа составляет 82%. Способ прост в исполнении и может быть применен в различных медицинских учреждениях.