Способ выявления миелинизированных нервных волокон на гистологическом препарате Советский патент 1990 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, а именно к гистологии.

Цель изобретения - полное выявление миелиновых волокон.

Способ осуществляют следующим образом.

Из нефиксированных кусочков тканей изготавливают гистологические срезы толщиной 10-50 мкм с помощью криостата или замораживающего микротома. Срезы помещают в 0,2%-ный раствор четырехоксиси осмия, приготовленный на 0,1%-ном растворе натрия хлорида, на 0,5-16 ч. Навлеченные из фиксирующего раствора срезы споласкивают в тргх порциях дистиллированной воды и помещают в 0,1%-ный раствор гематоксилина (свежеприготовленного) на 0,5-6 ч. При потемнении раствора гематоксилина его заменяют свежим. После извлечения срезов из раствора

красителя их споласкивают в 2-3 порциях дистиллированной воды и проводят дифференцировку окраски по Палю. Степень дифференцировки контролируют под микроскопом, а в случае ее недостаточности процедуру повторяют. Срезы обезвоживают в спиртах восходящей концентрации, проводят через ксилол и заключают в бальзам Результат - миелинизированные нервные волокна окрашивают в интенсивно-черный цвет, фон светло-серо-коричневый. Окраска обусловлена образованием лака, о чем свидетельствует то, что красящие вещества не удаляются из срезов этанолом, ацетоном, ксилолом. Возможно докрашивание препаратов кармином или сафранином, что облегчает изучение взаимоотношения миелиновых нервных проводников и других тканевых структур.

СП

J

00 00

оо

31573386

Пример 1. Биоптат кожи (регенерат) фиксируют в течение 8 ч. Далее приготавливают гистологические срезы кожи, которые контрастировали в 0,1%-ном растворе гематоксилина в течение 4 ч.

и р

имеют четкий черный цвет на серо-коричневом фоне.

Способ позволяет более четко окрасить структуру миелиновых нервных волокон. Позволяет их выявить более полно в исследуемой ткани.

Изобретение относится к медицине, а именно к гистологии. Целью является полное выявление миелиновых волокон. Это достигается тем, что фиксацию проводят в течение 0,5-16 ч в 0,2%-ном растворе четырехокиси осмия. Далее срезы контрастируют в 0,1%-ном растворе гематоксилина. Миелиновые волокна имеют четкую структуру, окрашены в черный цвет, хорошо дифференцируются на светлом серо-коричневом фоне.

При микроскопии видны черные ми- елинизированные нервные волокна на фоне слабо-серо-коричневого фона. В миелиновых оболочках хорошо различимы узловые перехваты и насечки миелина, которые на поперечных срезах имеют вид колец или овалов,окружаю- щих неокрашенные осевые цилиндры.

П и м е р 2. Биоптат продолговатого мозга фиксируют в течение 14ч Далее приготавливают гистологические срезы, которые контрастируют в 0,1%- ном -растворе гематоксилина в течение 6 ч. При микроскопии выявлены все миелиновые нервные волокна, которые

Форму.л а изобретения

Способ выявления миелинизирован- ных нервных волокон на гистологическом препарате путем фиксации в растворе четырехокиси осмия с последующим контрастированием и просмотром под микроскопом, отличающийся1 тем, что, с целью полного выявления миелиновых волокон, фиксацию проводят в течение 0,5-16,0 ч, при этом в качестве фиксатора используют 0,2%-ный раствор четырехокиси осмия, а контрастирование проводят в 0,1%-ном растворе гематоксилина.