Способ диагностики лекарственной аллергии Советский патент 1990 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, а именно к аллергологии, и может быть использовано в клинике внутренних болезней для диагностики лекарственной непереносимости.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Способ осуществляется следующим образом.

Кровь из вен ы берут натощак, используя .в качестве консерванта полиглюкин и гепарин (из расчета 3 мл полиглюкина и 3 капли гепарина на 20 мл крови). Лейковзвесь получают седиментацией крови в течение 1,5 ч при 37°С.

Лейковзвесь разливают в центрифужные пробирки по 1 мл и в каждую порознь добавляют лекарства в соответствующих разведениях. Для пенициллина, стрептомицина, эритромицина, ампициллину используют дозу 5 тыс.ед,, левомицетина 0,5 мг, тетроолеанаО,01 мг, анальгина, сульфосали- цилового натрия, витаминов Bi, Беи С0,1 мл 1%-ного раствора, новокаина и димедрола

0,1 мл 0,1%-ного раствора, йода 0,1 мл 0,25%-ного раствора. В одну из пробирок добавляют 0,1 мл обзидана. Инкубируют в течение 20 мин и затем центрифугируют при 1,2 об./мин в течение 10 мин. Готовят мазки и окрашивают по Шабадашу для выявления гликогена: мазки фиксируют в течение 10 мин в спирте - формалине в соотношении 10:1 и промывают водой. Выдерживают мазки в течение 20 мин в 0,8%-ном растворе перио- дата калия или натрия в темноте, промывают и просушивают. Просушенные мазки окрашивают раствором Шиффа в течение 1 ч в темноте и промывают проточной водой в течение 20 мин. Мазки окрашивают 0,1 %-ным раствором мегиленовой зелени втечение 10 мин и промывают водой,

В 100 лимфоцитах определяют содержание гликогена и при содержании гликогена в лекарственной пробе, равном или меньшем по сравнению с обзидановым тестом, диагностируют лекарственную непереносимость.

(Л

с

о о

...А

ел оэ

Пример. Больная М., 23 года. Диагноз: полиаллергия, бытовая, пылевая, пыльцевая, пищевая и медикаментозная аллергия. Отек Квинке и крапивница на пенициллин. Анамнестически .выявлена крапивница на пенициллин в возрасте 1 мес и отек Квинке в течение последних лет при контакте с пенициллином. Пищевая аллергия на рыбу, цитрусовые яйца. Кожными пробами подтверждена аллергия к домашней пыли, злаковым, овсяИке, тополю, березе /4+/.

У больной производили забор крови и определяли концентрацию гликогена под воздействием лекарств и обзидана следующим образом.

В химическую пробирку наливали 1 мл полиглюкина и добавляли 500 - 800 ЕД (1 - 2 капли) жидкого гепарина, перемешивали. Эту смесь можно приготовить накануне исследования и хранить в холодильнике.

Кровь из вены обследуемой взяли утром натощак в ту же пробирку в количестве 5 - 6 мл, перемешивали осторожным покачиванием и оставляли в термостате при 37°С для спонтанного осаждения эритроцитов. Время зависит от скорости осаждения и не превышает 1,5 ч. Кровь разделилась на два слоя: верхний, мутный желтого цвета - лей- ковзвесь и нижний-- эритроциты. Верхний слой отобрали пипеткой в отдельную пробирку, перемешали.

В две пробирки налили по 1 мл лейков- звеси - опыт и контроль. В контрольную пробирку внесли 0,1 мл 0,1 %-ного раствора обзидана, в опытную - 0,1 мл раствора пенициллина, содержащего 5 тыс.ед. Пробирки поставили в термостат при 36°С на 10 мин.

После 10-минутного центрифугирования при 3 тыс. об./мин из осадка готовили мазки, которые окрашивали по Шабадашу для выявления гликогена.

Содержание гликогена определяли в 200 окрашенных лимфоцитах. Вычисляли средний цитохимический коэффициент, В контрольной пробе он равен 0,40, а под возействием пенициллина -0,18. Таким образом, по меньшему содержанию в опытной пробе по сравнению с контрольной диагностируют непереносимость к пенициллину,

Критерием истины при установлении

непереносимости лекарств в исследованиях избран анамнез. В случаях с доказанной хорошей переносимостью лекарств (контрольная группа) из 23 наблюдений обнаружена 1 ложноположительная проба, т.е. диагностическая точность соответствовала 96%. Средний прирост гликогена под воздействием обзидана в этой группе был равен 44,2±6,4%. В опытной группе больных

с доказанной непереносимостью-лекарств наблюдались 2 ложноотрицательных результата из общего числа обследованных больных в количестве 14, диагностическая точность 86%. Средняя убыль гликогена под

воздействием обзидана в зтой группе обследованных составляла 35,5±11%. Методом вариационной статистики доказано статистически достоверное различие между средними показателями динамики гликогена в контрольной и опытных группах: Т 6,6; ,001.

При суммировании полученных результатов в 37 наблюдениях выявлена диагностическая точность метода 92% (опыт и

контроль).

Формула изобретения Способ диагностики лекарственной аллергии путем цитохимического исследования лейкоцитов после инкубации в присутствии аллергена крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, дополнительно проводят инкубацию лимфоцитов в присутствии 0,1 %ного раствора обзидана в объеме 0,1 мл на 1 мл лейковзвеси с последующим определением содержания гликогена в лимфоцитах и при содержании гликогена в пробе с аллергеном, равном или меньшем по сравнению

с пробой с обзиданом, диагностируют лекарственную аллергию.

Способ относится к медицине, предназначен для применения в клинической практике для диагностики лекарственной непереносимости. Целью изобретения является повышение точности диагностики лекарственной непереносимости. Для этого лимфоциты крови инкубируют с аллергеном, а в качестве контроля используют обзидановый тест, учет реакции ведут по содержанию гликогена в пробе. В случае, если содержание гликогена равно или меньше по сравнению с обзидановым тестом, диагностируют лекарственную аллергию. Точность способа составляет 92%.