Способ получения комплексных соединений платины Советский патент 1990 года по МПК C07F15/00 

СН2- (СВДт

X

Изобретение относится к способу получения новых соединений платины общей формулы

г

Pf

Г(ОШП

А

R

Y

А -СН,ь

С -СГу-алкилен; водород или отсутствует галоген, или вместе образу ют радикал формулы

,0

о-с -о-с

0

а, т- 0 или 1 при условии5 когда п-19 X и Y - галоген, которые могут найти применение в медицине,,

Цель изобретения - синтез новых соединений, проявляющих более высокую противоопухолевую активность по сравнению с известными аналогами.

Пример 1. К раствору платина(II)калийхлорида (4S15 rs 0901 моль) в 100 мл воды добавляют раствор 2-аминометштирролидйна (1 г, 0,01 моль) в 10 мл воды,, Полученную смесь перемешивают в- течение 1 дня при комнатной температуре. Образовавшееся твердое вещество собирают фильтрованием, промывают водой и высушивают при 60°С и пониженном давлении в течение 3 ч с получением 3 г дихлор(2 -аминометилпирролидин) платины(И). Выход 82%, т„ пл. 255- 276° С (с разложением).

Вычислено, %: С 16,39; Н 3,3; N 7,65.

C6HaClfcNPt

Найдено, %: С 16,4 Н 3,26; N 7,5. {

ИК-спектр (КВт), VMaKC CM s 3420 3230, 3170 (НН).

К суспензии описанного продукта (3 г, 0,0082 моль) в 300 мл воды добавляют нитрат серебра (2,78 г, 0,0164 моль). Полученную смесь пере мешивают в темноте в течение 3 дней при комнатной температуре, Выпавший белый осадок хлорида серебра удаляют фильтрованиемfиспользуя милипо ристый фильтр (0,22 мкм). Фильтрат„

5

0

S

0

5

5

O

5

содержащий непрореагировавший нитрат серебра, обрабатывают водным раствором хлорида натрия. Образовавшийся хлорид серебра удаляют фильтрованием, а фильтрат упаривают при температуре ниже 40 С при пониженном давлении до 60 мл. К полученному раствору прибавляют динатриевую соль циклобу- тан-3,1-дикарбоновой кислоты (1,54 г, 0,0082 моль) при перемешивании и смесь выдерживают при комнатной температуре в течение 4 дней.

Образовавшееся белое кристаллическое вещество выделяют фильтрованием, промывают водой и высушивают ири 60°С и пониженном давлении в течение 3 ч с получением сухого цикло- бутан-3,1-дикарбоксилат(2-аминометил- пирролидин)платины(И) в количестве 1,86 г. Выход 52%, т. пл. 235-255°С (с разложением).

Вычислено, %: С 30,2; Н 4,15; К 6,4.

C«H 404Pt

Найдено, %: С 30,0; Н 4,11; N 6,61,

ИК-спектр (КВг), иакс, смГ : 3080 (га), 1640, I860 ().

Полученный сухой продукт перекрис таллизовывают из воды с получением в виде очищенного продукта 1,61 г циклобутан-1,1-дикарбоксилат(2-ами- нометилпирролидин)платины(и) (соединение 1). Общий выход 45%, т. пл. 215-220°С (с разложением).

Вычислено, %: С 30,2; Н 4,15; И 6,4.

Найдено, %: С 30,02; Н 4,13; N 6,43,

ИК-спектр (KBr),0Mafcc , 3100, 3190 (ЫН), 1590, 1635 ().

Пример 2.К раствору (S)- пролина (25 г, 0,22 моль) и гидроокиси натрия (8,7 г, 0,22 моль) в 150 мл воды медленно добавляют раствор бензилхлорформата (43,5 г, 0,26 моль) и гидроокиси натрия (11,6 г, 0,29 моль) в 35 мл воды при перемешивании и охлаждении льдом в течение 30 мин, после чего перемешивание продолжают при той же температуре в течение 15 мин. Избыток бензилхлорформата удаляют из реакционной среды экстрагированием 150 мл хлороформа. Водный слой подкисляют 5 н раствором соляной кислоты и полученный маслянистый продукт экстрагируют хлороформом. После высушива

5

ния раствора хлороформа над сульфат магния хлороформ удаляют испарением с получением 52,2 г (з)-1-карбобен- зоксипирролидин-2-карбоновой кислоты в виде масла. Выход 96%.

К раствору полученной (з)-1-кар- бобензоксипирролидин-2-карбоновой кислоты (52,2 г, 0,21 моль) и три- этиламина (21,2 г, 0,21 моль) в 525 мл хлороформа добавляют при перемешивании и охлаждении льдом изо- бутилхлорформат (28,7 г, 0,21 моль) после чего перемешивание продолжают ,15 мин. В течение 1 ч в смесь про- булькивают сухой аммиак, затем повышают температуру до комнатной и оставляют на ночь. Выпавший белый осадок удаляют фильтрованием, а фильтрат испаряют при пониженном давле- .нии. Остаток растворяют в 200 мл хлороформа и промывают разбавленной водной соляной кислотой и водой, высушивают над сульфатом магния. Хлорформ отгоняют с получением 45,8 (8)-карбобензоксипирролидин-2-карбо самида. Выход 88%.

(S)-l -Карбобеняоксипирроли- дин-2-карбоксамид (45,8 г, 0,18 моль растворяют в 400 мл абсолютного метанола и восстанавливают каталитически обычным способом добавлением 10 г 10% палладия на угле в токе водорода. После завершения восстановления катализатор удаляют и растворитель отгоняют при пониженном давлении. Остаток перекристаллизовывают из н-гексана и бензола, промывают -н-гек саном с получением 18,8 г (з)-пирро- лидин-2-карбоксамида в виде белого кристаллического вещества. Выход 89% т. пл. 85-90°С.

К раствору (з)-пирролидин-2-кар- боксамида (18,8 г, 0,16 моль) в 1 л сухого тетрагидрофурана при перемешивании и охлаждении льдом медленно добавляют литийалюминийгидрид (33,9 г, 0,89 моль), после чего смес кипятят 48 ч. После охлаждения реак-- ционную смесь обрабатывают обычным способом водой и тетрагидрофураном с получением масла.

Масло перегоняют при пониженном давлении с получением 6,07 г (S)-2- -аминометилпирролидина в бесцветной жидкости. Выход 37%, т. кип. 80-85°С (20 мм HQ). Ј +10,02°

(н2о).

0

5

20

5

5

0649

На основе (Б)-2-аминометилпирро- лидина по методике примера 1 получена (з)-циклобутан -,1-дикарбокси- лат(2-аминометилпирролидин)плати- на(п) (соединение 2), т. пл. 240- 255еС (с разложением).

Вычислено, %: С 30,2; Н 4,15; N 6,40.

C,(

Найдено, %: С 30,14; Н 4,12; N.6,33.,

ИК-спектр (КБг),А,акс , см :3100, 3190 (NH), 1590, 1635 (). ОЗр +39,17° (НеО).

Пример 3. На основе (к)-про- лина по методике примера 2 получен (Е)-2-аминометилпирролидин, т.кип. 79- 85°С (20 мм HQ), - 8,67° (Нг0).

Но методике примера 1 на основе (Н)-2-аминометилпирролидина получена (к)-циклобутан-,1-дикарбоксилат(2- аминометилпирролидин)платина(II) (соединение 3), т. пл. 248-257 (с разложением) .

С 30,2; Н 4,15;

30

N

N

Вычислено, %: 6,4.

.°4Pt

Найдено, %: С 30,08; Н 4,09; 6,37.

ИК-спектр (KBr),-0MO(KC,

-г

см :

3100,

90 (NH), 1590, 1635 (). -40,1° (НаО).

р и м е р ы 4-18. По методике, описанной в примере 1, получены разМ2 °II

5 личные соединения (соединения 4-18), приведенные в табл 1.

Пример 19. К раствору пла- тины(И)калийхлорида (4,15 г, 0,01 моль) в 60 мл воды прибавляют

0 раствор 2-аминометилазетидина (0,86 г, 0,01 моль) и полученную смесь перемешивают 3 ч при комнатной температуре. Образовавшееся твердое вещество собирают фильтрованием, промывают водой и сушат 3 ч при 60°С и пониженном давлении с получением 2,64 г дихлоро(2-аминометилазетидин)плати- ны(И) в виде белого твердого вещет

50

ства. Выход 75%, т. (с разложением).

пл. 215-235 С

К суспензии описанного продукта (1,76 г, 0,005 моль) в 3 мл воды при комнатной температуре и перемешивании добавляют 18 мл 31%-ной водной перекиси водорода„ Реакционную смесь выдерживают -30 мин при комнатной тем пературе и 1 ч при 80°С. После охлаждения образовавшееся вещество собирают фильтрованием, промывают водой, сушат 3 ч при 60°С и пониженном давлении 1,16 г цис-д ихлоро-транс- -дигидрокси(2-аминометилазетидин) платины(ГУ) (соединение 19) в виде светло-коричневого вещества. Выход 60%, т. пл. 200-220°С (с разложением)

Вычислено, % : С 12,44; Н 3,13; N 1,7.5,

C CljNjOiPt

Найдено, %: С 12,61; Н 3,16; N 7,13.

2-Аминометилазетидин, использованный в примере 19 в качестве исходного соединения, получен восстановлением азетидин-2-карбоксамида в тетрагидрофуране литийалюминийгид ридом.

Примеры 20-27, По методике примера 19 получены соединения, приведенные в табл. 2 (соединения 20-27).

Испытание 1 „

Испытание in vivo противоопухолевой активности против ракового новообразования колон 26.

Небольшие кусочки опухоли колон 26 (1-2 мм ) имплантируют подкожно в боковой области живота мужским особям мышей штамма CDFij/Crj (возраст 6 недель). Через 4 дня после имплантации мыши с почти одинаковым размером опухоли разделены на групп по 5-6 зверьков в каждой, и каждой мыши внутрибрюшинно вводилось испытуемое соединение о Через 10 дней после начала приема соединения каждую мышь умерщвляли, опухоль взвешивали для вычисления отношения инги- бирования роста (ОИР) по следующем уравнению:

ОИР (%)

С - Т

100, (1)

где С и Т - средняя масса опухоли соответственно контрольной и подвергнутой лечению группы

Полученные результаты приведены в табл. 3-7. Для сравнения использовано известное соединение цисплатин (ТЩДП) и известное соединение по патенту США № 4410544.

Испытание 2.

Испытание in vivo противоопухолевой активности против ракового новообразования колон 26.

5

0

5

0

5

0

5

0

5

Небольшие кусочки опухоли колон 26 (1-2 мм) имплантируют подкожно в боковой области живота мужских особей мышей штамма (возраст 7 недель). Спустя 4 дня после имплантации мыши с почти одинаковым размером опухоли разделяют на группы по 5-6 зверьков в каждой группе, и каждой мыши внутрибрюшинно вводят испытуемое соединение на 4, 6 и 8-й день после имплантации в дозировке 40 мг/кг в день. Через четырнадцать дней после имплантации каждую мышь умерщвляют и взвешивают опухоль каждой мыши для подсчета ОИР по уравнению (1 ).

Полученные результаты приведены в табл. 4.

Испытание 3.

Сравнение in vitro способности связываться белками плазмы испытуемых соединений.

Раствор испытуемого соединения добавляют к плазме, полученной от крыс штамма SD в отношении по объему 1:19, что соответствует 5 мкг/мл Pt. Полученную смесь инкубируют в темноте при 37°С. В заранее обусловленное время из смеси отбирают образцы, которые фильтруют через мембраны из молекулярных сит при центрифугировании. Содержание Pt в фильтрате (несвязанная Pt) определяют с помощью атомной абсорбционной спектро- фотометрии.

Полученные результаты приведены в табл. 5,

Испытание 4„

Определение побочных эффектов.

Мужским особям мышей штамма (возраст 6 недель) вводят внутрибрюшинно испытуемое соединение и спустя 1,3 и 5 дней после введения по 3 мыши умерщвляют с целью определения массы тела и уровня мочевин- ного азота в крови (сокращение КМА),,

Полученные результаты (масса тела и КМА) приведены в табл. 6.

Из результатов, полученных-в ис- пытаниях 1 к 2 (табл. 3 и 4), можно видеть, что предлагаемые соединения проявляют более сильную противоопухолевую активность и они эффективны в более широком интервале дозировок по сравнению с теми же показателями для ЦЦДП.

Кроме того, несмотря на то, что комплексные соединения платины связиваются белками плазмы с образованием неактивных форм, предлагаемые соединения проявляют значительно более низкую склонность к связыванию бел- ками плазмы по сравнению с ЦДЦП Предлагаемые соединения обладают пониженной токсичностью и высокой растворимостью в воде, и могут применяться в противоопухолевой терапии.

Результаты испытаний на противоопухолевую активность против колон 2 карциномы приведены в табл. 7,

Из табл. 7 видно, что известное соединение обладает гораздо меньшей противоопухолевой активностью по сравнению с любым предлагаемым соединением.

Кроме того, в связи с противоопухолевой активностью в дозировке, примерно равной МИД (максимально переносимая дозировка), каждое из предлагаемых соединений проявляет противоопухолевую активность, приближающуюся к 100%, в то время как для известного соединения этот показатель равен менее 60%.

Формула изобретения

Способ получения комплексных соединений платины общей формулы I

(QH)n

-X

Y

СНг-МНгх

СНЛп г1Ч (ОШП

A I R

СН

А - С,-С3-алкилен; R - водород или отсутствует; X и Y - галоген, или вместе образуют радикал формулы

где

.0

-о-с -о-с.

:

О

п, т- 0или 1 при усл овии,

о т л произ

, X и Y - галоген

ю щ и и с я тем, что диамина формулы II

CH2-NH2

5

где A, R, m имеют указанные значения, подвергают взаимодействию платина( калийхлоридом с получением соединения общей формулы (la), где , X и Y - галоген, и выделением его или, в случае необходимости, обрабатывают его перекисью водорода, с получением целевого продукта (1б), где , X и Y - галогенид, либо обрабатывают соединение (la) нитратом серебра с последующей обработкой полученного динитрата циклобутан-1,1-дикарбоновой кислотой с получением целевого продукта общей формулы (1в), где , X и Y - вместе ,0

0

5

0

-о-с

-о-сД/

ч

Способ по п,

1

2.Способ по п. 1, отлича ю щ и и с я тем, что производное диамина подвергают взаимодействию с эквимолярным количеством платина(И) калийхлоридом в водной среде при комнатной температуре 3 ч или один день.

3,Способ по п. отличающий с я тем, что соединение формулы (la) подвергают взаимодействию с избытком перекиси водорода в

г

водной среде при 20-80 С в течение 0,5-1 ч,

4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что соединение 5 формулы (la) подвергают взаимодействию с нитратом серебра в молярном соотношении 1:2 при комнатной температуре, в водной среде в течение трех дней.

5. Способ по п. 1, отличающий с я тем, что динитрат подвергают взаимодействию с эквимолярным количеством дикарбоновой кислоты в водной среде при комнатной температуре в течение четырех дней.

Приоритет по при н а к а м:

12.09.84 при А - С -алкилен,

X.

и Y - галоген

О II

-о-с о-с

о

-°-cV

п - 1, 0;

m - 0, 1; R-H или R - отсутствует, 22.01.85 при А - С1-алкилен, X

и Y - галоген, n - 1, m - О, R - водород.

25.04.85 при А - Сг-алкилен, X и Y - галоген, n - 1, m - О, R - водород или X и Y вместе образуют радикал формулы

,о -о-с

-о-с. о

n m -, О, R - водород.

01 „08.85 при А - C-j-алкилен, X и Y вместе образуют радикал форму лы

о

-о-с

-о-сА/

о

,R- водород.

Таблица 1

Продолжение табл.1

Изобретение касается комплексных соединений платины, в частности получения соединений общей ф-лы @ где A- C₁-C₃-алкилен

R - H или отсутствует

X и Y -галоген или (X+Y) - -O-C(O) - @ -C(O)-O-

N, M=0 или при условии, когда N=1, то X и Y - галоген, которые проявляют противоопухолевую активность, что может быть использовано в медицине. Цель - создание новых более активных соединений указанного класса. Синтез ведут реакцией диамина ф-лы NH₂-(CH₂)_M -A-CH₂-NH с платина(2+)калийхлоридом(взятым лучше в эквимолярном количестве, в водной среде при комнатной температуре 3 ч или 1 день) с получением соединения с N=0 и X и Y - галоген, которое либо выделяют, либо при необходимости обрабатывают H₂O₂ (взятой в избытке, в водной среде при комнатной температуре или при нагревании до 80°С 0,5 - 1ч) с получением соединения с N=1 и X и Y-галоген, либо обрабатывают нитратом серебра (лучше взятыми в молярном соотношении 1:2, при комнатной температуре в водной среде в течение 3 дней), либо динитрат обрабатывают циклобутан-1,1-дикарбоновой кислотой (взятой в эквимолярном количестве, при комнатной температуре в течение 4 дней) с получением соединения с N=0 и (X+Y) - -O- C(O) --C-C(O) - O -, которое в сравнении с известным соединением ф-лы @ обладает лучшей активностью в отношении Колон 26 карциномы (при дозе 40 мг/кг степень подавления развития оухоли повышается с 14 до 79%, а при дозе 80 мг/кг - с 45 до 98%). 4 з.п. ф-лы, 7 табл.

13HCH,00

14HСНгСН, О О

15HCH,О О

16HH

1 0

17HH

о о

18HH

о о

Точка плавления с разложением.

ИК-спектр (КВт),

vtг

. CM

Ul

C8H,4Nz04Pt277-281

olclo СНз

Pt

C8H(4Nz04Pt

AN-CH CH3

II° (

Pt

N-CH3

CH3C,H16Ni°4Pt

265-270

259-268

205-215

264-269

275-285

24,173,557,05

24,113,537,01

26,273,926,81

3120 (NH), 1638, 1662, 169l()

3120 (HH).

1660, 1690()

3140 (NH), 1645. 1670, 1690 )

3135, 3210 (NH), 1655, 1698 ()

3080, 3155 (NH), 1650, 1670. 1695 ()

3250, 3220, 3140 (NH), 1700, 1680, 1660, 61 5 ()

Ut

J

о

CT 4 VO

Точка плавления с разложением.

Rl Rl

(ОН)пх

Таблица 2

pt,:

191570649

Таблица 3

0

9

АО

60

80

120

160

40

60

80

120

160

40

60

80

120

160

40

60

80

120

160

40

79 87 98 97

Гибель

94

98 Гибель

70

85

90

95

Гибель . 80

88

98

98

99

60

1

2 3

10 20

20

Продолжение табл. 3

Таблица 4

98 99 95 99 82

1

20

26

ЦДЦГ1

Объект измерения

Дозировка соединения, мг/кг

рт

Контроль (-)

Соединение 2 (60)

Соединение 3 (60)

ВДДП (12) Контроль (-)

Соединение 2 (60)

Соединение 3 (60)

ЦДЦП (12)

Р 0,05. Р Ю,01 .

Таблица 5

9 7

10 62

14

1 1

3

86

38 15 14 93

Таблица 6 Дни после введения

23,6±1,023,7±,4

-23,1±1,419,9±1,

23,4±1,520,1±1,

24,6+1,122,55±1,1

17,10±4,35

20,0±2,617,7±3,1

18,3±3,113,8+1,8

23,3t4,,,9

л. v

О

Таблица 7

мпд